許春來(lái)

（江蘇省建湖縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 鹽城 224700）

細(xì)菌作為一種原核微生物，具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單以及形態(tài)微小的特點(diǎn)，但是肉眼無(wú)法直接觀察，因此，在臨床的診斷和治療過(guò)程中，細(xì)菌檢驗(yàn)占據(jù)十分重要的作用。近年來(lái)，伴隨細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展不斷成熟和完善，臨床上對(duì)于細(xì)菌鑒定以及藥敏結(jié)果的分析要求隨之不斷提高，目前，臨床上對(duì)于細(xì)菌的鑒定方法和技術(shù)也相對(duì)較多，由于檢驗(yàn)操作的過(guò)程并不相同，加之容易受到主觀因素的影響，將會(huì)直接影響鑒定結(jié)果[1]。選取我院檢驗(yàn)科所接收的264例陽(yáng)性血液標(biāo)本，分別采取常規(guī)藥敏以及直接藥敏的檢驗(yàn)方法，觀察鑒定結(jié)果和藥敏結(jié)果的符合率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取我院2018年10月～2019年10月檢驗(yàn)科所接收的264例陽(yáng)性血液標(biāo)本，研究時(shí)間在，按照不同檢驗(yàn)方法分為常規(guī)組和直接組。其中，男142例，女122例，年齡16～82歲，平均（46.52±2.47）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者自愿參與研究；②簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①血液系統(tǒng)疾?。虎诓杉簶颖?8h內(nèi)，并未用藥或者接受其他治療；③凝血功能障礙；④資料不全。

1.2 檢驗(yàn)方法

留取患者20 mL的血液樣本，分別放置含溶血素厭氧菌以及含樹脂需氧培養(yǎng)瓶中，并將其放置于全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀器中。對(duì)于培養(yǎng)陽(yáng)性血標(biāo)本分別采取以下兩種方法進(jìn)行檢驗(yàn)。

常規(guī)組采取常規(guī)藥敏試驗(yàn)的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。將血液標(biāo)本放置于血平板、巧克力平板以及麥康凱平板培養(yǎng)，分別放置于濃度為5%、溫度為35攝氏度的CO2環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，持續(xù)20h。取菌落涂片后，進(jìn)行常規(guī)的革蘭染色，并根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行觸酶或者氧化酶試驗(yàn)。利用微生物鑒定儀，進(jìn)行細(xì)菌鑒定以及藥敏試驗(yàn)。具體操作步驟如下：使用無(wú)菌棉簽取菌落，并放置于鑒定管中，混合均勻后靜置10 s，出現(xiàn)氣泡則為鑒定失敗。使用比濁儀將菌液濃度調(diào)整為0.5麥?zhǔn)蠁挝唬号渲猛瓿珊笮柙?0 s內(nèi)完成操作。最后，將145 μL鑒定管菌懸液轉(zhuǎn)入藥敏管當(dāng)中，充分混勻。藥敏和鑒定板卡分別插入AST藥敏管以及鑒定管中。輸入最終鑒定以及藥敏結(jié)果，并將藥敏以及鑒定板放入儀器當(dāng)中，關(guān)閉艙門，完成檢驗(yàn)。

直接組則采取直接藥敏試驗(yàn)的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。使用無(wú)菌注射器抽取10 mL血液樣本，將其放置于無(wú)菌試管中，使用密度梯度離心法，按照每分鐘1500轉(zhuǎn)進(jìn)行離心處理，處理時(shí)間在5～10 min，收集上清液后，將其轉(zhuǎn)移到全新的離心管中，隨后按照每分鐘3000轉(zhuǎn)進(jìn)行離心處理，處理時(shí)間15m in，去除上清液后，進(jìn)行PBS洗滌和沉淀。此外，取20 μL懸液涂片進(jìn)行革蘭染色處理，將其倒置于顯微鏡下繼續(xù)觀察，鑒定細(xì)菌為陰性菌或者革蘭染色陽(yáng)性菌。最后，使用無(wú)菌棉簽取沉淀物，并利用全自動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng)或者藥敏系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定以及藥敏檢驗(yàn)。

1.3 臨床觀察指標(biāo)

分別采取以上兩種檢驗(yàn)方法后，比較兩組細(xì)菌鑒定結(jié)果和藥敏結(jié)果的符合率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

觀察指標(biāo)確定后，將兩組研究對(duì)象的指標(biāo)數(shù)據(jù)通過(guò)SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)進(jìn)行測(cè)評(píng)，計(jì)數(shù)資料采用（n，%）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，采用x2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)推斷。當(dāng)P值小于0.05時(shí)，表示兩組數(shù)據(jù)結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)參考價(jià)值。

