李 歡, 陳娟娟, 祝成亮, 張平安
武漢大學人民醫(yī)院 檢驗科, 武漢 430060
原發(fā)性肝癌簡稱肝癌,起源于肝臟的上皮或間葉組織,是全球第六大最常見的腫瘤,也是第三大最常見的癌癥相關(guān)死亡原因[1],世界各地每年有70多萬人診斷為肝癌,其中很大一部分是肝細胞癌(HCC)。HBV感染是HCC主要的病因之一。早期診斷對改善HCC的治療和預后非常重要。生長分化因子(growth differentiation factor,GDF)15屬于TGFβ超家族成員,與腫瘤的轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系[2]。在正常生理條件下,一般表達于胎盤和前列腺中,其他器官中不常見,但在炎癥和惡性腫瘤等病理狀態(tài)時,累及的組織及血液中GDF15表達顯著升高[3]。AFP是肝癌診斷最常用的血清標志物,但單一使用AFP診斷時靈敏度和特異度都不夠理想,本研究將探討GDF15和AFP聯(lián)合檢測對HBV相關(guān)HCC診斷的臨床價值。
1.1 研究對象 收集2019年3月1日-2019年9月1日在本院就診的HBV相關(guān)HCC患者(HCC組)、慢性乙型肝炎(CHB)患者(CHB組)和健康體檢者(NC組)的臨床資料。納入標準:(1)所有HCC患者HBsAg均為陽性,HCC患者的診斷符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2017年版)》[4]中的診斷標準;(2)HCC患者未接受過介入治療或化療等;(3)CHB患者診斷后尚未接受治療;(4)所有對象臨床資料完整。排除標準:(1)排除HBV外其他肝炎病毒或重疊感染;(2)排除HCC以外的其他惡性腫瘤;(3)排除甲狀腺功能亢進、嚴重心血管病、糖尿病等疾?。?4)排除妊娠婦女。本研究經(jīng)武漢大學人民醫(yī)院醫(yī)學倫理學委員會批準(批號:2016K-C025),且所納入對象均簽訂知情同意書。
1.2 檢測方法 采集所有研究對象空腹6~8 h后的靜脈血5 ml,以轉(zhuǎn)速3500 r/min(離心半徑=16 cm)離心5 min,分離血清-80 ℃?zhèn)溆?。采用Siemens公司ADVIA CENTUAR XP全自動化學發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒檢測血清AFP 水平,參考區(qū)間為0~8.0 ng/ml;采用從R&D(Quantikine,R&D Systems,USA)購入的ELISA試劑盒(目錄號:DY957,DY008)檢測血清GDF15水平,參考檢測范圍為0~0.5 ng/ml。所有檢測均在試劑盒說明書規(guī)定的時間內(nèi)完成,且嚴格遵守實驗相關(guān)操作規(guī)程。
2.1 一般資料比較 共納入患者225例,其中HCC組97例,男56例,女41例;CHB組41例,男23例,女18例;NC組87例,男49例,女38例。三組研究對象在年齡(F=0.158,P=0.854)與性別分布(χ2=0.05,P=0.975)上的差異均無統(tǒng)計學意義(表1)。
2.2 GDF15和AFP檢測結(jié)果 HCC組的GDF15水平明顯高于CHB組和NC組(P值均<0.01);HCC組和CHB組的AFP水平均顯著高于NC組,且HCC組AFP水平顯著高于CHB組,差異均有統(tǒng)計學意義(P值均<0.01)(表2)。
表2 各組GDF15和AFP水平比較
注:與NC組相比,1)P<0.01;與CHB組相比,2)P<0.01
