◆作者：孫廣文 王卓鐸 劉敏 張海濤

◆單位：廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南水產(chǎn)與畜禽飼料重點(diǎn)試驗(yàn)室

魚(yú)粉富含蛋白質(zhì)和高不飽和脂肪酸，氨基酸營(yíng)養(yǎng)均衡，適口性好，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，是傳統(tǒng)魚(yú)蝦飼料的最佳蛋白源。人類(lèi)對(duì)水產(chǎn)品需求不斷增加，使可利用自然漁業(yè)資源不斷下降；同時(shí)，人工養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大也導(dǎo)致魚(yú)粉需求的急劇增加，價(jià)格不斷上漲。這些因素均影響了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和水產(chǎn)飼料工業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

大豆?jié)饪s蛋白是以大豆為原料，經(jīng)粉碎、去皮、浸提、分離等加工工藝，去除了大豆中的油脂、低分子可溶性非蛋白組分(主要是可溶性糖、灰分、醇溶蛋白和各種氣味物質(zhì)等)后所得到的大豆深加工產(chǎn)品。由于消除了寡聚糖類(lèi)脹氣因子、胰蛋白酶抑制因子、凝集素和皂甙等抗?fàn)I因子，大豆?jié)饪s蛋白中的營(yíng)養(yǎng)素消化率有一定程度的提高，且產(chǎn)品風(fēng)味和品質(zhì)得到了改善（王秀等，2011）。玉米蛋白粉是以玉米為原料,在制作過(guò)程中通過(guò)分離及脫脂后除去淀粉、胚芽、外皮產(chǎn)生的副產(chǎn)品；淀粉和纖維含量較低，不含抗?fàn)I養(yǎng)因子，蛋白質(zhì)含量達(dá)60%～70%。

大黃魚(yú) (Pseudosciaena crocea)屬鱸形目(Perciformes)、石首魚(yú)科(Sciaenidae)、黃魚(yú)屬，主要分布在我國(guó)黃海南部、東海、臺(tái)灣海峽以及南海北部。因肉質(zhì)鮮美而深受人類(lèi)喜愛(ài)。目前，有關(guān)大黃魚(yú)營(yíng)養(yǎng)生理學(xué)的研究及人工配合飼料的開(kāi)發(fā)已取得了部分進(jìn)展，但大黃魚(yú)飼料中魚(yú)粉替代的研究報(bào)道相對(duì)較少，且所選魚(yú)粉替代蛋白源不同，其替代比例也差異較大。本研究以大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代大黃魚(yú)料中的部分魚(yú)粉，探討其對(duì)大黃魚(yú)生長(zhǎng)性能、肝體比、臟體比以及體成分的影響，以期為大黃魚(yú)飼料原料的使用、大黃魚(yú)飼料配方高效合理的設(shè)計(jì)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)飼料配方如表1所示，其中魚(yú)粉和豆粕為主要蛋白源，高精面粉為主要糖源，磷脂和魚(yú)油為主要脂肪源，配制5組等氮等脂（蛋白水平41.5%，脂肪水平10%)的試驗(yàn)飼料。試驗(yàn)以大豆?jié)饪s蛋白分別替代5%和10%的魚(yú)粉，記為 SPC5、SPC10；以玉米蛋白粉分別替代5%和10%的魚(yú)粉，記為 CGM5、CGM10，以魚(yú)粉組為對(duì)照組，記為FM。飼料原料經(jīng)粉碎后過(guò)80目篩網(wǎng),維生素和礦物質(zhì)預(yù)混料采取逐級(jí)擴(kuò)大法混勻,然后加入適量的水揉勻；經(jīng)雙螺桿擠條機(jī)加工成2種粒徑大小的顆粒狀飼料(1.5mm×3.0mm和2.5mm×5.0mm),比例1∶2。38℃干燥箱中烘 12h，自然冷卻后放入密封袋中，置于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在福建省寧德市三都港大灣網(wǎng)箱養(yǎng)殖區(qū)域進(jìn)行。試驗(yàn)大黃魚(yú)均為當(dāng)年人工孵化的同一批次幼魚(yú)。試驗(yàn)開(kāi)始前，在體積為3m×3m×5m的小網(wǎng)箱中暫養(yǎng)兩周，暫養(yǎng)期間投喂對(duì)照組飼料，以適應(yīng)飼料投喂、投喂頻率和養(yǎng)殖環(huán)境。試驗(yàn)魚(yú)經(jīng)2周的馴化，禁食24小時(shí)；以丁香酚麻醉后，挑選出規(guī)格一致、體格健壯、初始體重為28.5±3.5g的大黃魚(yú)1500尾，隨機(jī)分為5組，每組3個(gè)重復(fù)，共15個(gè)網(wǎng)箱，每個(gè)網(wǎng)箱100尾，分別投喂5組試驗(yàn)飼料。每天投喂2次（5：00和17：00），飽食投喂至不爭(zhēng)搶飼料為準(zhǔn)。根據(jù)天氣及攝食情況調(diào)整投喂量，高溫季節(jié)應(yīng)減少投喂量。每天記錄魚(yú)的攝食、死亡及飼料投喂量的情況。試驗(yàn)共進(jìn)行10周，前4周投喂小粒徑飼料（1.5mm×3.0mm），后6周投喂大粒徑飼料（2.5mm×5.0mm）。試驗(yàn)期間的水質(zhì)條件控制如下：水溫26.5℃～29.5℃,鹽度約為28.5‰，溶氧量為7mg/L。

