司孝清

摘? 要：鹽酸萘甲唑啉滴鼻液中含有抑菌劑硫柳汞，為了更好控制該產品質量，精確測定硫柳汞的含量，特建立高效液相色譜法（HPLC）的測定方法。方法： 色譜柱：Angilent HC-C18 （4.6mm×250mm，5μm）;流動相：1%三乙胺溶液（用磷酸調pH至3.0）-甲醇（30：70）;檢測波長：220nm;進樣量：20μL;流速1.0mol/min;柱溫：40℃。結果：硫柳汞峰面積與濃度的線性關系良好（r>0.999），線性范圍為0.1578～0.6312μg，加樣回收率為99.6%～100.8%之間。結論：本方法靈敏，快速，準確，重復性好，可用于鹽酸萘甲唑啉滴鼻液中硫柳汞的含量測定。

關鍵詞：鹽酸萘甲唑啉滴鼻液;硫柳汞;含量;HPLC

中圖分類號：R927.2? ? ? ? 文獻標志碼：A 文章編號：2095-2945（2019）24-0085-02

Abstract： Naphthazolin Hydrochloride Nasal Drops contain thiomersal. In order to better control the quality of the product and accurately determine the content of thiomersal， a method for the determination of thiomersal by high performance liquid chromatography（HPLC） was established. Methods： The chromatographic column was Angilent HC-C18（4.6mm×250mm， 5μm）; mobile phase， 1% triethylamine solution （adjusted to pH 3.0 with phosphate）-methanol （30：70）， the detection wavelength was 220nm; the injection volume was 20μL， the flow rate was 1.0 mol/min;column temperature： 40 ℃. Results： The linear relationship between thiomersal peak area and concentration was good（r>0.999）， the linear range was 0.1578～0.6312μg， and the recovery was 99.6%～100.8%. Conclusion： The method is sensitive， rapid， accurate and reproducible， and can be used for the determination of the content of thiomersal in Naphthazolin Hydrochloride Nasal Drops.

Keywords： Naphthazolin Hydrochloride Nose Drops; thiomersal; content; HPLC

前言

鹽酸萘甲唑啉屬于咪唑啉類的擬交感神經藥，是廣泛用于眼和鼻粘膜的減充血劑，是一種有效的作用于結膜小動脈α腎上腺素能受體的血管收縮劑。當應用于粘膜時，萘甲唑啉引起血管收縮，從而達到迅速并能夠延長減少腫脹和結膜充血的作用，廣泛用于成人過敏性及炎癥性鼻充血、急慢性鼻炎。鹽酸萘甲唑啉無抑菌作用，為了防止鹽酸萘甲唑啉滴鼻劑多次使用時發(fā)生微生物增長，在處方中添加了抑菌劑，以確保用藥的安全性。查閱收集到的產品說明書，發(fā)現市場上銷售的鹽酸萘甲唑啉滴鼻液處方中標注的抑菌劑為硫柳汞。中國藥典2015版（ChP2015）收載的鹽酸萘甲唑啉滴鼻液沒有硫柳汞的檢測，為考察鹽酸萘甲唑啉滴鼻液中硫柳汞的穩(wěn)定性，建立鹽酸萘甲唑啉滴鼻液中硫柳汞的檢測方法。

1 儀器與試藥

SARTORIUS BT125D型電子天平，LC-2030島津二極管陣列檢測器，LC-2030四元低壓泵，Agilent HC-C18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱。硫柳汞對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號135050-201401），2，2'-二硫代水楊酸（北京百靈威科技有限公司），三乙胺（分析純，廣州化學試劑廠），磷酸（分析純，廣州化學試劑廠）、甲醇（色譜純，天津市科密歐化學試劑有限公司），鹽酸萘甲唑啉滴鼻液（ 廣東恒健制藥有限公司自制）。

2 色譜條件

色譜柱：Agilent HC-C18（4.6mm×250mm，5μm）;流動相：1%三乙胺溶液（用磷酸調pH至3.0）-甲醇（30：70）;流速：1.0mL/min;柱溫：40℃;檢測波長：220nm;進樣量：20μL;溶劑：水。2，2'-二硫代水楊酸與硫柳汞峰的分離度應大于1.5（圖1）。

3 方法與結果

3.1 溶液的配制

系統(tǒng)適用性試驗溶液：稱取2，2'-二硫代水楊酸和硫柳汞對照品各約10mg，置50ml量瓶中，加甲醇-水（90：10）適量溶解并稀釋至刻度，搖勻，量取1ml，置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。

對照品溶液：精密稱取硫柳汞對照品適量，加水定量稀釋成0.02mg/ml的溶液。

供試品溶液：取鹽酸萘甲唑啉滴鼻液作為供試品溶液。

3.2 專屬性試驗

取供試品溶液（硫柳汞陰性）、供試品溶液以及對照品溶液，分別進樣20μl，記錄色譜圖。結果：鹽酸萘甲唑啉和其他輔料均不干擾硫柳汞的檢測。（圖2～圖4）

3.3 線性和范圍

精密稱取硫柳汞對照品適量，加水定量稀釋成0.2mg/ml的溶液，精密量取適量，分別加水稀釋成8μg/ml、12μg/ml、16μg/ml、20μg/ml、24μg/ml、32μg/ml的溶液分別進樣20μl，記錄色譜圖。以進樣量（μg）為橫坐標，峰面積A為縱坐標，繪制標準曲線（圖5），求得回歸方程y=2823068.8x-10654.4，r=1.0000（n=6），結果表明：硫柳汞進樣量在0.1578～0.6312μg范圍內與峰面積成良好線性關系。

3.4 進樣精密度

取對照品溶液進樣20μl，連續(xù)進樣6次，RSD為0.08%，進樣精密度良好。

3.5 重復性試驗

取供試品溶液6份，分別進樣20μl，RSD為0.12%，方法重復性良好。

3.6 回收率試驗

精密稱取硫柳汞對照品適量，加稀釋劑（取鹽酸萘甲唑啉和其他輔料按處方比例配制而成）稀釋至刻度，配制成相當于硫柳汞標示濃度的80%、100%、120%的供試品溶液，每個濃度配制3份，分別進樣20μl，計算回收率（%）。結果：本方法回收率在99.6%～100.8%之間，RSD（n=9）為0.33%，方法準確度良好。

3.7 討論

（1）2，2'-二硫代水楊酸為硫柳汞主要降解產物，美國藥典40版（USP40）對硫柳汞中雜質A（2，2'-二硫代水楊酸），經對鹽酸萘甲唑啉滴鼻液進行酸、堿、氧化、光照、高溫破壞，樣品中硫柳汞的含量檢測結果表明：硫柳汞在光照條件下降解較快（圖6），降解產物為2，2'-二硫代水楊酸。故本檢測方法中以2，2'-二硫代水楊酸峰和硫柳汞峰的分離度作為系統(tǒng)適用性，以增加方法的專屬性和準確度，硫柳汞對光敏感，溶液的配制應避光操作。

1.光照降解產物（2，2'-二硫代水楊酸）;2.硫柳汞

（2）本研究使用等度洗脫，硫柳汞峰的出峰時間在5～6min之間，能達到快速分析的目的，方法靈敏、準確、重復性好，適用于鹽酸萘甲唑啉滴鼻液中硫柳汞的含量測定。

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