王中軍 任立晟 張海平 李永欣 戚慧陽 徐龍強(qiáng)

[摘要]?目的 調(diào)查青島地區(qū)兒童血液源性疾病病人EB病毒（EBV）的感染狀況。

方法收集2013年1月—2017年11月在我院就診的456例≤16歲血液系統(tǒng)源性疾病病人（血液病組）外周全血EBV DNA檢測資料，同時(shí)隨機(jī)選取485例健康兒童作為對照，對兩組檢測結(jié)果及相關(guān)疾病進(jìn)行分析。

結(jié)果血液病組EBV DNA檢出率為19.7%（90/456），明顯高于健康對照組（13.4%，65/485），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.85，P<0.05）;血液病組5～7歲年齡段EBV的檢出率最高，為28.8%。血液病組各疾病EBV DNA檢出率依次為骨髓增生異常綜合征50.0%（3/6）和霍奇金淋巴瘤50.0%（4/8）、急性淋巴細(xì)胞白血病34.3%（24/70）以及組織細(xì)胞增生癥26.7%（4/15），與健康對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.36～19.81，P<0.05）。

結(jié)論青島地區(qū)兒童血液源性疾病病人EBV感染普遍，而且EBV感染與病兒年齡有關(guān)。與EBV感染相關(guān)的疾病以骨髓增生異常綜合征、急性淋巴細(xì)胞白血病及霍奇金淋巴瘤為主。

[關(guān)鍵詞]?皰疹病毒4型，人;兒童;血液病

[中圖分類號]?R725.52;R373.4

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]?A

[文章編號]??2096-5532（2019）01-0085-04

AN INVESTIGATION OF EPSTEIN-BARR VIRUS INFECTION IN CHILDREN WITH HEMATOLOGIC DISEASES IN QINGDAO， CHINA

WANG Zhongjun， REN Lisheng， ZHANG Haiping， LI Yongxin， QI Huiyang， XU Longqiang

（Department of Clinical Laboratory， Affiliated Hospital of Qingdao University， Qingdao 266071， China）

[ABSTRACT]ObjectiveTo investigate the status of Epstein-Barr virus （EBV） infection in children with hematologic diseases in Qingdao， China.

MethodsA total of 456 patients with hematologic diseases， aged ≤16 years， who visited our hospital from January 2013 to November 2017 were enrolled as hematologic disease group， and peripheral blood samples were collected to detect EBV DNA. A total of 485 healthy children were enrolled as control group. Related detection results and diseases were analyzed for both groups.

ResultsThe hematologic disease group had a significantly higher detection rate of EBV DNA than the control group （19.7% （90/456） vs 13.4% （65/485）; χ2=6.85，P<0.05）. The children aged 5-7 years in the hematologic disease group had the highest EBV DNA detection rate of 28.8%. In the hematologic disease group， the children with myelodysplastic syndrome had an EBV DNA detection rate of 50.0% （3/6）， those with Hodgkin’s lymphoma had an EBV DNA detection rate of 50.0% （4/8）， those with acute lymphoblastic leukemia had an EBV DNA detection rate of 34.3% （24/70）， and those with histiocytosis had an EBV DNA detection rate of 26.7% （4/15）; there were significant differences in these detection rates between the hematologic disease group and the control group （χ2=3.36-19.81，P<0.05）.

ConclusionEBV infection is commonly seen in children with hematologic diseases in Qingdao and is associated with age. Myelodysplastic syndrome， acute lymphoblastic leukemia， and Hodgkin’s lymphoma are associated with EBV infection.