1.3 采樣與分析

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，每組選取50尾測(cè)量試驗(yàn)魚(yú)的最終體重、內(nèi)臟重、肝臟重。每組隨機(jī)抽取10尾魚(yú)，經(jīng)麻醉處死后冰凍保存，用于分析常見(jiàn)的化學(xué)指標(biāo)。水分的測(cè)定為105℃恒溫烘干至恒重（GB/T 6435—014）。粗灰分的測(cè)定采用箱式電阻爐550℃灼燒法（GB/T 6438—007）。粗脂肪的測(cè)定采用索氏抽提法（GB/T 6433—006）。粗蛋白的測(cè)定用凱氏定氮法（GB/T 6432—994）。

表1 試驗(yàn)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平（干基，%）

各生長(zhǎng)參數(shù)按下列公式計(jì)算：

注：以上公式中N0為初始數(shù)量，Nt為終末數(shù)量，WT為末重，W0為初始體重，T為試驗(yàn)時(shí)間，WL為肝臟重，WV為內(nèi)臟重，WF為飼料重，L為體長(zhǎng)。

采用SPCSS18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA），差異顯著后進(jìn)行Turkey多重比較，顯著性水平設(shè)為P＜0.05。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代魚(yú)粉對(duì)大黃魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

從表2可知，相比于FM組，SPC 5組、CGM 5組的大黃魚(yú)末體重、特定生長(zhǎng)率以及存活率均沒(méi)有表現(xiàn)出顯著性差異(P＞0.05）。而SPC 10組和CGM 10組的存活率、末體重和特定生長(zhǎng)率均顯著低于FM組(P＜0.05）。飼料系數(shù)上，除SPC5組外，隨著植物蛋白成分的增加，飼料系數(shù)也在增大，且顯著高于對(duì)照組(P＜0.05）。從表2可以看出，SPC處理組的肝體比和FM組無(wú)明顯差異(P＞0.05），而 CGM 處理組顯著性高于FM組(P＜0.05）。在臟體比方面各組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05），其數(shù)值為 4.97～5.72。各組間肥滿(mǎn)度無(wú)顯著性差異(P＞0.05）。

2.2 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代魚(yú)粉對(duì)大黃魚(yú)體成分的影響

從表3可以看出，大黃魚(yú)的全魚(yú)水分含量在73.86%～74.91%，粗蛋白含量在15.38%～16.48%，粗脂肪在5.06%～5.71%，灰分含量4.02%～4.18%。相比FM處理組，SPC 5和SPC 10處理組的全魚(yú)粗蛋白含量無(wú)顯著性差異（P＞0.05），而 CGM 兩個(gè)處理組的粗蛋白含量顯著低于FM處理組(P＜0.05）。各組間脂肪含量、灰分無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。四個(gè)處理組的水分含量高于FM對(duì)照組，但不存在顯著性差異（P＞0.05）。

