中國道地藥材研究近況系列(21)道地藥材鐵皮石斛的研究近況*

嚴(yán)雪梅 楊建宇 李 楊 范竹雯 鄭紹明 柳越冬 祝慶明 陸錦銳 張朝杰 張德鴻 祝之友※

鐵皮石斛，是蘭科石斛屬植物鐵皮石斛的莖，于安徽、廣東、廣西均有分布，性微寒、味甘，中醫(yī)將其歸為腎、胃、肺經(jīng)，清熱滋陰、益胃生津、名目強(qiáng)腰，可治口干食少、陰傷虛熱等證候[1]。鐵皮石斛的藥用歷史悠久，古人常將其用于滋養(yǎng)肝肺，亦或用于泡酒，制茶，今學(xué)者經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其還有治療糖尿病、高血壓、提高免疫力、促進(jìn)毛發(fā)生長等作用。

1 鐵皮石斛的歷史沿革

鐵皮石斛是我國傳統(tǒng)的道地藥材。《神農(nóng)本草經(jīng)》首次提及石斛并將其列為上品言：“味甘，主傷中，除痹，下氣，強(qiáng)陰，補(bǔ)五臟虛勞贏弱，久服厚腸胃”，《名醫(yī)別錄》言：“無毒，益精，補(bǔ)內(nèi)絕不足，平胃氣，長肌肉，逐皮膚邪熱氣，腳膝疼冷痹弱，定志除痙”，后隋唐《藥性論》記載：“主治男子腰腳軟弱，健陽，逐皮肌風(fēng)痹、骨中久冷、虛損，補(bǔ)腎積精，腰痛”，鐵皮石斛對生長環(huán)境要求極為嚴(yán)苛；《雁蕩山志》有記載：“石斛產(chǎn)巖壁，山間人以巨綆束腰際，懸崖采之，為狀絕險(xiǎn)，往往有失事者”；古書籍對其道地產(chǎn)區(qū)的記載有些許出入，且一直未達(dá)成統(tǒng)一，梁朝《本草經(jīng)集注》記載：“今用石斛出始興”，學(xué)者考證，始興即今廣東韶關(guān)一帶，唐朝《新修本草》載：“始安亦產(chǎn)，今荊襄及江左又有二種”，《雁山志》記載明朝萬歷年間，雁蕩(即今大荊和雁蕩山)所產(chǎn)鐵皮石斛已上貢皇室，因此可將廣東、廣西、安徽霍山均認(rèn)為其道地產(chǎn)區(qū)[2,3]。

2 鐵皮石斛炮制與品鑒方式

自古代石斛炮制就已有多種方法，《本草經(jīng)集注》記載有水制法：“惟可為酒漬、煮湯用爾”，還有火制法，包括炒、炙、焙等方法，炒又包括酒炒、清炒、鹽水炒，酒炒于《圣濟(jì)總錄》中有記載：“石斛(去根，銼，酒炒)”，清炒于《評注產(chǎn)科心法》中有記載：“釵石斛(炒)”，鹽水炒于《得配本草》中有記載：“鹽水拌炒，補(bǔ)腎兼清腎火、清胃火”，《黃帝素問宣明論方》中記載有酒炙法：“石斛(去根酒炙)”，《古今醫(yī)徹》中記載有鹽水焙：“石斛(鹽水焙)”，另外還有煮制和蒸制等方法[4]。而今，石斛的炮制方法都是在古代傳統(tǒng)炮制法的基礎(chǔ)之上優(yōu)化而來，韋志厚等[5]發(fā)明了一種鐵皮石斛炮制方法，以鐵皮石斛的莖作原料，將傳統(tǒng)酒炙工藝運(yùn)用到鐵皮石斛干條生產(chǎn)中，克服了鐵皮石斛必須寬湯久煎的技術(shù)難題，所得鐵皮石斛多糖(DCP)、氨基酸總量、甘露糖含量與鐵皮石斛楓斗相同，但溶出率顯著提高，香甜味濃郁，可用于臨床配方、直接食用或加工生產(chǎn)鐵皮石斛食品、藥品等。

