程益清　夏晶　曹帥　李麗敏　付澤曉　周如潔　劉冠萍　梁云飛　毛秀紅　朱小鳳　季申

摘要?目的：分析注射用血栓通中三七從原料到成品全過程的元素遷移規(guī)律，以便更好地控制成品中元素雜質(zhì)。方法：采用ICP-MS法全面分析三七藥材、三七總皂苷（中間體）和注射用血栓通中21種元素的含量。結(jié)果：21種元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)r均在0.999以上，回收率在92.71%～107.07%之間，RSD均在5%以內(nèi)。三七藥材中鋁、鐵含量較高，鉛、砷、汞、鎘、銅符合中華人民共和國藥典的相關(guān)規(guī)定，三七總皂苷（中間體）和注射用血栓通中多數(shù)元素均未檢出或含量極低。結(jié)論：注射用血栓通的提取工藝可有效去除三七中大部分元素，重金屬及有害元素也降到較低水平。

關(guān)鍵詞?ICP-MS法;三七;注射用血栓通;三七總皂苷;重金屬及有害元素;微波消解法;元素遷移;無機元素

Migration of Elements in Panax Notoginseng from Thrombus Scavenger Injection

Cheng Yiqing1，Xia Jing1，Cao Shuai1，Li Limin1，F(xiàn)u Zexiao1，Zhou Rujie1，Liu Guanping2，Liang Yunfei2，Mao Xiuhong1，Zhu Xiaofeng2，Ji Shen1

（1 Shanghai Institute for Food and Drug Control，Shanghai 201203，China; 2 Guangxi Wuzhou Pharmaceutical（Group）Co.，Ltd.，Wuzhou 543002，China）

Abstract?Objective：To analyze the migration of elements in Thrombus Scavenger Injection from material to product，and to control the elemental impurities in products.Methods：The quantities of 21 elements in Panax notoginseng，Panax noteginseng saponins and Thrombus Scavenger Injection were determined by ICP-MS.Results：The correlative coefficients of standard curves of 21 elements surpassed 0.999，with the average recoveries ranged from 92.71% to 107.07% and their RSDs within 5%.The quantities of Al and Fe in Panax notoginseng were higher，while Pb，As，Hg，Cd，Cu was less than the standards of Chinese Pharmacopoeia.Most elements in Panax noteginseng saponins and Thrombus Scavenger Injection were not detected or were extremely low.Conclusion：The quantities of the heavy metal and hazard elements and other elements in Panax notoginseng were greatly reduced by the extraction process of Thrombus Scavenger Injection.

Key Words?Inductively coupled plasma mass spectrometry; Panax notoginseng; Thrombus scavenger injection; Panax noteginseng saponins; Heavy metal and hazard elements; Microwave digestion; Migration of elements; Inorganic elements

中圖分類號：R284.1文獻標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.04.004

注射用血栓通（凍干）是中藥三七經(jīng)提取、精制而成的無菌凍干粉針劑，其主要成分為由人參皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1等組成的三七總皂苷，具有抑制血小板聚集，降低血液黏稠度，降低血脂，抑制過氧化反應(yīng)，減輕血管內(nèi)皮損傷等作用。適用于各種血管性和出血性疾病、腦血管病及其后遺癥、眼內(nèi)出血及其他眼底病等的治療[1-6]。三七作為臨床常用貴重中藥材之一，其各個部位均可入藥，以三七為原料的單方或復(fù)方中成藥制劑約幾百種，三七藥品在我國乃至世界中成藥產(chǎn)業(yè)中均占有重要的地位[7-8]。但有許多文獻報道，三七種植區(qū)出現(xiàn)較為嚴(yán)重的重金屬污染問題，三七作為中成藥制劑的重要原料，其重金屬污染問題可能會影響其藥物安全[9-14]。

本研究采用微波消解前處理技術(shù)，建立了ICP-MS法測定三七藥材、三七總皂苷（中間體）和注射用血栓通中的21種元素，分析討論了注射用血栓通中三七原料到成品制劑的元素遷移規(guī)律，以驗證注射用血栓通工藝的合理性，并為其他三七類制劑的質(zhì)量管理、中藥材多元素快速篩查及元素污染風(fēng)險監(jiān)測提高參考。

