氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)家蠶的毒性測(cè)定＊

陳偉國(guó)，楊一平，林蔚紅，孫海燕，錢(qián)秋杰，張 芬

（海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400）

氟啶蟲(chóng)酰胺（flonicamid）是日本石原產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)的新型吡啶酰胺類(lèi)殺蟲(chóng)劑，具有觸殺和胃毒作用，以及良好的內(nèi)吸和滲透作用，殺蟲(chóng)機(jī)理新穎，對(duì)蚜蟲(chóng)等刺吸式口器害蟲(chóng)具有快速拒食活性和很好的神經(jīng)毒性，害蟲(chóng)攝入藥劑后很快停止吮吸，最后饑餓而死，可防治蚜蟲(chóng)、粉虱、薊馬、葉蟬、飛虱、木虱、介殼蟲(chóng)等。氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)天敵昆蟲(chóng)、訪(fǎng)花昆蟲(chóng)較安全，對(duì)水生動(dòng)植物無(wú)影響，100 mg/L對(duì)蠶無(wú)影響［1～4］。氟啶蟲(chóng)酰胺在我國(guó)登記在水稻、黃瓜、甘藍(lán)、馬鈴薯、蘋(píng)果等作物防治稻飛虱、蚜蟲(chóng)［5］，使用濃度在100 mg/L左右［6～7］，浙江省從 2017 年新增推薦氟啶蟲(chóng)酰胺用于防治果蔬類(lèi)溫室煙粉虱、蚜蟲(chóng)［8］。但氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)非靶標(biāo)昆蟲(chóng)家蠶的毒性未見(jiàn)相關(guān)研究報(bào)道，本試驗(yàn)測(cè)定了氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)家蠶的急性食下毒性和在桑葉上的殘留毒性，為該藥的安全使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)農(nóng)藥

10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑（日本石原產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社生產(chǎn)），農(nóng)藥登記證號(hào)PD20110324。

1.1.2 供試桑園

海寧市蠶桑站試驗(yàn)桑園，8年生“農(nóng)桑14號(hào)”，中低桿養(yǎng)成，每667 m2桑園栽1000株。

1.1.3 供試家蠶

“白玉×秋豐”，由浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)家蠶的急性食下毒性測(cè)定

在預(yù)備試驗(yàn)基礎(chǔ)上，將10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑稀釋成5～7個(gè)梯度濃度，取適熟桑葉分別浸入不同濃度的藥液中1 min，取出后自然晾干，置于保鮮盒內(nèi)，然后給入20頭3齡起蠶，在溫度26.5℃±1℃、相對(duì)濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼喂藥葉，飼喂毒葉24 h后改用新鮮無(wú)毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡餉食，每天調(diào)查家蠶幼蟲(chóng)中毒死亡數(shù)，以清水處理為空白對(duì)照，重復(fù)3次。采用DPS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)藥液質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與幼蟲(chóng)死亡率概率值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析［9］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.2.2 氟啶蟲(chóng)酰胺在桑葉上的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性和殘毒期測(cè)定

（1）將10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑稀釋成500倍、1000倍和2000倍液（即氟啶蟲(chóng)酰胺200、100、50 mg/L）3種不同濃度的藥液備用。

（2）3種濃度處理各選定10株桑樹(shù)，在枝條頂端最大葉位處做好標(biāo)記，防止采摘未噴到藥液的新生桑葉；每株供試桑樹(shù)各選取1～2根枝條，上半部分套上透明塑料袋臨時(shí)密封，將上述3種濃度藥液分別均勻噴灑于供試桑樹(shù)的桑葉正反葉面，不同處理間隔2行桑樹(shù)作保護(hù)行。待藥液干后撕開(kāi)套在枝條上的塑料袋頂部并做好固定，防止未噴藥處理的桑葉受污染。

（3）噴藥后每隔1 d采摘供試桑葉喂飼3齡起蠶，直至不再出現(xiàn)中毒癥狀和死亡蠶后結(jié)束。飼養(yǎng)處理分別為500倍、1000倍和2000倍藥液噴灑的桑葉，以及枝條上部套在塑料袋內(nèi)未直接噴藥處理的桑葉，以新鮮無(wú)毒桑葉為空白對(duì)照，共7個(gè)處理，每處理30頭3齡起蠶，重復(fù)3次，共計(jì)21個(gè)飼養(yǎng)小區(qū)，飼養(yǎng)至4齡起蠶結(jié)束，逐日調(diào)查記載各處理區(qū)中毒死亡蠶頭數(shù)，計(jì)算中毒死亡率。