鐵皮石斛因藥效良好、不易栽培，價(jià)格較昂貴，現(xiàn)市場上出現(xiàn)許多鐵皮石斛假冒現(xiàn)象，因此鑒別鐵皮石斛與其他品種顯得尤為重要。鑒別鐵皮石斛的方法可從外部形態(tài)和理化鑒別，鐵皮石斛最顯著的外部特征是其表皮呈現(xiàn)鐵綠色，且存在鐵銹色斑點(diǎn)[6]。理化鑒定常用的有光譜、顯微、分子生物學(xué)及色譜等技術(shù)，魏剛等[7]采用高效液相色譜(HPLC)特征圖譜法對共10批不同產(chǎn)地種源鐵皮石斛相似度進(jìn)行對比，運(yùn)用色譜相似度評價(jià)系統(tǒng)軟件(2004A版)生成對照圖譜并進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以浙江本地對照圖譜作對照，10批丹霞種源樣品的相似度為0.907～0.972，并標(biāo)示出37個(gè)共有峰，10批樣品鐵皮石斛間相似度達(dá)到0.907～0.972，說明丹霞種與浙江本地種鐵皮石斛主成分基本一致，丹霞種鐵皮石斛內(nèi)成分穩(wěn)定，但不同種源的鐵皮石斛成分及少數(shù)特征峰又存在差異，此分析方法可靠、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，為區(qū)別不同種源鐵皮石斛提供一種借鑒和依據(jù)。張蕾等[8]通過分析8個(gè)不同種源鐵皮石斛及其易混淆品的rDNA ITS區(qū)序列，計(jì)算遺傳距離并用鄰接法構(gòu)建NJ系統(tǒng)樹，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，鐵皮石斛與其易混品的ITS序列長度范圍在636～641 bp之間，其中不包括5.8S的ITS區(qū)片段長483 bp，其中含60個(gè)信息位點(diǎn)，185個(gè)變異位點(diǎn)，各樣品間的遺傳距離范圍在1.108%～2.594%之間，且NJ系統(tǒng)樹亦表明鐵皮石斛與其易混淆品間親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，此種鑒別方法能簡便、快速的鑒別不同種源鐵皮石斛與易混品，為鐵皮石斛的品鑒提供借鑒。

3 鐵皮石斛的栽培與資源現(xiàn)狀

鐵皮石斛是一種自然繁殖率低、生長周期長的藥用植物，生長于海拔1 600 m左右的山地巖石上，喜濕潤、涼爽、空氣暢通的地帶，因其是加工楓斗的唯一藥物，而被視為石斛中最珍貴的品種，又因?yàn)槠渥匀粭l件下不易萌芽生長，現(xiàn)今已被國家列為重點(diǎn)保護(hù)藥用植物，屬瀕危物種，因此大量學(xué)者對鐵皮石斛的栽培進(jìn)行了大量研究[9]。斯金平等[10]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛在85°～90°的懸崖表面，于生長季節(jié)噴水1～2 h/d的條件下，即使不施肥，不用基質(zhì)也能生長良好，鐵皮石斛的產(chǎn)量較高，其形態(tài)與野生鐵皮石斛一致;醇溶性浸出物與DCP含量顯著高于普通基質(zhì)栽培，且逆境有助于鐵皮石斛醇溶性浸出物等主要成分的積累。研究表明[11]，鐵皮石斛之所以不易人工栽培，是因?yàn)槠渥匀簧L環(huán)境中存在大量有助于其生長的真菌。侯曉強(qiáng)等[12]采用內(nèi)生真菌和鐵皮石斛組培苗進(jìn)行共生培養(yǎng)，篩選能夠促進(jìn)鐵皮石斛組培苗生長的內(nèi)生真菌，并采用分子鑒定、形態(tài)鑒定等方法對促進(jìn)鐵皮石斛生長的內(nèi)生真菌進(jìn)行形態(tài)鑒定，結(jié)果顯示，8株對鐵皮石斛苗有促生長作用的內(nèi)生真菌中，有2株能產(chǎn)孢子真菌屬于散囊菌(Eurotium)和擬盤多毛孢屬(Pestalotiopsis)，6株不產(chǎn)孢真菌，分別屬于鬼傘屬(Coprinellus)，鏈格孢屬(Alternaria)，棘殼孢屬(Pyrenochaeta)，柔膜菌目(Helotiales)，鱗傘屬(Pholiota)等，此研究結(jié)果對于增加鐵皮石斛資源具有指導(dǎo)意義。

