蒸發(fā)光散射檢測器在中藥成分分析中的應(yīng)用研究

霍秦秦 孫立麗 秦麗娜 王婉婷

（1 吉林市食品藥品檢驗所，吉林 吉林 132000；2 華北制藥華勝有限公司，河北 石家莊 050000）

1 蒸發(fā)光散射檢測器的介紹

1.1 蒸發(fā)光散射檢測器的概述：作為一種新型的通用型檢測器，蒸發(fā)光散射檢測器可以很大程度上克服傳統(tǒng)UV檢測器檢測方法的不足，同時蒸發(fā)光散射檢測器還可運用在超臨界流體色譜和逆流色譜的檢測中。目前，在醫(yī)藥、化工、食品等行業(yè)都會用到蒸發(fā)光散射檢測器[1]。

1.2 蒸發(fā)光散射檢測器的工作原理 蒸發(fā)光散射檢測器通過利用流動相與被檢測物質(zhì)之間相差的蒸氣壓來除去揮發(fā)的流動相，并在此基礎(chǔ)上利用不揮發(fā)性的組分粒子讓從激光光源中發(fā)出的光受到散射，硅光二極管會記錄并通過信號輸出這些受到散射的光信號[2]。

霧化過程，蒸發(fā)過程，檢測過程是蒸發(fā)光散射檢測器運行的3個過程。霧化過程是將色譜柱的流出物利用惰性氣體或純凈空氣霧化[3]。蒸發(fā)過程就是讓色譜柱流出物中的流動相在加熱的漂移管中揮發(fā)，而留下?lián)]發(fā)性較小的粒子作為被檢測的粒子。檢測過程，這是測定不揮發(fā)性粒子對光的散射過程，最終將這種光的散射信號記錄下來。

1.3 蒸發(fā)光散射檢測器的優(yōu)點及特殊性：蒸發(fā)光散射檢測器的作用范圍十分廣泛，不僅可以作為高效液相色譜的色譜檢測器，還可以作為超臨界流體色譜以及高速逆流色譜的色譜檢測器[4]。蒸發(fā)光散射檢測器作為新型的通用檢測器，它有三個無法被替代的優(yōu)點：第一，蒸發(fā)光散射檢測器不依賴樣品的光學(xué)性質(zhì)。凡是揮發(fā)性不超過流動相的物質(zhì)，在蒸發(fā)光散射檢測器上都可以產(chǎn)生響應(yīng)。第二，蒸發(fā)光散射檢測器在支持梯度洗脫方面占據(jù)了極有利的優(yōu)勢，流動相配比變化對基線產(chǎn)生的影響可以被蒸發(fā)光散射檢測這種方法消除。第三，蒸發(fā)光散射檢測器與傳統(tǒng)的示差檢測器及紫外低波長檢測方法相比會有更好的靈敏度。除此以外，與UV檢測器進行對比，蒸發(fā)光散射檢測器也表現(xiàn)出了它在檢測方面的特殊性。為了能合理地限制非揮發(fā)性的緩沖鹽的使用，使用蒸發(fā)光散射檢測器時，要求流動相和修飾劑都必須具有良好的揮發(fā)性。

2 中藥成分分析

對中藥成分進行分析會有以下六點作用：第一，可以對中藥的真?zhèn)芜M行辨別；第二，可以對中藥藥材品質(zhì)的優(yōu)劣進行評定；第三，可以對中藥藥材中毒性成分的含量進行監(jiān)控；第四，還可以對中藥藥材中雜質(zhì)的含量進行監(jiān)控；第五，使GAP藥材品質(zhì)得到保證；第六，對中藥制劑的質(zhì)量進行監(jiān)控。

3 蒸發(fā)光散射檢測器在中藥分析中的優(yōu)勢

在復(fù)雜的中藥成分中有一部分化學(xué)成分是在紫外波長處無法吸收的，還有一部分化學(xué)成分只在紫外的末端有吸收，這就限制了傳統(tǒng)紫外檢測器的使用[5]。同時，由于流動相的干擾用，使用傳統(tǒng)的紫外檢測器對中藥成分分析存在色譜分離的問題，這也是影響紫外檢測器對中藥成分進行分析的一大因素。但是蒸發(fā)光散射檢測器恰好在某種程度上彌補了這些不足之處，例如在皂苷類成分、糖類成分、內(nèi)酯類成分以及部分生物堿等成分的測定及分析方面，使用蒸發(fā)光散射檢測器檢測就取得了滿意的結(jié)果。

4 蒸發(fā)光散射檢測器在中藥分析中的應(yīng)用

4.1 蒸發(fā)光散射檢測器測定中藥中皂苷元的含量。以葫蘆巴為例，建立葫蘆巴的高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法。以Kromasil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5μm）為固定相，柱溫為40 ℃，以乙腈-水（95:5）為流動相，流速為0.8 mL/min。結(jié)果顯示：皂苷元在0.792～3.96 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為r=0.9998，葫蘆巴藥材中的皂苷元的平均回收率=100.13%。在n=5時RSD為1.9%。高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，可作為控制葫蘆巴質(zhì)量的方法。

4.2 蒸發(fā)光散射檢測器測定中藥中的生物堿含量。以地骨皮為例，建立地骨皮中甜菜堿的高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法，以250 mm×4.6 mm，5 μm的Luna C18色譜柱為固定相，色譜柱溫度設(shè)為30 ℃，流動相為99.9∶0.1的水—冰醋酸，流速設(shè)為0.15 mL/min，漂移管溫度為100 ℃，氣體流速為2.50 L/min。通過蒸發(fā)光散射檢測器檢測得出甜菜堿的含量在0.486～2.43 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r為0.9999，地骨皮藥材中甜菜堿的平均回收率為97.4%，在n=5的情況下RDS為1.3%。以上分析方法準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，可以作為控制地骨皮質(zhì)量的檢測方法。

4.3 蒸發(fā)光散射檢測器對中藥中氨基酸含量的測定。對板藍根中的精氨酸建立高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法。線性回歸方程為Y=6.1435+1.2805X，r=0.9992，中藥板藍根中精氨酸的平均回收率為99.3%，在n為5的情況下，RSD為0.9%。高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，可以作為控制板藍根質(zhì)量的方法。

5 總結(jié)

在那些弱紫外吸收或者無紫外吸收的中藥成分的分析中，蒸發(fā)光散射檢測器檢測法確實發(fā)揮出來它獨特而不可替代的作用。除此以外，蒸發(fā)光散射檢測器在定性鑒別研究中也可以相對全面地反應(yīng)出樣品的信息。但到目前為止利用蒸發(fā)光散射檢測器的檢測方法對中藥成分進行分析還有許多不盡如人意的地方，蒸發(fā)光散射檢測器還不能完全代替UV檢測器對中藥成分進行分析測定。因此需要繼續(xù)發(fā)展完善蒸發(fā)光散射檢測器及相應(yīng)檢測技術(shù)，以便讓蒸發(fā)光散射檢測器在中藥成分分析中起到越來越重要的作用。