不同Hp分型消化性潰瘍患者血清IL-32、IL-33水平變化及意義 ???

涂宏飛 李莉 費(fèi)素娟

【摘要】目的 探討不同Hp分型消化性潰瘍（PU）患者血清IL-32、IL-33水平的變化及意義。方法 選取PU患者52例作為觀察組，慢性淺表性胃炎的患者54例作為對照組，蛋白免疫印跡法檢測2組Hp感染情況，ELISA定量檢測其血清IL-32、IL-33水平。比較各組Hp感染率及血清IL-32、IL-33水平。結(jié)果 PU組Hp陽性率（80.8%）高于對照組（63.0%），P < 0.05;PU組Ⅰ型Hp比例（61.9%）稍高于對照組（55.9%），但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。PU組血清IL-32水平為（95.29±17.79） pg/ml、IL-33水平為（72.42±16.19）pg/ml，均高于對照組的（84.10±15.17）pg/ml、（66.24±13.97）pg/ml，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05）。不同Hp分型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.001），其中Ⅰ型Hp感染組血清IL-32、IL-33水平均高于Ⅱ型Hp組及Hp陰性組，Ⅱ型Hp組血清IL-33水平高于Hp陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05）。不同類型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均> 0.05）。結(jié)論 PU患者血清IL-32、IL-33水平升高，其中Ⅰ型Hp感染PU患者升高更為明顯。

【關(guān)鍵詞】幽門螺桿菌;消化性潰瘍;毒力因子;白介素-32;白介素-33

【Abstract】Objective To investigate the changes and significance of serum IL-32 and IL-33 levels in peptic ulcer （PU） patients with different types of Helicobacter pylori （Hp）.? Methods Fifty-two patients with PU were selected in the observation group and 54 patients with chronic superficial gastritis in the control group. The Hp infection was detected by Western blot. The serum levels of IL-32 and IL-33 were quantitatively measured by ELISA. The infection rate of Hp and the serum levels of IL-32 and IL-33 were statistically compared between two groups. Results The positive rate of Hp in the observation group was 80.8%， significantly higher than 63.0% in the control group （P < 0.05）. The infection rate of typeⅠ Hp in the observation group was 61.9%， slightly higher than 55.9% in the control group （P > 0.05）. The serum levels of IL-32 and IL-33 in the observation group were （95.29±17.79）pg/ml and （72.42±16.19）pg/ml significantly higher compared with （84.10±15.17）pg/ml and （66.24±13.97）pg/ml in the control group （both P < 0.05）. The serum levels of IL-32 and IL-33 significantly differed in PU patients with different types of Hp （both P < 0.001. The serum levels of IL-32 and IL-33 in type Ⅰ Hp infection group were significantly higher than those in type Ⅱ Hp infection group and negative Hp group （all P < 0.05）. The serum levels of IL-32 and IL-33 did not significantly differ among patients with different types of PU （both P > 0.05）.? Conclusion The serum levels of IL-32 and IL-33 are increased in PU patients increased， especially in PU patients with type Ⅰ Hp infection.

【Key words】Helicobacter pylori;Peptic ulcer;Virulence factor;Interleukin-32;Interleukin-33

幽門螺桿菌（Hp）是人類感染率最高的細(xì)菌之一，大多數(shù)Hp感染者沒有任何臨床癥狀，但是長期感染Hp可能會(huì)引起胃腸道病變，包括慢性胃炎、消化性潰瘍（PU）、胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤（MALT）和胃癌等[1-3]。Hp產(chǎn)生的毒力因子在其致病過程中起著至關(guān)重要的作用，其中細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A（CagA）和空泡細(xì)胞毒素（VacA）已被證明是胃黏膜萎縮、腸上皮化生及炎癥反應(yīng)的“元兇”[4-5]。IL-32和IL-33是新近發(fā)現(xiàn)的炎癥因子，在多種免疫性疾病和慢性炎癥性疾病中發(fā)揮著重要的生物學(xué)作用[6-7]。然而，Hp相關(guān)PU與IL-32、IL-33之間的關(guān)系目前尚無報(bào)道，因此本研究就不同Hp分型PU患者血清IL-32、IL-33水平變化及意義展開研究。

對象與方法

一、研究對象

選取2018年10月至2019年7月于徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院住院治療的PU患者52例作為觀察組，其中男33例、女19例，年齡（52.92 ±14.85）歲;同時(shí)收集同期行胃腸鏡檢查診斷為慢性淺表性胃炎的患者54例作為對照組，其中男26例、女28例，年齡（54.61±11.71）歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有免疫系統(tǒng)疾病以及其他惡性腫瘤等疾病的患者;②嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全的患者;③處于炎癥狀態(tài)或合并其他感染性疾病的患者;④既往曾行Hp根除治療的患者。本研究經(jīng)徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審查通過，所有研究對象對本研究知情同意。2組性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均> 0.05），具有可比性。

二、研究方法

1.電子胃鏡及病理學(xué)檢查

采用Olympus公司電子胃鏡檢查，并經(jīng)病理學(xué)檢查確診為PU、慢性淺表性胃炎。

2.標(biāo)本采集與儲(chǔ)存

使用5 ml K2 EDTA抗凝采血管采集各組患者空腹靜脈血4 ml，使用離心機(jī)以3000 r/min離心血液15 min，分離血清，將血清置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

3. Hp及其分型檢測

將血清標(biāo)本取出，置于恒溫箱內(nèi)復(fù)溫至37℃，采用蛋白免疫印跡法對患者血清Hp抗體（UreA、UreB、CagA、VacA）進(jìn)行定性檢測。根據(jù)血清Hp抗體可將Hp分為Ⅰ型和Ⅱ型，Ⅰ型Hp是產(chǎn)細(xì)胞毒素的菌株，即CagA（+）和（或）VacA（+），Ure（+）;Ⅱ型Hp僅產(chǎn)生Ure而不產(chǎn)生毒素;CagA、VacA及Ure均陰性即為Hp陰性。Hp抗體分型檢測試劑盒來自深圳伯勞特生物制品有限公司，檢測由經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。

