張賽賽，晏艷霜，鐘小鳳

0 引言

蠕形螨是一種寄生蟲(chóng)，自然界存在種類(lèi)和數(shù)量眾多，目前已知的可寄生于人體的蠕形螨有兩種，即毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨[1]。在眼部，毛囊蠕形螨寄居于睫毛毛囊，而皮脂蠕形螨則寄居于睫毛皮脂腺和瞼板腺[2]。近年研究發(fā)現(xiàn)，蠕形螨感染常與多種常見(jiàn)的眼表疾病相關(guān)，如成人的瞼緣炎、霰粒腫[3-5]，臨床工作中發(fā)現(xiàn)許多霰粒腫患者反復(fù)發(fā)作，復(fù)發(fā)性霰粒腫患者常伴有蠕形螨感染。本研究對(duì)復(fù)發(fā)性霰粒腫患者蠕形螨感染率與單發(fā)性霰粒腫患者對(duì)比分析，了解蠕形螨感染是否為復(fù)發(fā)性霰粒腫的重要致病因素，并通過(guò)蠕形螨感染患者的基本特征分析以判斷其感染的可能相關(guān)因素，以協(xié)助復(fù)發(fā)性霰粒腫的預(yù)防和治療。

圖1 生物光學(xué)顯微鏡觀(guān)察蠕形螨感染情況 A：顯微鏡下觀(guān)察(放大4倍)；B：顯示屏顯示。

1 對(duì)象和方法

1.1對(duì)象回顧性研究。收集2019-01/05于我院眼表和角膜病科門(mén)診就診確診為霰粒腫患者62例62眼，年齡20～37(26.18±4.96)歲。其中A組(32例32眼)為復(fù)發(fā)性霰粒腫組(復(fù)發(fā)次數(shù)≥1次)，B組(30例30眼)為初發(fā)性霰粒腫組。C組(35例35眼)為同期無(wú)眼病的正常對(duì)照組。三組受檢者均排除患有其他眼部疾病及可能影響檢查結(jié)果的疾病。A組中男13例13眼，女19例19眼，年齡25.88±5.34歲；B組中男16例16眼，女14例14眼，年齡26.35±4.83歲；C組中男15例15眼，女20例20眼，年齡26.29±4.86歲；三組間性別構(gòu)成比和年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.147，P=0.563；F=0.81，0.971)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并經(jīng)患者或其家屬知情同意簽署知情同意書(shū)。

1.2方法

1.2.1蠕形螨檢查陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)毛囊蠕形螨檢查陽(yáng)性推薦標(biāo)準(zhǔn)[6]：(1)不同發(fā)育形態(tài)的蠕形螨，如蟲(chóng)卵、若蟲(chóng)和成蟲(chóng)均計(jì)數(shù)在內(nèi)；(2)成人患者在4個(gè)眼瞼中的任1個(gè)眼瞼蠕形螨計(jì)數(shù)達(dá)到3條/3根睫毛；(3)小于上述標(biāo)準(zhǔn)為可疑陽(yáng)性，需結(jié)合臨床表現(xiàn)，必要時(shí)可同時(shí)進(jìn)行其他病原微生物的檢查，如細(xì)菌、真菌等，并進(jìn)行中央根睫毛蠕形螨感染計(jì)數(shù)。

1.2.2活體激光掃描共聚焦顯微鏡檢查睫毛根部和瞼板腺管開(kāi)口蠕形螨感染情況激光掃描共聚焦顯微鏡的圖像分辨率為1μm，放大倍率為800倍。檢測(cè)時(shí)，翻開(kāi)患者上瞼緣，掃描其瞼緣睫毛根部和瞼板腺腺管開(kāi)口圖像，觀(guān)察上瞼中央8根睫毛和8個(gè)瞼板腺開(kāi)口蠕形螨感染計(jì)數(shù)，同時(shí)記錄所需圖像[7]。

1.2.3生物光學(xué)顯微鏡觀(guān)察蠕形螨睫毛根部陽(yáng)性感染率和蠕形螨感染計(jì)數(shù)為避免直接顯微鏡檢查時(shí)拔取睫毛造成后續(xù)檢查出現(xiàn)誤差，每位患者先進(jìn)行激光共焦顯微鏡檢查后，再采用睫毛采樣進(jìn)行直接生物光學(xué)顯微鏡下鏡檢蠕形螨感染情況。所有采樣均由同一操作者完成。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采取均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料采取“率(%)”表示。三組間年齡的比較采用單因素方差分析，性別、蠕形螨檢出率的比較采用卡方檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩兩比較采用連續(xù)校正卡方檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.017。

