陳濤　倪建秀　丁春暉　陳桂芳　李文杰

摘 要：動物源性食品中藥物殘留問題日益突出，傳統(tǒng)檢測方法存在耗時長、不穩(wěn)定等問題，而QuEChERS方法具有簡便、快速等多種優(yōu)勢，可用于動物源性食品中多種藥物殘留的分析。本文綜述了近些年應(yīng)用QuEChERS方法檢測動物源性食品中藥物殘留的研究進(jìn)展，以期為研究相關(guān)檢測方法和標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

關(guān)鍵詞：動物源性食品;藥物殘留;QuEChERS方法

Abstract：The drug residues in foods of animal origin have become increasingly prominent and the traditional detection methods have the problems of time-consuming and unstable， while the QuEChERS method has shown many advantages， such as simple and fast， which has been proved to be applicable for the analysis of multiple drug residues in foods of animal origin. In this paper， the research progress for determining drug residues in foods of animal origin by QuEChERS in recent years is reviewed， in order to provide references for detection methods and standards.

Key words：Foods of animal origin; Drug residues; QuEChERS

中圖分類號：TS207.5

QuEChERS方法最早是在2003年由美國農(nóng)業(yè)部的Anastassiades等人提出，旨在替代傳統(tǒng)的蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留檢測前處理方法。QuEChERS方法是應(yīng)用分散固相萃?。╠-SPE）技術(shù)，將乙腈作為主要提取溶劑，將N-丙基乙二胺（PSA）、C18等具有吸附作用的材料作為凈化劑的一種樣品前處理方法。與固相萃取等傳統(tǒng)方法相比，QuEChERS方法具有速度快、操作簡便、成本低、效率高、耐用性強和安全的特點。

目前，我國畜禽以及水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中可能存在殘留風(fēng)險的藥物有400種，因此迫切需要建立高效簡便而又穩(wěn)定可靠的檢測方法，QuEChERS方法是解決此問題的一個具有良好發(fā)展前景的選擇。與蔬菜水果的高含水量、低脂肪的特性相比，來源于動物的食品通常具有高蛋白和高脂肪的特性，基質(zhì)中干擾物多，同時藥物種類眾多、性質(zhì)各異，因此應(yīng)用QuEChERS方法檢測動物源性食品中藥物殘留還面臨諸多挑戰(zhàn)。本文對近年來在動物源性食品中藥物殘留檢測方面應(yīng)用QuEChERS方法的相關(guān)研究進(jìn)行綜述，為進(jìn)一步研究動物源性食品中藥物殘留檢測方法提供有益參考。

1 QuEChERS方法在動物源性食品中藥物殘留檢測中的應(yīng)用

獸藥可以預(yù)防和治療動物疾病，在畜禽養(yǎng)殖中廣泛使用，其在動物性食品中殘留會給食品安全帶來較大風(fēng)險。使用QuEChERS方法檢測動物組織中獸藥殘留的公開報道最早見于2005年，F(xiàn)agerquist等[1]使用QuEChERS方法檢測了牛的腎臟中β內(nèi)酰胺類抗生素殘留，水和乙腈被作為提取試劑，C18作為吸附劑用于去除脂肪，然后結(jié)合液相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜（LC-MS/MS）對提取物進(jìn)行分析。Pérez-Burgos等[2]

發(fā)現(xiàn)，牛肉樣品經(jīng)QuEChERS方法提取后，再加入C18、PSA和MgSO4進(jìn)行d-SPE吸附凈化，最后使用LC-MS/MS對被檢樣品中的頭孢菌素類抗生素進(jìn)行分析，檢測結(jié)果顯示，與傳統(tǒng)SPE方法相比，新方法具有較高的靈敏度，能夠滿足歐盟相關(guān)法規(guī)的要求。Machado等人[3]采用QuEChERS-HPLC-DAD方法檢測雞胸肉中磺胺類藥物，使用緩沖液提取，并在上機分析前進(jìn)行濃縮，可獲得高于70%的回收率，且方法定量限低于我國農(nóng)業(yè)部235號公告規(guī)定的殘留限量100 μg·kg-1。