4.血清IL-32、IL-33濃度檢測

將血清標(biāo)本取出，置于恒溫箱內(nèi)復(fù)溫至37℃，ELISA定量檢測各組患者血清IL-32、IL-33水平。人IL ELISA試劑盒由上海將來實(shí)業(yè)股份有限公司提供。所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒的說明書進(jìn)行。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料以表示，2組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、PU組和對照組Hp陽性率比較

PU組Hp陽性率高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）;PU組Ⅰ型Hp比例稍高于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

二、PU組和對照組IL-32、IL-33水平比較

PU組血清IL-32、IL-33水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05），見表2。

三、不同Hp分型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較

不同Hp分型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.001），其中Ⅰ型HP感染組血清IL-32、IL-33水平均高于Ⅱ型Hp組及Hp陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05），Ⅱ型Hp組血清IL-32與Hp陰性組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），Ⅱ型Hp組血清IL-33水平高于Hp陰性組（P < 0.05），見表3。

四、不同類型PU患者血清IL-32、IL-33水平

不同類型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均> 0.05），見表4。

討論? ?PU在世界范圍內(nèi)具有較高發(fā)病率，Hp是導(dǎo)致其發(fā)病的主要因素之一[8]。Hp的定植、黏附以及毒力因子可損傷胃腸黏膜，促進(jìn)胃泌素及生長抑素的分泌，導(dǎo)致PU的發(fā)生[9]。我國Hp總體感染率高達(dá)50% ～ 80%，臨床研究證實(shí)CagA陽性Hp菌株的感染與更高級別的胃黏膜炎癥以及嚴(yán)重的萎縮性胃炎有關(guān)，并被認(rèn)為在胃癌的發(fā)生中起重要作用[10]。因此，Ⅰ型Hp可導(dǎo)致胃黏膜組織炎癥反應(yīng)，更容易誘導(dǎo)PU的發(fā)生發(fā)展。本研究中，PU組Hp感染率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與既往研究結(jié)論一致;而PU組Ⅰ型Hp比例雖稍高于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

大量的研究表明，炎癥免疫反應(yīng)是Hp感染黏膜損傷的重要病理生理機(jī)制，Hp感染可誘導(dǎo)宿主細(xì)胞及體液免疫應(yīng)答的激活，導(dǎo)致局部及全身的炎癥反應(yīng)。IL-32是最近發(fā)現(xiàn)的新型促炎因子，主要由自然殺傷（NK）細(xì)胞、單核細(xì)胞、上皮細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞分泌，與慢性鼻竇炎、HCV、HBV等多種感染性疾病相關(guān)，而IL-32與PU的關(guān)系尚無報(bào)道[11-12]。本研究中，PU組血清IL-32水平較對照組高，提示IL-32可能在PU的發(fā)病過程中起到一定的促進(jìn)作用。國內(nèi)外研究證實(shí)，CagA可激活NF-κB和MAPK信號(hào)傳導(dǎo)途徑，從而促進(jìn)IL-32的合成和分泌，血清IL-32水平升高又可正反饋性誘導(dǎo)TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β等炎癥因子釋放，從而加重局部炎癥反應(yīng)[13]。本研究中，Ⅰ型Hp感染PU患者血清IL-32水平明顯高于Ⅱ型Hp組及Hp陰性組，進(jìn)一步證實(shí)CagA是引起IL-32濃度升高的原因之一。

IL-33是IL-1超家族中的成員，主要來源于上皮細(xì)胞，可通過誘導(dǎo)Th2細(xì)胞來調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答[14]。研究證實(shí)，在白塞氏病、格雷夫斯病、多發(fā)性硬化、巨細(xì)胞病毒感染、慢性乙型肝炎等自身免疫性及慢性感染性疾病患者血清中IL-33水平顯著升高。IL-33還能促進(jìn)非小細(xì)胞性肺癌、乳腺癌、腎細(xì)胞癌和結(jié)直腸癌等惡性腫瘤的發(fā)展[15]。然而，目前尚未在Hp感染PU患者中評估血清IL-33水平。本研究顯示PU患者血清IL-33水平明顯高于對照組，且Ⅰ型Hp感染PU患者血清IL-33水平升高更為顯著，提示血清IL-33水平升高可能是PU的一個(gè)致病因素。

PU是臨床常見病，按病變部位可分為胃潰瘍、十二指腸潰瘍和復(fù)合性潰瘍。在本研究中，各型PU之間血清IL-32、IL-33水平無明顯差異。綜上所述，PU患者血清IL-32、IL-33水平升高，其中以Ⅰ型Hp比例升高為著。然而，本研究中PU組Ⅰ型Hp比例與對照組無明顯差異，但PU組的血清IL-32、IL-33的水平卻顯著高于對照組，考慮PU患者本身局部炎癥反應(yīng)較重，且Hp可能存在著CagA、VacA以外的其他途徑造成IL-32、IL-33等炎癥因子的活化，這需要后續(xù)進(jìn)一步研究證實(shí)。由此可見，檢測血清IL-32、IL-33水平有望對PU及Hp感染狀況的診斷提供參考，并為難治性、復(fù)發(fā)性PU的免疫治療提供新思路，但本研究納入的研究對象較少，有待更大規(guī)模的臨床研究加以驗(yàn)證。

參 考 文 獻(xiàn)

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（收稿日期：2019-11-12）

（本文編輯：楊江瑜）