4 鐵皮石斛藥理作用和應(yīng)用效果

鐵皮石斛中含有多糖、菲酚類、倍半萜類、生物堿、芴酮類及雙芐酚類等化學(xué)成分[13]。周佳等[14]通過硅膠色譜法、反相硅膠色譜以及半制備高效液相色譜法對鐵皮石斛70%乙醇提取物進(jìn)行分離純化，用現(xiàn)代波譜技術(shù)鑒定所得化合物的結(jié)構(gòu)，結(jié)果分離得到14個(gè)化合物，其中異鼠李素-3-O-α-L-鼠李糖基(1→2)-p-D-吡喃葡萄糖苷、苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3, 4, 5-三甲氧基苯-l-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、conicaoside、4-(3 '-羥丙基)-2, 6-二甲氧基苯酚-3'-O-β-D-葡萄糖苷和2, 6-二甲氧基-4-羥基苯酚-1-O-β-葡萄糖苷6種化合物首次從鐵皮石斛中分離得到。邱現(xiàn)創(chuàng)等[15]通過采用響應(yīng)面法優(yōu)化DCP提取工藝，在低超聲波功率為250 W的條件下，對提取液料比、超聲波、溫度及處理時(shí)間進(jìn)行中心組合試驗(yàn)，結(jié)果表明，DCP的最佳提取工藝為料液比50.26∶1(ml：g)、超聲波處理28.65 min、溫度41.74℃，此條件下DCP的提取率為25.4%，此工藝比傳統(tǒng)工藝的DCP提取率提高18%，時(shí)間也縮減了3/4，而且超聲波輔助法不會抑制DCP清除羥自由基、1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的能力。關(guān)于鐵皮石斛抗氧化能力。黃琴等[16]以Vc作陽性對照，采用溶劑提取法制備4個(gè)不同極性的鐵皮石斛提取物(EE、CE、EAE、NBE)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CE中黃酮總量為104.48 mg/g、酚類總量為40.96 mg/g，是4種樣品中最高的，且CE濃度為375 μg/ml時(shí)對2, 2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)自由基清除率達(dá)100%，CE濃度為1 500 μg/ml時(shí)對自由基1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的清除率達(dá)78.45%。相關(guān)研究顯示各提取物對ABTS、DPPH清除能力以及還原性與黃酮含量相關(guān)性較強(qiáng)，相關(guān)系數(shù)分別為0.845、0.902和0.994。而各提取物的還原能力及對羥自由基的清除能力與樣品中的多酚含量明顯相關(guān)，其相關(guān)系數(shù)為0.521，表明鐵皮石斛各提取物的抗氧化性與黃酮和總酚含量間存在明顯的相關(guān)性，說明酚類或黃酮類成分可能就是鐵皮石斛抗氧化活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。

趙佩等[17]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)服用不同劑量鐵皮石斛的大鼠結(jié)腸長度比潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的要長，且大鼠疾病活動指數(shù)(DAI)及組織學(xué)損傷評分降低、血清干擾素-γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量降低;結(jié)腸組織中的IFN-γ mRNA表達(dá)水平及過氧化物酶(MPO)表達(dá)量也明顯下降，說明鐵皮石斛提取物對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠有較好的治療效果。陳健等[18]采用水提醇沉法提取DCP，并將其應(yīng)用于脫發(fā)模型大鼠身上，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用DCP模型大鼠的毛發(fā)生長質(zhì)量、得分、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的mRNA表達(dá)水平及人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT)的成活率均顯著高于涂抹超純水的模型大鼠，說明了DCP能夠有效促進(jìn)毛發(fā)生長。張貝貝等[19]通過優(yōu)化提取工藝提取得到的DCP能夠增強(qiáng)B淋巴細(xì)胞瘤-2(Bcl-2)表達(dá)、抑制高糖誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞兔抗人單克隆抗體(Bax)表達(dá)，進(jìn)而抑制人血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，達(dá)到防止糖尿病血管病變的目的。宋燕華等[20]用普通飼料喂養(yǎng)的大鼠作對照組，不同劑量的鐵皮石斛葉喂養(yǎng)雌性大鼠作觀察組，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，高劑量鐵皮石斛葉組大鼠的自然殺傷細(xì)胞(NK)的細(xì)胞活性顯著高于對照組，且2組大鼠左后足跖厚度、淋巴細(xì)胞的增殖能力均有較大差異;不同劑量鐵皮石斛葉組大鼠的脾臟/體質(zhì)量、胸腺/體質(zhì)量比值差異不顯著，說明了鐵皮石斛葉能夠在一定程度上提高雌性大鼠的免疫力。

