陳集懿, 何 濤, 胡 潔
(上海交通大學(xué) 機(jī)械與動力工程學(xué)院, 上海 200240)
激光掃描共聚焦顯微鏡是獲得高分辨率熒光細(xì)胞圖像和生物醫(yī)學(xué)三維重建的最先進(jìn)技術(shù)之一.隨著成像技術(shù)的進(jìn)步, 針對微觀細(xì)胞的研究也逐漸在深入.這些研究需要涉及細(xì)胞的多維檢測和分析、從二維細(xì)胞成像向三維細(xì)胞成像的演變、以及從傳統(tǒng)空間成像到時間成像的擴(kuò)展.因此, 激光掃描共聚焦顯微鏡[1]的研究對于生物醫(yī)學(xué)及相關(guān)學(xué)科的發(fā)展具有重要意義.三維可視化的關(guān)鍵技術(shù)在于提取一系列連續(xù)的二維切片,通過激光掃描共聚焦顯微鏡重建厚生物組織的三維模型, 然后進(jìn)行定量分析.因此, 共聚焦圖像復(fù)原方法對于活細(xì)胞的檢測和三維結(jié)構(gòu)的探索具有很高的價值.
由于光學(xué)成像系統(tǒng)中存在點(diǎn)擴(kuò)散, 這會導(dǎo)致卷積效應(yīng)和原始圖像的退化, 因此難以對共聚焦弱熒光圖像執(zhí)行三維操作.對于較厚的組織, 隨著成像深度的增加, 共聚焦圖像的退化會加劇.因此, 有必要通過對圖像退化模型執(zhí)行去卷積復(fù)原來消除退化的干擾.圖像模糊可以表示為清晰圖像和點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)(Point Spread Function, PSF)的卷積加噪聲, 圖像復(fù)原則是通過去卷積方法估計(jì)清晰的原始圖像的操作.
在圖像去噪聲、去模糊這一類問題中, 最常用到的是全變分(Total Variation, TV)正則項(xiàng)[2], 這是因?yàn)門V 模型具有較為良好的邊緣保持特性[3].但是, TV 正則化方法適合傾向于分段常數(shù)解, 即它對細(xì)節(jié)和紋理的復(fù)原效果不佳, 相當(dāng)容易形成階梯效應(yīng).
截至目前, 關(guān)于模糊圖像去卷積方法的研究大部分都假定噪聲服從于高斯分布, 采取此類模型的優(yōu)勢是: 在所得的待優(yōu)化問題中, 會有二次項(xiàng)的引入, 這將便于求解.但在醫(yī)學(xué)或全息[4]成像、天文觀測等特定應(yīng)用領(lǐng)域中, 噪聲往往是服從泊松分布的, 此時若再采取高斯噪聲模型, 概率分布特征將不能得到有效的描述.
泊松圖像反卷積過程是具有病態(tài)特征的, 特別在低信噪比的情況下, 經(jīng)數(shù)次迭代后會產(chǎn)生高的估計(jì)噪聲.針對泊松噪聲污染下的模糊的去卷積問題, 目前最常用的方法是Richardson-Lucy 方法[5], 它是期望最大化算法的一個特例.但這種方法具有明顯的階梯效應(yīng).董文德等采用最優(yōu)化方法將自然圖像進(jìn)行訓(xùn)練, 得到專家場模型的所有濾波器, 使其具有更真實(shí)的概率分布特征, 以此實(shí)現(xiàn)對泊松噪聲污染模糊圖像的有效復(fù)原[6].Zhang 等提出了一種基于小波框架的正則化模型,以去除泊松噪聲而得到去模糊圖像[7].Liu 等在基于高階全變分的泊松圖像去卷積中引入了空間自適應(yīng)正則化參數(shù)[8].
為提高所得共聚焦圖像的復(fù)原精度和圖像采集速度, 本文將采用一種基于Hessian 矩陣范數(shù)的圖像復(fù)原正則化方法.
共聚焦圖像的噪聲主要來自兩個來源: 信號本身和成像系統(tǒng)顫振.泊松噪聲污染下的圖像退化模型可表示為:
其中, y 表示觀測圖像, f 表示原始圖像, A是線性模糊算子, P(Af)表示含參數(shù)的獨(dú)立同分布泊松隨機(jī)變量.