1?儀器與試藥

1.1?儀器?7500Ce電感耦合等離子質(zhì)譜儀（美國Agilent公司）;Mars-xp微波消解儀（美國CEM公司）;儀器工作參數(shù)（射頻功率：1 500 W;采樣深度：8.0 mm;等離子氣流量：15.0 L/min;載氣流量：1.2 L/min;氦氣流速：4.8 mL/min;數(shù)據(jù)采集模式：跳峰采集;掃描次數(shù)：3次）。

1.2?試劑?鈹、鋁、鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅、砷、硒、銀、鎘、錫、銻、鋇、釹、鏑、汞、鉈、鉛、鋰、鈧、鍺、銦、鉍等單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液均購自國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，其質(zhì)量濃度均為1.000 g/L;硝酸、鹽酸均為優(yōu)級純;水為Milli-Q超純水。

1.3?分析樣品?研究用三七藥材6批（自編號：YC1～YC6）、三七總皂苷（中間體）10批（自編號：ZJT1～ZJT10）和注射用血栓通10批（自編號：YP1～YP10）。

2?方法與結(jié)果

2.1?供試品溶液的制備?分別取樣品粉末（三七藥材粉過三號篩、中間體、注射用血栓通）0.5 g，精密稱定，置耐壓耐高溫微波消解罐中，加硝酸4 mL、鹽酸1 mL，放置30 min后密閉，放入微波消解儀中，按照表1進行樣品消解。完成后待消解罐冷卻至室溫，將消解后的溶液轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，用去離子水洗滌消解罐數(shù)次，合并洗液，用去離子水定容，混勻，即得。同法制備試劑空白。

2.2?內(nèi)標(biāo)溶液的制備?精密量取鋰（Li6）、鈧（Sc）、鍺（Ge）、銦（In）、鉍（Bi）單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用5%硝酸：鹽酸（4∶1）溶液稀釋成每1 mL各含1 μg的混合溶液，即得。

2.3?ICP-MS測定條件?采用氦氣碰撞反應(yīng)池模式;蠕動泵在線加入內(nèi)標(biāo)，并按照內(nèi)標(biāo)同位素質(zhì)量數(shù)與待測元素質(zhì)量數(shù)相近的原則，采用多內(nèi)標(biāo)校正模式，測定時選取同位素9Be、27Al、53Cr、55Mn、57Fe、59Co、60Ni、63Cu、66Zn、75As、82Se、107Ag、111Cd、118Sn、121Sb、137Ba、146Nd、163Dy、202Hg、205Tl、208Pb，其中9Be以6Li為內(nèi)標(biāo);27Al、53Cr、55Mn、57Fe、59Co以45Sc為內(nèi)標(biāo);60Ni、63Cu、66Zn、75As、82Se以72Ge為內(nèi)標(biāo);107Ag、111Cd、118Sn、121Sb、137Ba、146Nd、163Dy以115In為內(nèi)標(biāo);202Hg、205Tl、208Pb以209Bi為內(nèi)標(biāo)。

2.4?方法學(xué)考察

按照擬定的方法，分別對三七藥材、三七總皂苷（中間體）、注射用血栓通進行方法學(xué)考察。其中以三七藥材YC1、三七總皂苷（中間體）ZJT10和注射用血栓通YP3作為研究樣品。

2.4.1?線性范圍?精密吸取汞標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用5%硝酸：鹽酸（4∶1）溶液分別稀釋制成濃度為0、0.2、0.5、1、2和5 μg/L的系列汞溶液;精密吸取鋁、鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用5%硝酸：鹽酸（4∶1）溶液分別稀釋制成濃度為0、125、250、500、1 000、2 500、5 000和10 000 μg/L的系列鋁、鐵溶液;精密吸取錳標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用5%硝酸：鹽酸（4∶1）溶液分別稀釋制成濃度為0、25、50、100、200、500、1 000和2 000 μg/L的系列錳溶液;另精密吸取其他18種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，用5%硝酸：鹽酸（4∶1）溶液分別稀釋制成濃度為0、1、5、10、20、50、100和200 μg/L的系列混合溶液，按“2.3”項下的方法測定21種元素，以各元素與內(nèi)標(biāo)計數(shù)值的比值為縱坐標(biāo)，各元素濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果（表2）表明所考察21種元素在各自線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。測定21份空白溶液中21種元素濃度，計算各元素的標(biāo)準(zhǔn)偏差（σ），以3σ作為各元素的最低檢測濃度，計算方法檢測限，結(jié)果見表2。