鐵皮石斛的臨床應(yīng)用歷史悠久?！侗静菡x》等古籍記載生石斛是治療肺胃火熾等癥的良藥；也有古書記載將其熬成膏能夠強(qiáng)筋健骨、補(bǔ)虛滋陰[21]。呂圭源等[22]通過給飲酒型高血壓模型小鼠服用鐵皮楓斗沖劑，服用32周，期間定期測量模型小鼠的體征、體質(zhì)量等指標(biāo)，觀察指標(biāo)的變化情況，發(fā)現(xiàn)①小鼠服藥后體重、自主活動次數(shù)、食量及抓力顯著升高，眩暈時(shí)間縮短，②模型小鼠服藥8周后血壓顯著下降，③模型小鼠服藥的第28、32周，小鼠血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、肌酐、尿酸及甘油三酯水平均顯著下降。結(jié)果說明了鐵皮楓斗沖劑能夠有效改善因長期飲酒引起的高血壓、肝腎功能及血脂生化指標(biāo)異常等癥狀。常景芝等[23]通過給糖尿病大鼠服用不同劑量的鐵皮楓斗顆粒，觀察其腎臟病理學(xué)等指標(biāo)的變化，結(jié)果顯示，與不服用藥物的糖尿病大鼠相比，服用鐵皮楓斗顆粒的糖尿病大鼠血肌酐、腎重指數(shù)、尿素氮、VEGF及24 h尿蛋白、腎皮質(zhì)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(GLUT-1)、結(jié)締組織生長因子(CTGF)mRNA表達(dá)量顯著降低，并呈現(xiàn)劑量依賴性，且腎臟組織病理變化情況明顯改善，結(jié)果說明了鐵皮楓斗顆粒能夠通過調(diào)節(jié)GLUT-1、VEGF、CTGF的表達(dá)進(jìn)而延緩糖尿病的進(jìn)展，從而達(dá)到保護(hù)腎臟的效果。

郭靜[24]選取慢性胃陰虛型胃炎患者，將其分為觀察組和對照組，對照組患者給予常規(guī)西醫(yī)治療，觀察組患者在對照組基礎(chǔ)上加用石斛益胃湯治療，治療6個(gè)月后顯示，觀察組患者血清TNF-α和超敏C反應(yīng)蛋白水平均低于對照組，觀察組患者的不良反應(yīng)發(fā)生率及主、次癥中醫(yī)證候積分和總積分均顯著低于對照組，臨床療效總有效率顯著高于對照組，結(jié)果說明了服用石斛益胃湯能夠明顯減輕慢性胃陰虛型胃炎患者的癥狀，控制炎癥反應(yīng)，降低復(fù)發(fā)率，增強(qiáng)療效。李祥云等[25]研制了一種膏方，該膏方由鐵皮楓斗、山楂等制成，可滋陰養(yǎng)生、抗衰延壽，還有治療子宮肌瘤的作用，側(cè)面說明鐵皮石斛具有滋潤腎肺、延年益壽、抗腫瘤的功效。

5 結(jié)語

本文對鐵皮石斛在本草中的歷史沿革、炮制、品鑒、栽培等情況進(jìn)行了簡要描述，著重分析了鐵皮石斛的藥理及臨床應(yīng)用，并指出了鐵皮石斛資源匱乏、瀕臨滅絕的資源現(xiàn)狀，旨在匯總鐵皮石斛的藥用價(jià)值，并研究鐵皮石斛當(dāng)前的一些近況，應(yīng)引起人們的重視，不要大肆濫采，以保證鐵皮石斛品質(zhì)優(yōu)良、資源穩(wěn)定、合理應(yīng)用于疾病治療中，有效改善患者治療效果。