首先將傳統(tǒng)的全變分梯度方法從一維向二維進(jìn)行擴(kuò)展, 定義了用于計(jì)算二階導(dǎo)數(shù)的Hessian 算子為:
基于Hessian 矩陣范數(shù)正則化的圖像復(fù)原模型表示為:
所用的是F 范數(shù), 其具有凸性、尺度不變性、平移不變性和旋轉(zhuǎn)不變性, 因此, 可作為推廣的二階TV.
為解耦復(fù)雜的目標(biāo)函數(shù), 采取交替方向算法[9], 引入輔助變量 u1, u2作為變量 A f , f的近似, 實(shí)現(xiàn)將變量f分離的目的, 當(dāng)然, 同時也要補(bǔ)充一個二次項(xiàng), 用于懲罰 A f , f 和 u1, u2之間的差異.所得解耦模型:
其中, α >0表 示懲罰系數(shù)(拉格朗日參數(shù)), b1, b2為對偶變量.
模型所涉及的以上變量之間的關(guān)系如圖1 所示.
圖1 解耦的圖像復(fù)原模型
可將上述模型的求解分成如下3 個步驟:
(2)對于步驟(1)所得的 f(k), 可用來求解
對式(5)使用快速傅里葉變換, 在頻域中按照式(10)進(jìn)行 f(k)的求解.
其中, ( ·)*表示共軛運(yùn)算, F (·)表 示傅里葉變換, F-1(·)表示傅里葉逆變換.
對于式(6), 考慮代價函數(shù):
然后依次計(jì)算它的一階導(dǎo)數(shù):
二階導(dǎo)數(shù):
這是個凸優(yōu)化問題, 由式(12)為零得:
求出其非負(fù)根.又由于向量的最優(yōu)解可在其每個分量都取最優(yōu)解時得到, 通過組合若干個相互獨(dú)立的最優(yōu)化問題式(11), 可知式(6)的解為:
對于式(7)中的Hessian 矩陣范數(shù)正則化項(xiàng), 首先可將其等價表示為:
式(7)即改寫為:
其中, T 是用于約束解的范圍的凸集, τ =μ/α.
使用梯度投影方法[10]可得:
其中, PT是凸集T 上的正交投影算子.
投影到單位范數(shù)球 B∞,2上的算子可以定義為:
關(guān)于 ω的迭代過程如下:
while i < Maxiter(最大迭代次數(shù)) do
為了驗(yàn)證所提方法的有效性, 評估了通過不同懲罰項(xiàng)所獲得的圖像復(fù)原性能, 特別是, 對采用TV 模型、高階混合懲罰項(xiàng)[8]、Hessian 懲罰項(xiàng)的正則化進(jìn)行比較.考慮所提方法中的正則化參數(shù)μ, 它起到平衡圖像輪廓和細(xì)節(jié)的作用.通常來說, 增加其值往往會獲得更清晰的結(jié)果, 但也會放大噪音.在這種情況下, 我們采用有效的策略, 通過實(shí)驗(yàn)性地調(diào)節(jié)參數(shù)值, 以獲得最佳的視覺效果.
為了說明提出的方法在共聚焦圖像上去模糊的復(fù)原效果, 本文首先在仿真數(shù)據(jù)上進(jìn)行驗(yàn)證.仿真運(yùn)算的配置為Matlab r2014b, 2.60 GHz Intel Core i5-3230M CPU 以及4 GB 內(nèi)存.對于合成的共聚焦數(shù)據(jù)集, 參照了近期發(fā)布的軟件confocalGN[11], 模糊函數(shù)采用為方差為1 的高斯點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù).由于泊松噪聲是依賴于像素的灰度值的, 所以噪聲水平可以由圖形的最大灰度值來決定.泊松噪聲可以通過matlab 的內(nèi)置函數(shù)“poissrnd”來實(shí)現(xiàn).對于仿真數(shù)據(jù), 采用2 幅較為代表性的圖片(“woman”以及“cameraman”)進(jìn)行觀察.去模糊結(jié)果如圖2、圖3 和圖4 所示, 其中, 圖3 是圖2(c)、圖2(d)、圖2(e)對應(yīng)于圖2(a)中紅框區(qū)域的放大顯示.
