黃章科 李麗卡

（1廣東省江門市新會會城華僑中學 廣東江門 5291002廣東省江門市新會第一中學 廣東江門 529100）

1 研究背景

飲水機以其方便、快捷的特點，成為學校、企業(yè)辦公場所的主要飲水類型。近年來，衛(wèi)生管理部門加強了對桶裝水生產(chǎn)企業(yè)的預防性衛(wèi)生監(jiān)督，確保為消費者提供合格的桶裝水。然而，有證據(jù)顯示，目前許多學校內(nèi)飲水機中存放的水，以及飲水機內(nèi)膽不同程度地受到微生物污染，對教職員工和學生的健康構成了潛在威脅［1］。徐述堅總結了國內(nèi)桶裝水的衛(wèi)生狀況，指出了普遍存在的問題：微生物指標不合格，導電率和亞硝酸鹽超標，二次污染嚴重等［2］，根據(jù)GB 17324-2003《瓶（桶）裝飲用純凈水衛(wèi)生標準》的說明，飲水中微生物污染指標包括飲用水中總細菌數(shù)、大腸桿菌數(shù)、霉菌數(shù)等，理化指標包括pH 值、電導率等，這些指標中只要有一項不達標，即判斷為不合格［3］。在這種背景下，調(diào)查了某中學部分飲水機的使用情況，并對水質的指標進行檢測，以確認飲水機中存放的水、飲水機內(nèi)膽是否受到微生物污染，以及廣大教職工和學生的飲水質量是否得到保障，最后結合研究結果對中小學安全飲水提出相應的措施。

2 實驗儀器和材料

高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、移液槍及槍頭、無菌操作臺、放大鏡、掃描儀、75%乙醇、天平、250mL 錐形瓶、培養(yǎng)皿、量筒、涂布棒、平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基。

3 研究方法

3.1 水樣采集 隨機抽取某學校正在使用的20臺飲水機，采集流經(jīng)飲水機的桶裝水樣本時，為避免出水口污染，先用75%乙醇對冷、熱出水口及采樣人員手部進行消毒，再將冷熱水閥打開，各流出50mL 水后，從冷水口取冷水，熱水口取沸水，采用無菌操作方式讓水自然流到無菌錐形瓶中，每次采樣100mL 備檢測，并做好標記。

3.2 指標檢測 參照GB 17324-2003《瓶(桶)裝飲用純凈水衛(wèi)生標準》：菌落總數(shù)≤20CFU／mL，只要有此項指標不合格即判定為不合格。多管發(fā)酵法和濾膜法是美國環(huán)境保護署認可的幾種檢測大腸桿菌的方法，也是我國國標中規(guī)定的檢測方法［3］。多管發(fā)酵法成本低，簡單易操作，但準確性低，只提供大腸桿菌的半定量計數(shù)，耗時長，要48h，如需確認，另外還需要48h。濾膜法簡單易操作，但因為濾膜法缺乏足夠的特異性，仍需要另外24h來確認。而為了能在中小學中快速簡便地檢測飲水質量，本研究只檢測飲水中的菌落總數(shù)。

3.2.1 總細菌數(shù) 參照GB 4789.2-2010《食品衛(wèi)生微生物學檢驗：菌落總數(shù)測定》的方法，用移液槍吸取適量水樣，做不同梯度的水樣稀釋，后各加到平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基中，涂布棒涂抹均勻，在培養(yǎng)皿側面標注清楚后，置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)1天，統(tǒng)計各平板的菌落總數(shù)。

3.2.2 不同的擺放位置對總菌數(shù)的影響 選取同一地點同一水位的飲水機桶裝水，分別對不同擺放位置進行總菌數(shù)的檢測，總菌數(shù)測定方法同3.2.1，檢測不同的擺放位置對總菌數(shù)的影響。

3.2.3 不同的水位對總菌數(shù)的影響 選取同一地點同一位置的飲水機桶裝水，分別對不同的水位進行總菌數(shù)的檢測，總菌數(shù)測定方法同3.2.1，檢測不同的水位對總菌數(shù)的影響。