2 結(jié)果

2.1生物光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察三組眼瞼蠕形螨感染情況三組蠕形螨檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.03，P<0.001)。復(fù)發(fā)性霰粒腫患者睫毛的蠕形螨檢出率為78%(25眼)，顯著高于無(wú)眼病的正常對(duì)照組(34%，12眼)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.28，P<0.017)；與初發(fā)性霰粒腫患者(57%，17眼)之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.355，P>0.017)。初發(fā)性霰粒腫患者睫毛的蠕形螨檢出率(57%，17眼)與無(wú)眼病的正常對(duì)照組(34%，12眼)之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.431，P>0.017)。生物光學(xué)顯微鏡觀(guān)察蠕形螨感染情況見(jiàn)圖1。

2.2激光共聚焦顯微鏡下三組人群眼瞼蠕形螨感染情況三組人群睫毛根部蠕形螨檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=18.428，P<0.001)。復(fù)發(fā)性霰粒腫患者睫毛根部的蠕形螨檢出率為88%(28眼)，顯著高于無(wú)眼病的正常對(duì)照組(37%，13眼)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.851，P<0.017)；復(fù)發(fā)性霰粒腫患者睫毛根部的蠕形螨檢出率與初發(fā)性霰粒腫患者(67%，20眼)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.844，P>0.017)；初發(fā)性霰粒腫患者睫毛根部的蠕形螨檢出率與無(wú)眼病的正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.634，P>0.017)。

三組人群瞼板腺開(kāi)口的蠕形螨檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=24.401，P<0.001)。復(fù)發(fā)性霰粒腫患者瞼板腺開(kāi)口的蠕形螨檢出率為69%(22眼)，顯著高于初發(fā)性霰粒腫患者(23%，7眼)和無(wú)眼病的正常對(duì)照組(14%，5眼)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.829、20.611，P<0.017)；而初發(fā)性霰粒腫患者和無(wú)眼病的正常對(duì)照組瞼板腺開(kāi)口的蠕形螨檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.878，P>0.017)。激光共聚焦顯微鏡下三組人群眼瞼蠕形螨感染情況見(jiàn)圖2～4。

圖2 激光共聚焦顯微鏡觀(guān)察睫毛根部蠕形螨感染情況(×800，箭頭示睫毛根部蠕形螨感染情況)A：復(fù)發(fā)性霰粒腫患者；B：初發(fā)性霰粒腫患者；C：無(wú)眼病的正常對(duì)照組，可見(jiàn)碎屑樣分泌物堆積。

圖3 激光共聚焦顯微鏡觀(guān)察上瞼中央8個(gè)瞼板腺開(kāi)口淺層蠕形螨感染情況 A：瞼板腺開(kāi)口裂隙燈的前節(jié)照片；B：復(fù)發(fā)性霰粒腫患者(×800)；C：初發(fā)性霰粒腫患者(×800)；D：無(wú)眼病的正常對(duì)照組(×800)；圖中箭頭示瞼板腺管開(kāi)口。

圖4 激光共聚焦顯微鏡觀(guān)察瞼板腺腺泡情況(×800)A：復(fù)發(fā)性霰粒腫患者，瞼板腺腺泡大部分?jǐn)U張、融合，部分已萎縮；B：初發(fā)性霰粒腫患者瞼板腺腺泡擴(kuò)張、融合；C：無(wú)眼病的正常對(duì)照組。