2.4.2?重復(fù)性試驗?由于中間體、注射用血栓通中各元素含量極低或未檢出，以及三七藥材中部分元素如銀含量較低，無法精確有效表征待測元素的方法精密度。研究采用加入一定濃度待測元素的方法，在適當(dāng)濃度水平考察方法重復(fù)性。

按照“2.4.3”項下加樣回收率中間濃度，一式6份，以6份樣品的各個元素加樣回收率考察方法重復(fù)性。結(jié)果表明方法的重復(fù)性較好。見表3。

2.5.3?回收率試驗?取方法學(xué)研究用三七藥材、三七總皂苷（中間體）、注射用血栓通各0.2 g，各9份，分別加入適量對照品溶液，按照“2.1”項下的方法制備低、中、高濃度加樣樣品，各3份，按“2.3”項下的方法測定，計算加樣回收率，結(jié)果表明各元素加樣回收率基本在90%～110%之間，方法準(zhǔn)確度較好。見表4。

2.5.4?樣品結(jié)果?按照“2.1”項下方法分別制備供試品溶液，按“2.3”項下方法對6批三七藥材、10批三七總皂苷（中間體）和10批注射用血栓通中的21種元素進行測定，結(jié)果見表5。

3?討論

3.1?樣品前處理?三七藥材、三七總皂苷（中間體）和注射用血栓通含有不同的有機基質(zhì)，一般藥材基質(zhì)較為復(fù)雜，含有蛋白質(zhì)、纖維等成分，三七總皂苷（中間體）和注射用血栓通樣品經(jīng)提取后基質(zhì)較三七藥材簡單，但也有不同的區(qū)別。不同類型樣品消解難易有很大差別，研究采用微波消解技術(shù)，對樣品取樣量進行了考察。不同樣品取樣量（0.2～0.5 g）對測定結(jié)果并無影響，為減小稱量誤差，并考慮到注射用血栓通樣品的方法靈敏度，取樣量確定為0.5 g。

3.2?三七藥材、三七總皂苷（中間體）和注射用血栓通中的21種元素結(jié)果分析?三七藥材中部分元素如鈹、硒、銀、錫、銻、釹、鏑、鉈等元素含量極低或未檢出;鋁、鉻、錳、鐵、鎳、鈷、鋇在三七藥材中有一定含量，但并無合適的限量參考;三七總皂苷（中間體）和注射用血栓通中多數(shù)元素均未檢出或含量極低;鉛、砷、汞、鎘、銅是中華人民共和國藥典中收載的重金屬及有害元素，除銅外，其他元素對人體危害明確，是國內(nèi)外藥品及食品嚴(yán)格控制的元素。參考《中華人民共和國藥典》2015年版一部相關(guān)品種的限度（鉛≤5.0 mg/kg，鎘≤0.3 mg/kg，銅≤20.0 mg/kg，砷≤2.0 mg/kg，汞≤0.2 mg/kg），6批三七藥材、10批中間體、10批注射用血栓通均未超過限度，其中注射用血栓通中基本未檢出。

3.3?注射用血栓通中三七從原料到成品全過程的元素遷移規(guī)律?21種元素呈現(xiàn)明顯規(guī)律，從藥材到中間體到制劑，元素含量逐步下降，尤其藥材到中間體下降明顯。三七中鋁和鐵含量較高，經(jīng)提取下降約100倍以上，變化最大;而其他如錳、鎳、鋇等元素也呈顯著降低趨勢，說明注射用血栓通的提取工藝可有效去除三七中大部分元素，重金屬及有害元素也降到較低水平。

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