3.2.4 存放天數(shù)對總菌數(shù)的影響 選取同一地點同一水位的飲水機桶裝水，分別在不同的存放時間進行總菌數(shù)的檢測，總菌數(shù)測定方法同3.2.1，檢測不同的存放時間對總菌數(shù)的影響。

3.2.5 飲水機內(nèi)膽對總菌數(shù)的影響 選取10桶來源相同、水位相同的桶裝水，擺放在同一地點，一半桶裝在飲水機上采樣，另一半桶直接采樣，總菌數(shù)測定方法同3.2.1，檢測飲水機內(nèi)膽對總菌數(shù)的影響。

4 結果與分析

4.1 熱水（94℃）和冷水中的總細菌數(shù) 由表1、表2可看出，總菌數(shù)在熱水（94℃）和冷水中有明顯的差異，在所檢測的20個水樣中，冷水中總菌數(shù)合格率為0%，熱水（94℃）的合格率為100%。說明冷水中細菌數(shù)超標，熱水（94℃）中細菌因不耐熱全部死亡，飲水安全。

表1 200μL 水樣中的菌落數(shù)

表2 水樣中總菌數(shù)的合格率

4.2 不同的擺放位置對總菌數(shù)的影響 選擇水位大致相同的15臺飲水機進行取樣調(diào)查，由下圖可看出，不同的擺放位置對飲水機中冷水總菌數(shù)有影響，其中，靠窗有陽光照射的地方總菌數(shù)最少，室內(nèi)中間的次之，門口角落的總菌數(shù)最多，提示將飲水機放在光亮的地方飲水中細菌不易滋生，而放在陰暗角落則會容易滋生細菌。無論擺放位置如何，菌落總數(shù)都大于20CFU／mL，即都不合格。

圖1 不同擺放位置200μL 冷水中的總菌數(shù)

4.3 不同的水位對總菌數(shù)的影響 選擇擺放位置基本一樣的15臺飲水機進行取樣調(diào)查，由表1、表2可知，不同的水位對飲水機中冷水總菌數(shù)有影響，其中，水位為100%時總菌數(shù)最少，50%時次之，只剩1%時總菌數(shù)最多，表明隨著飲水天數(shù)的增加，水位越低總菌數(shù)也越多。但是，無論水位如何，菌落總數(shù)都明顯大于20CFU／mL，即都不合格。

4.4 存放時間（天數(shù)）對總菌數(shù)的影響 由表1可知，隨著存放天數(shù)的增加，飲水機中的冷水總菌數(shù)也逐漸增加。

4.5 飲水機內(nèi)膽對總菌數(shù)的影響 由表1可知，無飲水機內(nèi)膽的水樣中總菌數(shù)明顯少于有飲水機內(nèi)膽的水樣，提示水樣中的細菌主要來源于飲水機內(nèi)膽。

5 討論和對策

本研究以桶裝飲用水的飲水安全為研究背景，對某中學飲水水樣進行不同角度的探究，結果表明中學學生和教職工飲水存在安全隱患，表現(xiàn)為受不同程度的細菌污染。具體表現(xiàn)為：

1）飲水時將水煮沸能有效殺死細菌，飲水安全。

2）飲水機的擺放位置會對冷水中總菌數(shù)有影響，表現(xiàn)為靠窗有陽光照射的地方總菌數(shù)最少，室內(nèi)中間的次之，門口角落的總菌數(shù)最多，建議將飲水機擺放在寬敞明亮的地方，飲水機中存放的水，及飲水機內(nèi)膽不易滋生細菌。

3）不同的水位會對冷水中總菌數(shù)有影響，水位越低細菌數(shù)越多，建議桶裝水應盡快飲用。

4）隨著存放天數(shù)的逐漸增加，冷水中總菌數(shù)也在逐漸增加，建議桶裝水最好在1周內(nèi)飲用完。

5）飲水機內(nèi)膽對總菌數(shù)的結果提示，飲水中的細菌主要來自于飲水機內(nèi)膽，建議應定期使用專用的消毒劑對內(nèi)膽進行消毒，從源頭上杜絕細菌的滋生。