2.3 ROC曲線分析GDF15和AFP單獨或聯(lián)合檢測診斷HCC的價值 采用二元logistic回歸分析得到兩種指標聯(lián)合的回歸模型,進一步繪制GDF15和AFP單獨或聯(lián)合檢測的ROC曲線(圖1),分析結(jié)果見表3,GDF15聯(lián)合AFP的曲線下面積最大,為0.816,其次為GDF15(0.752),AFP最低(0.660)。AFP的特異度最高,GDF15聯(lián)合AFP的靈敏度和約登指數(shù)最高。
表1 研究對象一般資料
表3 GDF15、AFP單獨及聯(lián)合檢測診斷HCC的ROC曲線分析結(jié)果
圖1GDF15、AFP單獨及聯(lián)合檢測診斷HCC的ROC曲線
HCC診斷的腫瘤標志物較多,常見的有AFP、α-L-巖藻苷酶和癌胚抗原等[5]。單個標志物對診斷HCC的靈敏度和特異度往往不夠理想,而多指標聯(lián)合檢測可以明顯提高診斷效能[6-8]。本研究HCC組的GDF15和AFP水平均顯著高于CHB組和NC組,提示GDF15和AFP可能是HCC診斷的有效指標,且GDF15診斷HCC的曲線下面積大于0.7,高于AFP,說明GDF15對HCC的診斷效能優(yōu)于AFP。
GDF15,又稱巨噬細胞抑制因子1,能抑制巨噬細胞產(chǎn)生TNFα,參與組織損傷或疾病時的感染、纖維化和凋亡途徑,在多種腫瘤中有高表達的現(xiàn)象,比如結(jié)直腸癌[9]、胃癌[10]等。目前,多項研究發(fā)現(xiàn)GDF15既可作為抑癌因子,也可作為致癌因子,與腫瘤類型相關(guān)。在膠質(zhì)母細胞瘤細胞中,GDF15具有抗腫瘤活性[11];在人結(jié)直腸細胞中,GDF15通過控制細胞凋亡而發(fā)揮抗腫瘤蛋白的作用[12];而在口腔鱗狀細胞癌中,GDF15的表達與其惡性程度呈正相關(guān),GDF15能促進腫瘤細胞的增殖和集落形成[13];Wang等[14]的實驗數(shù)據(jù)證明GDF15能促進HepG 2細胞的存活、侵襲、遷移和血管生成,并認為GDF15可能是肝癌的危險因素,可作為肝癌診斷的血清標志物。本研究的數(shù)據(jù)顯示HCC組GDF15水平顯著高于CHB組和NC組,與Liu等[15]的研究結(jié)果一致。同時,ROC曲線分析顯示GDF15診斷HBV相關(guān)HCC的曲線下面積為0.752,靈敏度為74.0%,特異度為68.3%,在Liu等[15]研究中,GDF15診斷HCC的曲線下面積為0.843,靈敏度為86.8%,特異度為72.8%,較高于本文結(jié)果,可能是由于取樣和地域等原因,但這些均在一定程度上證實GDF15可作為HCC診斷的血清標志物。
AFP是最常見的HCC診斷血清標志物,主要由胎兒肝細胞及卵黃囊合成,血清正常含量<25 μg/L,當細胞癌變時,其水平會顯著升高[16]。本研究HCC組的AFP水平顯著高于CHB組和NC組,與理論基礎(chǔ)相符。但除了HCC,AFP在慢性肝炎、肝硬化等其他肝病中也有升高的現(xiàn)象,可能會導致漏診和誤診。在朱慧婧等[17]研究中AFP診斷HCC的靈敏度為58.57%,特異度為78.71%,與本研究結(jié)果有部分差異,原因可能是抽樣量不同、采用的測定儀器和試劑種類或地域差異等。本研究將GDF15和AFP聯(lián)合作ROC曲線,結(jié)果顯示曲線下面積為0.816,大于單項檢測結(jié)果,故認為聯(lián)合檢測的性能優(yōu)于單項指標檢測。
綜上所述,GDF15和AFP均可作為HCC診斷的有效指標,且聯(lián)合檢測可以進一步提高HCC的診斷效能,對臨床診斷有重要的參考價值。