[KEY WORDS]herpesvirus 4， human; child; hematologic diseases

EB病毒（EBV）是一種嗜B淋巴細(xì)胞的皰疹病毒，是傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體[1]。90%以上人群存在EBV隱性感染，該病毒還可潛伏感染B淋巴細(xì)胞和上皮細(xì)胞，并刺激細(xì)胞增生及致癌[2-3]。業(yè)已證實(shí)，鼻咽癌和淋巴組織增生性疾病等多種疾病均與EBV感染密切相關(guān)[4-6]。EBV感染與血液系統(tǒng)惡性腫瘤的關(guān)系一直是研究的熱點(diǎn)，而EBV感染與兒童血液系統(tǒng)惡性腫瘤相關(guān)性的報(bào)道卻少見。本文對2013年1月—2017年11月于我院就診兒童血液病病人EBV感染情況進(jìn)行檢測，分析青島地區(qū)兒童血液病病人EBV感染情況以及各種血液源性疾病與EBV感染的相關(guān)性。

1?資料與方法

1.1?研究對象

2013年1月—2017年11月，采集在我院就診的青島地區(qū)≤16歲的血液系統(tǒng)源性疾病病人456例（血液病組）外周全血，其中男233例，女223例。同時(shí)選取青島地區(qū)健康查體兒童485例外周全血作為對照（健康對照組）。

1.2?EBV DNA檢測方法

1.2.1標(biāo)本采集?用一次性無菌注射器采集受檢者靜脈血2 mL，注入含EDTA抗凝劑的玻璃管，立即緩慢顛倒玻璃管混合5～10次，使抗凝劑與靜脈血充分混勻。標(biāo)本采集后立即檢測EBV DNA。

1.2.2PCR擴(kuò)增?采用EBV核酸擴(kuò)增熒光定量檢測試劑盒（中山大學(xué)達(dá)安基因股份公司）和SLAN型實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測系統(tǒng)（上海宏石醫(yī)療科技有限公司）檢測各樣本中的EBV DNA。檢測方法參照相關(guān)文獻(xiàn)方法[7]。PCR反應(yīng)條件為：93 ℃預(yù)變性2 min;93 ℃、45 s，55 ℃、60 s，10個(gè)循環(huán);93 ℃、30 s，55 ℃、45 s，共30個(gè)循環(huán)。檢測系統(tǒng)自動(dòng)顯示EBV DNA核酸擴(kuò)增的動(dòng)力學(xué)曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線，陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為EBV DNA含量≥106 copies/L。

1.3?統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組間率的比較采用卡方檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)??果

2.1?血液病組和健康對照組EBV檢出情況比較

血液病組EBV檢出率為19.7%（90/456），明顯高于健康對照組的13.4%（65/485），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.85，P<0.05）。血液病組病人EBV檢出率在5～7歲年齡段最高，為28.8%，隨著年齡的增加EBV檢出率逐漸降低，但是14～16歲年齡段檢出率高達(dá)24.0%。血液病組EBV檢出率男性略低于女性，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.91）。見表1。

2.2?血液病EBV檢出率和各疾病的相關(guān)性

本文研究結(jié)果表明，血液病組EBV檢出率最高的疾病為骨髓增生異常綜合征50.0%（3/6）和霍奇金淋巴瘤50.0%（4/8），其次為急性淋巴細(xì)胞白血病34.3%（24/70）和組織細(xì)胞增生癥26.7%（4/15），以上疾病EBV檢出率與健康對照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.36～19.81，P<0.05）。血液病組特發(fā)性血小板減少性紫癜和非霍奇金淋巴瘤等疾病EBV檢出率與健康對照組比較差異均無顯著意義（P>0.05）。見表2。

3?討??論

EBV不僅可以感染B細(xì)胞，而且還可以感染人體T細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等，EBV編碼抗原VCA、EA及EBNAs等也可進(jìn)一步激活T淋巴細(xì)胞[8-9]。體內(nèi)EBV感染的B細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞大量存在，引起一系列復(fù)雜的體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)，從而引起不同的EBV相關(guān)疾病[6，10]。不同地區(qū)、性別、年齡及不同疾病人群EBV的檢出率存在差異[11-14]。本研究對青島地區(qū)兒童血液病病人EBV感染情況以及各種血液源性疾病與EBV的相關(guān)性進(jìn)行檢測分析。

