王俊俠,劉全鳳,王 靜,范惠菊
(河北滄州職業(yè)技術(shù)學院,河北滄州 061001)
菊花被稱為花卉“四君子”(梅、蘭、竹、菊)之一,是我國傳統(tǒng)名花,有悠久的栽培歷史。主要供人觀賞,布置園林,美化環(huán)境。它的繁殖方法很多,可采用播種法、扦插法、分株法、組織培養(yǎng)法[1]。在種苗生產(chǎn)上運用最廣泛的方法是扦插和組培[2]。由于菊花的病毒病種類比較多,而且為害也較為嚴重[3],使用扦插繁殖苗,容易引起病毒病的擴張和蔓延[4]。因此,莖尖脫毒培養(yǎng)和組培快繁生產(chǎn)母本植株,再生產(chǎn)扦插苗的技術(shù),對優(yōu)良品種的脫病毒和復壯有著重要意義。本試驗以名貴菊花為研究對象,對其組織培養(yǎng)中誘導生根進行試驗研究,為豐富本地區(qū)的園林綠化種類提供理論依據(jù)。
1.1.1 供試材料:名貴菊花組織培養(yǎng)增殖后產(chǎn)生的單芽。
1.1.2 試驗用品:蔗糖、瓊脂及不同濃度的生長素NAA、IBA 的MS 培養(yǎng)基;珍珠巖、蛭石、中砂、草炭土4種基質(zhì)。
1.2.1 選材。選取繼代培養(yǎng)出的具有2cm 以上高度的叢生芽,并將這些叢生芽切成單芽。
1.2.2 接種。將上述切好的單芽接種在生根培養(yǎng)基上誘導生根,生根培養(yǎng)基蔗糖濃度10%,瓊脂濃度為0.6%,基本培養(yǎng)基為MS 培養(yǎng)基,無機鹽濃度設(shè)為1/4MS、1/3MS、1/2MS 3 種,激素選擇NAA,激素的濃度定為0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L 3 種,共設(shè)9 個處理。
1.2.3 接種后的管理。將接種后的苗子放在溫度24℃、光照3000Lx 的條件下培養(yǎng)。
1.2.4 觀察統(tǒng)計。在管理過程中隨時觀察試管苗的生長情況,生長20d 后統(tǒng)計生根度及根與苗的生長狀況。
1.2.5 煉苗移栽。先打開瓶口,7d 后將長成完整根系的苗從培養(yǎng)瓶中小心取出,洗去根部瓊脂,清洗時注意盡量不要傷根,然后移栽到不同的用0.1%KMnO4消毒過的基質(zhì)中。
1.2.6 移栽后的管理。試管苗移栽后澆足水分置于培養(yǎng)室中,給予弱光照,每3d 澆1 次水,保持基質(zhì)濕潤,以后逐漸增強光照,成活后移至室外。
1.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計。試管苗移栽成活數(shù)天后,統(tǒng)計成活率及幼苗生長狀況。并進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。
將繼代培養(yǎng)具有2cm 以上的叢生芽切成單芽,接種在不同激素濃度的生根培養(yǎng)基上誘導生根,5d 后有白色根出現(xiàn),7~10d 后根長0.5cm 以上,經(jīng)過20d 的培養(yǎng),由表1 可知,在培養(yǎng)基和接種芽數(shù)相同的情況下,在1/4MS 培養(yǎng)基中,添加NAA 0.5 mg/L 時,生根率最高為86.67%,平均生根條數(shù)為4.5 條。在1/3MS 培養(yǎng)基中,添加NAA 0.5mg/L 時生長情況最好,不定根長勢較好,生根數(shù)最多,根多且粗壯密長,生根率均最高,達100.00%。在1/2MS 培養(yǎng)基中,NAA 0.2mg/L 濃度下根的生長情況較好,生根芽數(shù)與生根數(shù)較理想,生根率最高可達93.33%。
綜上所述,在1/3MS 培養(yǎng)基中添加NAA 0.5mg/L的培養(yǎng)基生根率最高,其次為在1/2MS 培養(yǎng)基中添加NAA 0.2mg/L 的培養(yǎng)基,但綜合考慮這幾組培養(yǎng)基中根的生長情況可以確定:在培養(yǎng)基中添加NAA0.5mg/L 時培養(yǎng)基生根率最高,其不定根長勢較好,且生根芽數(shù)、生根數(shù)均較理想。
表1 名貴菊花試管苗生長情況
由表2 可以看出,將菊花接種在NAA 0.5mg/L 但不同無機鹽濃度的生根培養(yǎng)基上誘導生根,1/3MS 培養(yǎng)基效果最好,平均生根芽數(shù)30 個,平均生根數(shù)8.8條,平均生根率達100.00%。即在相同的生長素濃度下,1/3MS 培養(yǎng)基有利于菊花根的生長。
表2 不同無機鹽濃度對菊花誘導生根的影響
從表3 可以看出,移栽成活率在不同的移栽基質(zhì)中的次序為:蛭石>珍珠巖>中砂>草炭土。在蛭石栽培基質(zhì)中成活率最好,成活率達到100.00%,且幼苗的生長狀況較好;在草炭土基質(zhì)中幼苗的生長狀況較差,植株移栽成活率僅達63.33%;在珍珠巖和中砂栽培基質(zhì)中幼苗生長狀況一般,植株移栽成活率分別為86.67%和83.33%。
表3 不同栽培基質(zhì)對移栽成活率的影響
影響菊花試管苗生根及移栽成活率的因素有很多,如外植體的來源、激素種類及其濃度、無機鹽濃度、光照、溫度等。誘發(fā)菊花試管苗生根的培養(yǎng)基以1/3MS+NAA 0.5mg/L 為最佳,在此培養(yǎng)基中生根率高,根系生長狀況好,根系粗壯且密長生根數(shù)多。采用蛭石作為栽培基質(zhì),菊花試管苗移栽時可以獲得很好的生長效果,而采用草炭土做栽培基質(zhì)時生長效果不理想,其移栽成活率較低。所以,適合名貴菊花移栽的基質(zhì)為蛭石,在此基質(zhì)上移栽成活率可達100.00%。