圖2 “woman”仿真處理結(jié)果
圖3 局部放大視圖
圖4 “cameraman”仿真處理結(jié)果
此外, 為了對仿真結(jié)果作定量分析以估計(jì)算法的重建質(zhì)量, 本文采用峰值信噪比(PSNR)以及均方誤差(MSE)來度量, 圖2、圖4 中(c)、(d)、(e)的指標(biāo)對比如表1 所示.顯然, 在兩張經(jīng)典圖片上, 相比于TV模型、高階混合懲罰項(xiàng)方法這兩種參照, 本文所提方法復(fù)原結(jié)果的PSNR 更高, MSE 更低, 充分體現(xiàn)了其有效性.
表1 仿真處理結(jié)果的PSNR 以及MSE 指標(biāo)對比
建立的實(shí)驗(yàn)平臺[12]如圖5 所示, 它是用于熒光圖像重建的激光掃描共聚焦顯微鏡, 由激光光源、掃描裝置、共聚焦裝置和計(jì)算機(jī)控制的圖像處理系統(tǒng)組成.該平臺被用于比較所提出的Hessian 正則化模型和TV 模型、高階混合懲罰項(xiàng)方法.
圖5 激光掃描共聚焦顯微鏡實(shí)驗(yàn)平臺
本文選擇用平臺所觀察的掃描斷層圖像作為原始圖像, 采集的圖像一般會被泊松噪聲和散焦模糊所污染, 針對散焦模糊中的點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù), 我們采用熒光小球來進(jìn)行標(biāo)定.其具體步驟為: (1)通過實(shí)驗(yàn)獲得不同尺寸的熒光微珠圖像; (2)采用高斯點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)近似法[13]擬合熒光珠的分布; (3)估算并取點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)的平均值.我們注意到, 平均預(yù)處理不僅可以降低測量誤差, 而且可以減輕噪聲對點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)標(biāo)定的影響.
基于標(biāo)定的點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù), 分別使用TV 模型、高階混合懲罰項(xiàng)方法和所提出的Hessian 正則化模型來處理它, 并比較圖像復(fù)原結(jié)果, 如圖6 所示.其中, 圖6(a)與圖6(e)是不同視野內(nèi)所采集到的樣本圖像, 圖6(b)、圖6(c)、圖6(d)和圖6(f)、圖6(g)、圖6(h)分別表示使用TV 模型、高階混合懲罰項(xiàng)方法和所提出的Hessian模型對樣本1 和2 的去模糊結(jié)果.
圖6 共聚焦圖像去模糊結(jié)果
從圖6 明顯可以看出, 本文所提出的方法對模糊共聚焦圖像進(jìn)行了有效的復(fù)原, 圖像質(zhì)量有了顯著的提高.同時, 通過與其他復(fù)原方法作對比可知, 應(yīng)用本文方法得到的復(fù)原結(jié)果中含有較少的振鈴、噪聲等負(fù)面效應(yīng), 視覺效果相當(dāng)清晰, 這是明顯優(yōu)于其他方法所得復(fù)原結(jié)果的.
綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得, 在泊松噪聲污染的模糊共聚焦圖像復(fù)原方面, 本文提出的方法具有突出優(yōu)勢.
本文針對泊松噪聲下共聚焦圖像的去卷積問題,提出了一種基于Hessian 矩陣范數(shù)的正則化方法.與經(jīng)典的TV 正則化方法相比, 本文所提方法能夠在保留圖像細(xì)節(jié)的同時, 消除噪聲效應(yīng)和階梯效應(yīng), 得到更加優(yōu)良的復(fù)原結(jié)果, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了其有效性.
而且, 該方法不僅適用于共聚焦顯微鏡, 也能擴(kuò)展到其他的快速生物成像系統(tǒng).將來, 還可探討深度學(xué)習(xí)方法在模型中迭代參數(shù)選擇的應(yīng)用.