在殘毒試驗(yàn)飼養(yǎng)采葉時(shí)考查各濃度藥液處理對(duì)桑葉的藥害情況。

1.2.3 氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)家蠶的中毒癥狀觀察

將10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑稀釋成1000倍（100 mg/L）藥液，桑葉在藥液中浸漬約1 min后取出，晾干后飼喂3齡起蠶，定時(shí)觀察記錄供試蠶的中毒癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)家蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測(cè)定10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑對(duì)3齡起蠶的急性食下毒性，添毒24 h的毒力回歸方程為Y=-1.9272+6.8639X，相關(guān)系數(shù)r=0.9914，LC50為10.2146 mg/L，95%置信限為9.6972～10.9091 mg/L。參照2014年發(fā)布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第11部分：家蠶急性毒性試驗(yàn)》附錄A“農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性等級(jí)劃分”［10］，10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑對(duì)家的毒性等級(jí)為高毒（0.5＜LC50≤20 mg/L）。

2.2 氟啶蟲(chóng)酰胺在桑葉上的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性和殘毒期

從表1可見(jiàn)，10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）稀釋藥液噴于桑樹(shù)枝葉，噴藥后3 d采摘藥液處理桑葉飼喂3齡起蠶，死亡率100%，噴藥后5 d的死亡率迅速下降到10.00%，噴藥后9 d不再出現(xiàn)中毒癥狀和死亡蠶；10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑1000倍（100 mg/L）稀釋藥液噴于桑樹(shù)枝葉，噴藥后1 d采摘藥液處理桑葉飼喂3齡起蠶，死亡率100%，噴藥后3 d的桑葉喂蠶死亡率下降到60.00%，噴藥后7 d不再出現(xiàn)中毒死亡蠶；10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑2000倍（50 mg/L）稀釋藥液噴于桑樹(shù)枝葉，噴藥后1 d的桑葉喂蠶死亡率為90%，噴藥后3 d不再出現(xiàn)中毒死亡蠶。采摘枝條上部未直接噴藥處理的桑葉飼喂3齡起蠶，10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）處理區(qū)的噴藥后1 d死亡率為10.00%，3 d和5 d的死亡率為4.44%，7 d后不再出現(xiàn)中毒死亡蠶；10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑1000倍（100 mg/L）和2000倍（50 mg/L）處理區(qū)均無(wú)中毒癥狀和死亡蠶。試驗(yàn)結(jié)果表明，10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑藥液在桑葉上的殘留毒性降解較快，高濃度藥液噴于桑葉后有一定的向上傳導(dǎo)毒性，但其作用較弱。

表1 10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑在桑葉上的殘留毒性和內(nèi)吸毒性測(cè)定結(jié)果Table 1 Determination of Residual Toxicity and Systemic Toxicity of 10%Flonicamid Water Dispersible Granule on Mulberry Leaves

2.3 氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)桑樹(shù)的藥害

殘毒試驗(yàn)噴藥后1 d、3 d、5 d和7 d采摘供試桑葉時(shí)，分別觀察不同濃度藥液處理區(qū)桑葉的生長(zhǎng)情況，均未見(jiàn)異常癥狀，表明10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）、1000倍（100 mg/L）和2000倍（50 mg/L）3種稀釋濃度對(duì)桑樹(shù)葉片未產(chǎn)生藥害。

2.4 氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)家蠶的中毒癥狀

10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑按常規(guī)使用濃度1000倍（100 mg/L）稀釋藥液處理的桑葉飼喂3齡起蠶，約6 h后食桑減緩；12 h左右部分個(gè)體停止食桑，靜伏或側(cè)倒；約24 h后多數(shù)側(cè)倒，體軀伸長(zhǎng)，蠶體較軟；48 h左右陸續(xù)死亡。家蠶中毒過(guò)程未見(jiàn)胸部膨大、搖頭、吐液、狂燥爬動(dòng)等癥狀，毒性作用表現(xiàn)較慢。