3 討論

當(dāng)前，開(kāi)發(fā)新型蛋白原料替代魚(yú)粉是保持水產(chǎn)養(yǎng)殖可持續(xù)增長(zhǎng)的重要熱點(diǎn)。關(guān)于使用大豆?jié)饪s蛋白SPC、玉米蛋白粉CGM等植物蛋白源分別替代魚(yú)粉對(duì)魚(yú)的生長(zhǎng)性能和體組成影響的研究已廣泛開(kāi)展。

表2 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代魚(yú)粉對(duì)大黃魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

表3 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代魚(yú)粉對(duì)大黃魚(yú)體組分的影響(%)

3.1 大豆?jié)饪s蛋白替代魚(yú)粉對(duì)大黃魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

多項(xiàng)研究表明，在不同品種的魚(yú)類(lèi)中，SPC可部分替代魚(yú)粉而對(duì)魚(yú)的生長(zhǎng)未產(chǎn)生顯著影響。SPC替代凡納濱對(duì)蝦飼料中25%（陳佳楠，2017）、黃顙魚(yú)飼料中 20%（李晨晨等，2018）、瓦氏黃顙魚(yú)幼魚(yú)飼料中60%（楊英豪，2011）、大黃魚(yú)幼魚(yú)飼料中75%（馮建等，2017）、軍曹魚(yú)飼料中 75%（Solze G 等，2010）、中華鱘幼魚(yú)飼料中15%（劉偉等，2010）的魚(yú)粉均未對(duì)這些魚(yú)蝦類(lèi)的生長(zhǎng)造成負(fù)面影響。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SPC替代大黃魚(yú)料中5%的魚(yú)粉對(duì)其生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響，這與上述研究結(jié)果相似。

亦有部分研究發(fā)現(xiàn)，SPC部分替代水產(chǎn)料中的魚(yú)粉，顯著改善或抑制了水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。唐濤等（2019）的研究表明，以SPC替代對(duì)照組飼料（魚(yú)粉含量55%）中48%的魚(yú)粉，顯著提高了黃鱔的增重率、特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率(P＜0.05)，并且顯著降低了飼料系數(shù)(P＜0.05）。SPC對(duì)魚(yú)粉的替代水平超過(guò)60%會(huì)抑制瓦氏黃顙魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)（楊英豪，2011）。鄒文超（2014）綜合凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能、血液免疫等指標(biāo)分析，SPC對(duì)凡納濱對(duì)蝦飼料中魚(yú)粉的替代比例不宜超過(guò)50%。中華鱘幼魚(yú)飼料中SPC替代水平超過(guò)15%時(shí)，其生長(zhǎng)性能降低（劉偉等，2010）。海鱸料中隨著SPC替代魚(yú)粉比例上升，增重率逐漸降低，替代比例超過(guò)40%后，實(shí)驗(yàn)組顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）；飼替代比例超過(guò)60%，飼料系數(shù)顯著增加（P＜0.05）；替代比例高于40%蛋白質(zhì)效率顯著下降（P＜0.05）（向芳琴，2017）。劉興旺等（2014）發(fā)現(xiàn)，大菱鲆的生長(zhǎng)及飼料轉(zhuǎn)化率隨SPC替代量的提高直線(xiàn)下降，即使在最低替代水平12.5%時(shí)，大菱鲆生長(zhǎng)性能仍顯著低于對(duì)照組。而本研究也發(fā)現(xiàn)，SPC對(duì)大黃魚(yú)料中的魚(yú)粉替代水平為10%時(shí)，其存活率、末體重和特定生長(zhǎng)率均顯著低于對(duì)照組，飼料系數(shù)顯著高于對(duì)照組。這與馮建等（2017）的研究結(jié)果差異較大：SPC替代魚(yú)粉水平為0%～100%均未對(duì)大黃魚(yú)幼魚(yú)的增重率 (WGR)、特定生長(zhǎng)率(SGR)、存活率(SR)以及飼料系數(shù)(FCR)產(chǎn)生顯著影響(P＞0.05)。其可能原因是，馮建等的飼料配方中補(bǔ)充了賴(lài)氨酸、蛋氨酸等晶體氨基酸，改善了飼料氨基酸結(jié)構(gòu)；另一方面該飼料配方中添加了誘食劑，從而使得魚(yú)粉替代水平提高。此外，該配方中加入了?；撬幔嚓P(guān)研究表明，牛磺酸的添加可提高低魚(yú)粉飼料中SPC的利用率（吳玉波，2014）。

