張洪 武正才 黃春球 謝忠浪 騰利兵 郭昕

【摘?要】?目的：用高效液相色譜法建立市售燈盞花藥材及其提取物的指紋圖譜。方法：采用HPLC法，Agilent zorbax C18色譜柱（5μm，4.6mm×250mm）;乙腈-0.1% 醋酸銨水溶液（磷酸調(diào)PH至3）為流動(dòng)相梯度洗脫;流速1mL/min;柱溫25℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為 335nm。結(jié)果：燈盞花藥材有 10個(gè)共有峰;燈盞花提取物有12個(gè)共有峰。結(jié)論：此方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于市售燈盞花藥材及其提取物的HPLC指紋圖譜測(cè)定，為今后其質(zhì)量評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】?燈盞花藥材;燈盞花提取物;HPLC指紋圖譜

【中圖分類號(hào)】R284.2?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2020）24-0039-04

Abstract：Objective To establish the HPLC fingerprint of erigeron breviscapus from market and erigeron extracts. Methods HPLC analysis was performed on aAgilent zorbax C18 column（5μm，4.6mm×250mm）with the eluting system of gradiant consisted of acetonitrile-0.1% ammonium acetate （H3PO4adjust PH to 3）.The flow ratewas 1mL/min;The column temperature was maintained at 25℃ and the detection wavelength was 335nm.Results 10 peaks were gained on the HPLC fingerprint of erigeron breviscapu and 12 peaks were gained on the HPLC fingerprint of erigeron extracts.Conclusion The method with good reproducibility is simple and accrute，which can be used for determination of HPLC fingerprint and quality control of erigeron breviscapus from market and erigeron extracts. It provides scientific basis of future study of erigeron breviscapus from market and erigeron extracts.

Keywords：Erigeron Breviscapus;Erigeron Extracts;HPLC Fingerprint

燈盞花為菊科植物短葶飛蓬 [Erigeron Breviscapul（Vent.）Hand- Mass.]的干燥全草[1]，又名燈盞細(xì)辛，是云南道地的民族藥材。全草具有散寒解表、祛風(fēng)除濕、活絡(luò)止痛、消積的功效，臨床上多用于治療腦血栓、腦栓塞、中風(fēng)等腦血管意外所致的癱瘓癥、心絞痛等[2]。燈盞花主要成分為燈盞花乙素，此外還含有黃酮、吡喃酮、倍半萜、咖啡酸酯、酚酸類化合物等多種化學(xué)成分[3]。

2015版中國(guó)藥典以燈盞花乙素的含量作為評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的指標(biāo)。然而，僅控制燈盞花乙素的含量并不能反映燈盞花藥材或提取物的整體質(zhì)量。指紋圖譜質(zhì)量控制技術(shù)通過(guò)全面反映中藥所含內(nèi)在化學(xué)成分的種類與數(shù)量，能有效的反映中藥質(zhì)量[4]。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜分析方法對(duì)10批市售燈盞花藥材和8批自提燈盞花提取物進(jìn)行系統(tǒng)的指紋圖譜研究，用“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（版本2004A和B）”建立燈盞花藥材及其提取物對(duì)照指紋圖譜，對(duì)各批次的燈盞花藥材及其提取物的指紋圖譜相似度進(jìn)行分析比較。近年來(lái)雖然有一些文獻(xiàn)對(duì)燈盞花藥材及其提取物HPLC指紋圖譜進(jìn)行研究[5-6]，但是這些指紋圖譜僅僅指認(rèn)了參照色譜峰的結(jié)構(gòu)。筆者對(duì)生產(chǎn)用市售燈盞花藥材及燈盞花提取物的HPLC指紋圖譜進(jìn)一步進(jìn)行研究，標(biāo)定其中3個(gè)指紋峰的結(jié)構(gòu)，研究結(jié)果為市售燈盞花藥材及其提取物的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供科學(xué)參考依據(jù)，為市售燈盞花藥材及其提取物提供一種有效的質(zhì)量控制方法，確保外購(gòu)燈盞花藥材及其提取物相關(guān)產(chǎn)品的穩(wěn)定性和均一性。

1?儀器與試藥

1.1?儀器?Agilent-1260高效液相色譜儀（四元梯度泵，自動(dòng)恒溫進(jìn)樣器，柱溫箱，紫外檢測(cè)器），超聲波清洗儀，中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（版本2004A和B）的相關(guān)軟件。

1.2?材料?乙腈（色譜純），醋酸銨（分析純），磷酸（分析純），超純水。燈盞花乙素、燈盞花甲素、野黃芩素對(duì)照品（云南植物藥業(yè)有限公司研究院自制）。10批燈盞花藥材（云南植物藥業(yè)有限公司外購(gòu)），8批燈盞花提取物（云南植物藥業(yè)有限公司按2015版《中國(guó)藥典》一部中燈盞細(xì)辛顆粒標(biāo)準(zhǔn)制法提取外購(gòu)燈盞花所得的提取物）。

2?方法與結(jié)果

2.1?色譜條件?色譜柱Agilent zorbax C18（5μm，4.6mm×250mm）;流動(dòng)相：乙腈（A），0.1%的醋酸銨水溶液（磷酸條PH為3）（B），梯度洗脫比例見表1;檢測(cè)波長(zhǎng)：335nm;柱溫：25℃;進(jìn)樣量：5μL;流速：1mL/min。

2.2?溶液的制備

2.2.1?對(duì)照品溶液的制備?精密稱取燈盞花乙素對(duì)照品適量，加甲醇超聲溶解制成含量為0.140mg/mL的溶液。精密稱取燈盞花甲素對(duì)照品適量，加甲醇超聲溶解制成含量為0.238mg/mL 的溶液。精密稱取野黃芩素對(duì)照品適量，加甲醇超聲溶解制成含量為 0.043mg/mL的溶液。