2 結(jié) 果

2.1 細(xì)菌鑒定結(jié)果

所有血液標(biāo)本經(jīng)過(guò)檢驗(yàn)，陽(yáng)性檢出率為251例（95.08%）。直接組對(duì)于革蘭陽(yáng)性球菌的檢驗(yàn)符合率53例（20.08%），對(duì)于革蘭陰性桿菌的檢驗(yàn)符合率209例（79.17%），與常規(guī)組53例（20.08%）、209例（79.17%）相比并無(wú)明顯差異，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

直接組對(duì)于革蘭陰性桿菌的檢驗(yàn)敏感率257例（97.35%）以及耐藥率256例（96.97%），對(duì)于革蘭陽(yáng)性球菌檢驗(yàn)敏感率258例（97.73）以及耐藥率259例（98.11%），與常規(guī)組256例（96.97%）、255例（96.59%）比較并無(wú)明顯差異，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討 論

對(duì)于感染患者來(lái)說(shuō)，體內(nèi)將會(huì)帶有耐藥性的細(xì)菌，此時(shí)，若未進(jìn)一步增強(qiáng)細(xì)菌的耐藥性，將會(huì)導(dǎo)致患者病情加重，增加治療難度。因此，臨床上對(duì)于感染患者來(lái)說(shuō)，進(jìn)行血液細(xì)菌學(xué)以及耐藥性的檢驗(yàn)對(duì)于臨床診斷和后續(xù)的用藥治療具有十分重要的作用。近年來(lái)，伴隨抗生素濫用的問(wèn)題十分普遍，細(xì)菌耐藥性以及對(duì)于抗生素的敏感性隨之發(fā)生了巨大的變化，將會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌檢驗(yàn)的難度增加，因此，臨床上尋求一種有效而又快速的檢驗(yàn)方法十分重要，進(jìn)而提高檢驗(yàn)質(zhì)量，為臨床的治療提供可靠的數(shù)據(jù)支持[2-3]。

目前，臨床上通常采取基因鑒定以及表型鑒定兩種鑒定方法，表型鑒定法主要是根據(jù)生理變化、具體形態(tài)、蛋白質(zhì)以及細(xì)胞組分等方面的變化進(jìn)行細(xì)菌的鑒定，目前，對(duì)于大部分醫(yī)院來(lái)說(shuō)，由于醫(yī)療條件有限，難以全面開展基因型鑒定。對(duì)于藥敏試驗(yàn)的檢驗(yàn)方法相對(duì)較多，如：稀釋法、擴(kuò)散法以及抗生素濃度梯度法，但是不同檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)結(jié)果也各不相同[4-5]。

常規(guī)的檢驗(yàn)方法對(duì)于陽(yáng)性血液標(biāo)本的檢出率相對(duì)較高，但是藥敏試驗(yàn)以及細(xì)菌鑒定的速度相對(duì)緩慢，難以滿足臨床診斷和治療的需求[6]。經(jīng)過(guò)研究，得出以下結(jié)果：所有血液標(biāo)本經(jīng)過(guò)檢驗(yàn)，陽(yáng)性檢出率為251例（95.08%）。直接組對(duì)于革蘭陽(yáng)性球菌的檢驗(yàn)符合率以及革蘭陰性桿菌的檢驗(yàn)符合率與常規(guī)組相比并無(wú)明顯差異，直接組對(duì)于革蘭陰性桿菌的檢驗(yàn)敏感率以及耐藥率以及革蘭陽(yáng)性球菌檢驗(yàn)敏感率與常規(guī)組比較并無(wú)明顯差異，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。因此可見(jiàn)，直接藥敏試驗(yàn)的過(guò)程中，處于適當(dāng)?shù)臏囟认?，?duì)于抑菌環(huán)大小進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，在此期間無(wú)需進(jìn)行培菌培養(yǎng)，使得鑒定更加快捷和方便，能夠?yàn)榕R床的診斷和后續(xù)的治療提供有效的依據(jù)[7-10]。對(duì)于病情并不嚴(yán)重以及復(fù)雜的患者來(lái)說(shuō)，短時(shí)間并不會(huì)威脅患者生命安全，則可進(jìn)行常規(guī)檢查，通常情況下直接進(jìn)行藥敏試驗(yàn)將可以達(dá)到檢驗(yàn)要求，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于臨床當(dāng)中。