本文結(jié)果顯示，血液病病人EBV檢出率明顯高于健康對照組，且5～7歲病兒感染EBV的風(fēng)險(xiǎn)更高。有研究表明，兒童EBV感染率隨著年齡的增加而升高[2，15-16]，本文健康對照組EBV感染的年齡分布也基本符合這一特點(diǎn);但血液病病人中，2～7歲年齡段病兒EBV檢出率最高，可能與該階段病兒免疫系統(tǒng)相對不成熟，而又生活在幼托機(jī)構(gòu)等人員密集場所，更易感染有關(guān)[17-18]。袁軼群等[19]在超過50%的霍奇金淋巴瘤Reed-Sternlerg細(xì)胞（RS細(xì)胞）中檢出EBV DNA。EBV感染的RS細(xì)胞和病毒潛伏蛋白（LMP-1、LMP-2）相互作用導(dǎo)致霍奇金淋巴瘤的發(fā)生[19-21]。孫文文等[22]的一項(xiàng)研究顯示，非霍奇金淋巴瘤病人EBV感染率很低。本文研究結(jié)果顯示，EBV感染與霍奇金淋巴瘤發(fā)生有關(guān)，而與非霍奇金淋巴瘤無相關(guān)性，與孫文文等的報(bào)道一致，而與其他報(bào)道結(jié)果不同[2，23]?？赡芘c本文淋巴瘤病人數(shù)量較少有關(guān)。因此，EBV感染與兒童非霍奇金淋巴瘤的相關(guān)性需要進(jìn)一步研究。

EBV感染與白血病的相關(guān)性還存在爭議。張慧等[24]對158例血液病病人外周血EBV DNA檢測結(jié)果分析顯示，EBV感染與淋巴瘤有關(guān)，而與白血病無關(guān)。苗紅霞等[7]研究認(rèn)為，EBV與急性淋巴細(xì)胞白血病的發(fā)生有一定相關(guān)性。桂瑞瑞等[25]的研究顯示，EBV感染與惡性淋巴系統(tǒng)疾病關(guān)系密切，與髓系白血病無顯著相關(guān)性。本文研究結(jié)果顯示，急性淋巴細(xì)胞白血病組EBV DNA檢出率明顯高于健康對照組，而粒細(xì)胞白血病組EBV DNA檢出率與健康對照組比較差異無顯著性，提示EBV感染與淋巴細(xì)胞白血病發(fā)生有關(guān)，而與粒系白血病無相關(guān)性。EBV首先通過入侵人體淋巴細(xì)胞引起淋巴細(xì)胞增殖性疾病，這在一定程度上可以解釋為什么淋巴細(xì)胞白血病的發(fā)病與EBV感染存在一定關(guān)系。國外有研究顯示，母親妊娠期間感染EBV與兒童急性淋巴細(xì)胞白血病的發(fā)生有關(guān)[26]。我們在調(diào)查過程中發(fā)現(xiàn)，很多急性淋巴細(xì)胞白血病病兒母親孕期EBV IgG抗體呈陽性，但沒有進(jìn)行病兒母親EBV活動(dòng)性感染的篩查，不能判斷急性淋巴細(xì)胞白血病病兒母親懷孕期間EBV活動(dòng)性感染情況，因此青島地區(qū)孕婦妊娠期間EBV活動(dòng)性感染與子女急性淋巴細(xì)胞白血病的相關(guān)性需要進(jìn)一步的研究。

已有研究結(jié)果顯示，EBV感染與兒童特發(fā)性血小板減少性紫癜[27]、噬血細(xì)胞綜合征[28]及貧血性疾病[29]有一定的相關(guān)性。本文結(jié)果顯示，EBV感染與兒童紫癜及貧血性疾病無關(guān)。這可能與檢測方法不同、研究對象生活及飲食習(xí)慣不同有關(guān)。

綜上所述，青島地區(qū)兒童血液病病人EBV感染非常普遍，且EBV感染與年齡有關(guān)。與EBV感染相關(guān)的疾病以骨髓增生異常綜合征、霍奇金淋巴瘤及急性淋巴細(xì)胞白血病為主，因此，臨床醫(yī)生需要重視EBV感染及其相關(guān)疾病的診斷和治療。

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