Pérez H等[4]使用Z-Sep+作為吸附劑，采用HPLC/FLD進(jìn)行檢測，可以獲得低于歐盟MRL的定量限，但部分磺胺類藥物的回收率明顯低于Machado等人的方法。Lopes等[5]研究采用QuEChERS-LC-MS/MS方法同時檢測雞胸肉中包括抗生素和驅(qū)蟲劑在內(nèi)的20種獸藥殘留，可在8.5 min內(nèi)獲得結(jié)果。

抗寄生蟲類藥物在畜禽養(yǎng)殖中也得到普遍使用，其殘留動物源性食品中也會給人體健康帶來巨大危害，因此需要納入監(jiān)管和檢測的范圍。Kinsella等[6]使用改良后的QuEChERS方法檢測了羊肉和羊奶中驅(qū)蟲劑莫奈太爾及其砜衍生物，方法中增加了一步富集過程以提高靈敏度，樣品經(jīng)超高效液相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）分析，兩種目標(biāo)物的回收率在108%～109%，且在13 min內(nèi)即可獲得良好的色譜分離效果。

違禁飼料添加劑的殘留檢測也可采用QuEChERS方法。巴西研究團(tuán)隊采用QuEChERS-LC-MS/MS方法，只需4.5 min就可以完成豬肉中萊克多巴胺的定量檢測，與樣品經(jīng)液液萃取再采用GC-MS或LC-MS進(jìn)行分析的傳統(tǒng)方法相比，檢測所需時間大幅減少，該方法具有檢測時間短、回收率高（70%～110%）的特點，通過采用酸化乙腈（0.1%乙酸）進(jìn)行提取，檢測限可低至1.5 μg·kg-1[7]。Xiong等[8]采用類似的QuEChERS-LC-MS/MS方法對牛肉和羊肉中包括萊克多巴胺在內(nèi)的10種β-受體激動劑進(jìn)行檢測，但在d-SPE中使用DVB-NVP-SO3Na材料作為吸附劑，同時增加了預(yù)濃縮步驟，提高了方法靈敏度，可使檢測限低至0.3 μg·kg-1。

QuEChERS方法最初只在蔬菜和水果農(nóng)藥殘留檢測中應(yīng)用，但隨著技術(shù)的發(fā)展，目前該法已被成功用于動物源性食品中農(nóng)藥殘留的檢測。如羊肉中有機氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留[9]、牛肉和牛脂肪中多種農(nóng)藥殘留的檢測都應(yīng)用了QuEChERS方法，其中脂類樣品需要加入正己烷進(jìn)行去脂，然后經(jīng)MS或者ECD檢測器分析，回收率在70%～129%，RSD<20%[10]。除了有機氯類農(nóng)藥，多氯聯(lián)苯是另一類難以分解且對肉類會造成污染的有機物。一種經(jīng)過優(yōu)化的QuEChERS-GC-MS方法被成功用于分析肉類產(chǎn)品中的多氯聯(lián)苯類農(nóng)藥殘留，該方法采用超聲提取以提高目標(biāo)物提取效率，可以使LOQs達(dá)到1.3 ng·g-1以下，同時可獲得較高的回收率，是一種成本低、環(huán)境友好的檢測多氯聯(lián)苯類農(nóng)藥殘留的分析方法[11]。

2 QuEChERS方法中提取溶劑和凈化劑的選擇

提取溶劑和凈化劑的選擇是QuEChERS方法的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與丙酮、乙酸乙酯等溶劑相比，用乙腈作提取溶劑，提取產(chǎn)物干擾成分較少，且通過鹽析可以與水相輕松分離，同時乙腈的提取產(chǎn)物可直接用于氣相和液相色譜分析，因此乙腈是QuEChERS方法中常用提取溶劑。而乙腈與水相混合或加入一定量的酸也是目前常采用的提取溶劑，但隨著溶劑體積的增加，被分析物的回收率會趨向增加至一定水平，因此提取溶劑的體積通常需要優(yōu)化。含有乙酸的乙腈可以提高豬肉中萊克多巴胺[7]和雞肉中磺胺類藥物[3]的回收率，而使用添加甲酸的乙腈溶液可以提高魚肉中喹諾酮類藥物的回收率[12]。在樣品凈化環(huán)節(jié)，吸附劑的選擇必須根據(jù)被分析物和樣品基質(zhì)的特性。Z-Sep、Z-Sep+等新型吸附劑與C18、PSA混合使用，可以有效提高肉類、蛋和奶等高脂肪樣品的凈化效率。納米技術(shù)也在QuEChERS方法中得到應(yīng)用，有研究在類固醇類藥物殘留分析中將ZnO納米顆粒和PSA作為吸附劑用于凈化牛奶和蜂蜜樣品，取得了良好的回收率[13]。