3.2 大豆?jié)饪s蛋白替代魚(yú)粉對(duì)大黃魚(yú)體組成的影響

一般來(lái)說(shuō)，魚(yú)體的蛋白質(zhì)組分含量相對(duì)穩(wěn)定，而脂肪和水分呈相反關(guān)系（Belal I等，1995）。本試驗(yàn)中，隨著SPC替代魚(yú)粉比例的增加，大黃魚(yú)的體組成中的脂肪含量降低，水分含量增加，而蛋白含量無(wú)顯著差異。此結(jié)果與中華鱘（劉偉等，2010）、巨型石斑魚(yú)、大菱鲆（劉興旺等，2014）、大西洋鮭（Storebakken T等，1998）等的研究結(jié)果類(lèi)似。研究認(rèn)為這是由于大豆?jié)饪s蛋白中的非淀粉多糖會(huì)導(dǎo)致腸炎的發(fā)生，從而使脂肪的吸收下降，影響了脂肪在動(dòng)物體內(nèi)的累積。

3.3 玉米蛋白粉替代魚(yú)粉對(duì)大黃魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

部分研究認(rèn)為，CGM可高水平替代水產(chǎn)料中的魚(yú)粉而不影響其生長(zhǎng)性能，如鱸魚(yú)料中CGM替代水平可達(dá)60%（門(mén)珂珂，2014）、異育銀鯽飼料中適宜替代量為33.33%～66.67%（華雪銘等，2012）、大黃魚(yú)幼魚(yú)料中的適宜添加量為45%（何嬌嬌等，2017）。而本研究中，CGM對(duì)魚(yú)粉的替代量處于較低水平即顯著降低了大黃魚(yú)的生長(zhǎng)性能，這可能是由于大黃魚(yú)對(duì)玉米蛋白粉的消化率較低，導(dǎo)致其對(duì)必須氨基酸和能量攝入不足所引起。這與卵形鯧鲹（胡海濱等，2019）、大菱鲆（劉興旺等，2012）、凡納濱對(duì)蝦（姚春鳳等，2014）、黃顙魚(yú)（朱磊等，2014）、軍曹魚(yú)幼魚(yú)（周暉等，2013）的研究結(jié)果相似。

3.4 玉米蛋白粉替代魚(yú)粉對(duì)大黃魚(yú)體組成的影響

本研究中，CGM處理組的體蛋白低于其他處理組，而各組間水分、脂肪、灰分無(wú)明顯差異，該結(jié)果與大菱鲆（劉興旺等，2012）的研究結(jié)果類(lèi)似。其原因可能在于CGM的添加影響了魚(yú)類(lèi)的攝食率，降低了氨基酸的利用率，不利于魚(yú)體蛋白的合成（Zhang L等，2008；張帆等，2012）。

研究表明，飼料中的主要營(yíng)養(yǎng)素，如碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)等會(huì)影響?hù)~(yú)類(lèi)形態(tài)學(xué)方面的指標(biāo)，如肥滿(mǎn)度、臟體比和肝體比等（Kim J D 等，2001）。隨著玉米蛋白粉用量的增加，肥滿(mǎn)度出現(xiàn)降低的趨勢(shì)；6%玉米蛋白粉組的黃顙魚(yú)的臟體比、肝體比均小于對(duì)照組（朱磊等，2014）。本試驗(yàn)中，大菱鲆的肥滿(mǎn)度和臟體比未受到飼料中SPC和CGM替代魚(yú)粉的影響。但是肝體比隨著植物蛋白的增加而略有增加，這可能是由于植物蛋白對(duì)能量代謝的影響所導(dǎo)致。