3 小結(jié)與討論

3.1 氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)家蠶的毒性

10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑對(duì)3齡起蠶添毒24 h的急性食下毒性（LC50）10.2146 mg/L。10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）、1000倍（100 mg/L）和2000倍（50 mg/L）液噴灑桑葉，分別在噴藥后9 d、7 d和3 d采摘桑葉連續(xù)喂飼3齡起蠶1個(gè)齡期不再表現(xiàn)出中毒癥狀和死亡蠶。10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑500倍（200 mg/L）液噴灑桑葉后，枝條上部未噴藥處理的桑葉對(duì)3齡起蠶有輕微的毒性。試驗(yàn)結(jié)果表明，10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑對(duì)家蠶的毒性等級(jí)為高毒，在桑葉上的毒性殘留時(shí)間較短，桑葉上的傳導(dǎo)毒性較弱。

氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)螨、雙翅目、鞘翅目和鱗翅目害蟲(chóng)沒(méi)有活性，對(duì)咀嚼式口器害蟲(chóng)沒(méi)有毒力，是典型的選擇性殺蟲(chóng)劑，在推薦劑量下使用，對(duì)有益節(jié)肢動(dòng)物如家蠶、蜜蜂、瓢蟲(chóng)等無(wú)不良影響［11～12］。但本試驗(yàn)對(duì)家蠶毒性測(cè)定結(jié)果并不一致，可能因氟啶蟲(chóng)酰胺的致毒特點(diǎn)以及測(cè)定方法不同所致，有關(guān)氟啶蟲(chóng)酰胺的毒理學(xué)研究幾乎都是針對(duì)刺吸式口器昆蟲(chóng)，也有人推測(cè)氟啶蟲(chóng)酰胺是一種前藥，經(jīng)代謝轉(zhuǎn)化為活性藥物后而起作用［11］，因此對(duì)非靶標(biāo)昆蟲(chóng)如家蠶的毒性可能存在不同途徑。家蠶攝入氟啶蟲(chóng)酰胺后主要表現(xiàn)為拒食、靜伏或側(cè)倒、體軀伸長(zhǎng)、蠶體較軟，其中毒反應(yīng)較為遲緩，死亡時(shí)間較長(zhǎng)。

3.2 氟啶蟲(chóng)酰胺防治桑樹(shù)害蟲(chóng)的可能性

氟啶蟲(chóng)酰胺的殺蟲(chóng)機(jī)理新穎，與目前市售的其他殺蟲(chóng)劑無(wú)交互抗性，刺吸式口器害蟲(chóng)取食帶有氟啶蟲(chóng)酰胺的植物汁液后，迅速停止取食，且拒食作用具有不可恢復(fù)性，被阻止吸汁的害蟲(chóng)最終因饑餓而死亡。氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)害蟲(chóng)口針的阻塞作用類(lèi)似于吡蚜酮，但與吡蚜酮的作用機(jī)理存在差異，氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)害蟲(chóng)還具有神經(jīng)毒性。從化學(xué)結(jié)構(gòu)和作物防治譜來(lái)看，氟啶蟲(chóng)酰胺與氟啶蟲(chóng)胺腈都有太多相似之處［12］。鄧明學(xué)等［13］報(bào)道了氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)柑橘粉虱的田間防效優(yōu)于啶蟲(chóng)脒。而吡蚜酮和氟啶蟲(chóng)胺腈均對(duì)桑薊馬、桑粉虱有良好的防效［14～15］，因此，推測(cè)氟啶蟲(chóng)酰胺有望成為防治桑粉虱、桑薊馬等桑樹(shù)微型害蟲(chóng)的新穎殺蟲(chóng)劑，而且氟啶蟲(chóng)酰胺在桑葉上的殘毒期較短更是一大優(yōu)勢(shì)。鑒于氟啶蟲(chóng)酰胺對(duì)害蟲(chóng)的速效性較差，可與烯啶蟲(chóng)胺等速效性較好的殺蟲(chóng)劑混配使用加以彌補(bǔ)［16～17］。當(dāng)然，氟啶蟲(chóng)酰胺用于桑樹(shù)害蟲(chóng)防治，尚須對(duì)其田間防效以及對(duì)家蠶的經(jīng)濟(jì)性狀等方面進(jìn)一步深入試驗(yàn)。