3 結(jié)語

與傳統(tǒng)的固相萃取等方法相比，QuEChERS方法具有快速、高效、環(huán)境友好、穩(wěn)定耐用等特點，已被用于動物源性食品中包括抗生素、農(nóng)藥和違禁藥物等在內(nèi)的多種藥物殘留的分析，隨著QuEChERS方法的進(jìn)一步發(fā)展和改良，未來將成為動物源性食品中藥物殘留分析領(lǐng)域最為簡便、常用的方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]Fagerquist C K，Lightfield A R，Lehotay S J.Confirmatory and quantitative analysis of β-lactam antibiotics in bovine kidney tissue by dispersive solid-phase extraction and liquid chromatography？ Tandem mass spectrometry[J].Analytical Chemistry，2005，77（5）：1473-1482.

[2]Pérez-Burgos R，Grzelak E M，Gokce G，et al.Quechers methodologies as an alternative to solid phase extraction （SPE） for the determination and characterization of residues of cephalosporins in beef muscle using LC–MS/MS[J].Journal of Chromatography B，2012，899：57-65.

[3]Machado S C，Landin-Silva M，Maia P P，et al.QuEChERS-HPLC-DAD method for sulphonamides in chicken breast[J].Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences，2013，49（1）：155.

[4]Pérez H，F(xiàn)ernandoJ，Manzanares A N，et al. Method optimization and validation for the determination of eight sulfonamides in chicken muscle and eggs by modified QuEChERS and liquid chromatography with fuorescence detection[J].Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis，2016，124：261-266.

[5]Lopes R P，Reyes R C，González RR，et al.Development and validation of a multiclass method for the determination of veterinary drug residues in chicken by ultra high performance liquidchromatography–tandem mass spectrometry[J].Talanta，2012，89：201-208.

[6]Kinsella B，Byrne P，Cantwell H，et al.Determination of the new anthelmintic monepantel and its sulfone metabolite in milk and muscleusing a UHPLC–MS/MS and QuEChERS method[J].Journal of Chromatography B Analytical Technologies in the Biomedical & life Science，2011，879（31）：3707-3713.

[7]Valese A C，Oliveira G A P，Kleemann C R.，et al.A QuEChERS/LC–MS method for the analysis of ractopamine in pork[J].Journal of Food Composition and Analysis，2016，47：38-44.

[8]Xiong L，Gao Y Q，Li W H，et al.Simple and sensitive monitoring of β2-agonist residues in meat by liquid chromatography-tandem mass spectrometryusing a QuEChERS with preconcentration as the sample treatment[J]. Meat Science，2015，105：96-107.

[9]Naik R H，Paramasivam M，Chandrasekaran S.QuEChERS method for determination of some chlorinated hydrocarbon and synthetic pyrethroid residues in sheep meat by gas chromatography-electron capture detector[J].Madras Agricultural Journal，2011，98（7-9）：282-285.

[10]Sartarelli N C，Macedo A N，Sousa J P，et al.Determination of chlorfenvinphos， fpronil， and cypermethrin residues in meat and bovine fat using QuEChERS method and gas chromatography-mass spectrometry[J].Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies，2012，35（13）：1895-1908.

[11]Kuzukiran O，F(xiàn)ilaziA.Determination of selected polychlorinated biphenyl residues in meat products by QuEChERS method coupled with gas chromatography mass spectrometry[J].Food Analytical Methods，2016，9（7）：1867-1875.

[12]Manuel L A，Ana MG C，Carmen C B，et al.Determination of quinolones in fish by ultra-high performance liquid chromatography with fuorescence detection using QuEChERS as sample treatment[J].Food Control，2015，50：864-868.

[13]Liu H，Lin T，Cheng X，et al.Simultaneous determination of anabolic steroids and β-agonists in milk by QuEChERS and ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J].Journal of Chromatography B，2017，1043：176-186.