3 討論

霰粒腫是瞼板腺非化膿性、慢性炎癥，是一種眼科常見(jiàn)的、易診斷的眼瞼疾病，本病系瞼板腺排泄口堵塞，因瞼板腺分泌物潴留而在眼瞼形成的無(wú)痛性脂肪肉芽腫。蠕形螨是一種寄生蟲(chóng)，目前已知的可寄生于人體的有兩種，即毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨[1]。近年研究發(fā)現(xiàn)，蠕形螨感染與霰粒腫有關(guān)[5]。臨床工作中發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)性霰粒腫患者常伴有蠕形螨感染。目前臨床上常用直接光鏡檢查螨蟲(chóng)，但使用直接光鏡只有與睫毛黏附緊密的蠕形螨才能被檢出，可能還會(huì)有蠕形螨存在于毛囊內(nèi)。與傳統(tǒng)的直接顯微鏡檢查螨蟲(chóng)相比，本研究中再加用活體激光共焦顯微鏡檢查方法[8]，觀(guān)察睫毛根部和瞼板腺開(kāi)口兩個(gè)部位的蠕形螨感染數(shù)量。兩種檢查方法均顯示，復(fù)發(fā)性霰粒腫蠕形螨感染檢出率明顯高于初發(fā)霰粒腫組和無(wú)眼病的正常對(duì)照組。

因此，霰粒腫的復(fù)發(fā)可能與瞼緣感染蠕形螨有關(guān)。

蠕形螨導(dǎo)致瞼板腺功能的機(jī)制可概括為直接損害、免疫反應(yīng)、病原微生物載體[9-10]。本研究發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組和初發(fā)性霰粒腫組相比，復(fù)發(fā)性霰粒腫組患者蠕形螨感染數(shù)量明顯增加，瞼板腺迂曲、擴(kuò)張和萎縮的嚴(yán)重程度明顯增加，可能與蠕形螨的代謝產(chǎn)物和分泌物堵塞瞼板腺，以及不能及時(shí)排出有關(guān)[11]。在大多數(shù)研究中，男性比女性更容易被蠕形螨感染，可能與雄激素誘導(dǎo)的男性皮脂分泌有關(guān)[12-13]，也有研究認(rèn)為女性的蠕形螨感染率更高，原因是化妝品影響蠕形螨的增殖[14]，本研究中發(fā)現(xiàn)蠕形螨檢出率無(wú)性別差異。宿主性別與蠕形螨感染之間的關(guān)系仍存在爭(zhēng)議，還需進(jìn)一步討論。

蠕形螨感染易引發(fā)霰粒腫復(fù)發(fā)，可能與以下因素有關(guān)：(1)皮脂蠕形螨寄生造成瞼板腺排出管道阻塞，分泌物潴留，刺激周?chē)M織而形成瞼板腺慢性肉芽腫，導(dǎo)致瞼板腺功能障礙，繼而發(fā)生瞼板腺囊腫，而且皮脂腺蠕形螨體外覆蓋的堅(jiān)硬外骨骼對(duì)人體而言是異物，可引起肉芽腫性反應(yīng)導(dǎo)致霰粒腫。Liu等在霰粒腫發(fā)現(xiàn)皮脂蠕形螨和周?chē)纳掀ぜ?xì)胞、成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞，證明皮脂蠕形螨在瞼板腺囊腫中的重要作用[5]。因此，蠕形螨特別是皮脂蠕形螨的存在是引起霰粒腫反復(fù)發(fā)作的重要因素。(2)蠕形螨感染引起瞼緣慢性炎癥的改變[15]，長(zhǎng)期慢性炎癥侵襲，易造成霰粒腫的反復(fù)發(fā)作[16]。

目前研究蠕形螨計(jì)數(shù)使用顯微鏡鏡檢，計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性不足。激光共聚焦顯微鏡檢查可在活體狀態(tài)下對(duì)多個(gè)毛囊進(jìn)行檢測(cè)同時(shí)，可觀(guān)察周邊瞼緣和瞼板腺的結(jié)構(gòu)(圖4)，對(duì)于睫毛缺失的患者仍可進(jìn)行檢測(cè)，且無(wú)創(chuàng)、快速。通過(guò)掃描瞼緣部位，可以觀(guān)察到毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨的圖像(圖2、3)。共聚焦顯微鏡可更細(xì)微觀(guān)察睫毛根部和瞼板腺開(kāi)口炎癥細(xì)胞數(shù)量與朗格罕斯細(xì)胞變化，在后續(xù)研究中，我們將通過(guò)共聚焦顯微鏡對(duì)蠕形螨分種觀(guān)察，并對(duì)復(fù)發(fā)性霰粒腫炎癥情況進(jìn)行進(jìn)一步觀(guān)察。