張文穎 閔水發(fā) 黃芳

摘 要： 應(yīng)用不同濃度的美國白蛾核型多角體病毒感染美國白蛾3～4齡幼蟲，試驗(yàn)結(jié)果表明：施藥后3 d試蟲開始死亡，10 d死亡率達(dá)到50%，13～14 d后，試蟲死亡率達(dá)到高峰期，15 d后，除3×106 PIB·mL-1處理濃度外，其他各處理試蟲校正死亡率均高于90.28%，防治效果顯著。綜合防效和成本，生產(chǎn)中建議使用核型多角體病毒防治美國白蛾時(shí)選擇5×106 PIB·mL-1及以上濃度。

關(guān)鍵詞： 美國白蛾;核型多角體病毒;藥效試驗(yàn)

中圖分類號(hào)：S763.305 ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： ? 文章編號(hào)：1004-3020（2020）06-0023-04

Abstract： The efficacy test of Hyphantria cunea Nuclear Polyhedrosis virus（HcNPV） against the larvae of Hyphantria cunea in the 3rd or 4th instars was made.The result showed that a small amount of death Hyphantria cunea was found after 3 days，the worm mortality attained 50% after 10 days，after 14 days appeared death peak，especially 3×106 PIB·mL-1，cumulative mortality rate of the other treatments over 90.28% after 15 days，control efficiency was remarkable.In production practice，comprehensive control effect and cost，it is suggested that the concentration of 5×106 PIB·mL-1 and above should be selected when using Hyphantria cunea Nuclear Polyhedrosis Virus to control Hyphantria cunea.

Key words： Hyphantria cunea;HcNPV;efficacy test

美國白蛾Hyphantria cunea屬于鱗翅目Lepidoptera燈蛾科Arctiidae白蛾屬Hyphantria，原產(chǎn)于北美洲，廣泛分布在北緯19～55°的廣大地區(qū)。中國1979年首次在遼寧丹東市發(fā)現(xiàn)美國白蛾，目前已在河北、山東、安徽、上海、天津、北京、內(nèi)蒙古、遼寧、吉林、河南、江蘇等地嚴(yán)重發(fā)生，造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失和生態(tài)損失，是目前國內(nèi)外最具有危險(xiǎn)性的入侵物種之一。湖北省2016年發(fā)現(xiàn)美國白蛾入侵，出現(xiàn)7個(gè)疫區(qū)，2017年擴(kuò)散蔓延至11個(gè)疫區(qū)，2018年為10個(gè)疫區(qū)。

近年來，國內(nèi)美國白蛾發(fā)生區(qū)主要使用大量化學(xué)農(nóng)藥防治，導(dǎo)致害蟲的抗藥性逐年增強(qiáng)，環(huán)境安全受到嚴(yán)重挑戰(zhàn)[1]。湖北省是美國白蛾新發(fā)生區(qū)，為了防止化學(xué)農(nóng)藥帶來的環(huán)境污染等系列問題，利用生物防治害蟲就成為一個(gè)研究重點(diǎn)。核型多角體病毒HcNPV是一種調(diào)控美國白蛾種群密度的理想生物制劑[2]，對(duì)美國白蛾的防治具有高效、低毒、無污染、持續(xù)控害的效果。美國白蛾在幼蟲期具有群集取食和吐絲結(jié)網(wǎng)習(xí)性，利用此習(xí)性，用核型多角體病毒制劑噴灑幼蟲網(wǎng)幕，造成幼蟲染毒，隨著染毒蟲體的爬行使區(qū)域內(nèi)幼蟲間病毒病流行，進(jìn)而殺死幼蟲。為了探索核型多角病毒在湖北省美國白蛾發(fā)生區(qū)的林間防效，在該省大悟縣開展了林間防治試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)設(shè)在湖北省孝感市大悟縣國有娘娘頂林場(chǎng)，位于大悟縣北部鄂豫兩省三縣交界之處，最高海拔812 m，針闊混交次生林，主要樹種有懸鈴木、楓楊、楊樹、桑樹、構(gòu)樹、梨樹、馬尾松、杉木等，森林覆蓋率90%以上，郁閉度0.85。試驗(yàn)前調(diào)查美國白蛾主要為害楓楊、桑樹、懸鈴木等闊葉樹，有蟲株率55%～70%，蟲口密度500～2 000頭·株-1，以3～4齡幼蟲為主，屬于中度危害。本試驗(yàn)選擇美國白蛾發(fā)生嚴(yán)重地國有娘娘頂林場(chǎng)河灘地作為試驗(yàn)點(diǎn)，試驗(yàn)樹種為楓楊林，樹齡3～4 a，樹高3～5 m，冠幅1～1.5 m。

1.2 試驗(yàn)材料

供試藥劑為美國白蛾核型多角體病毒，由中國林業(yè)科學(xué)研究院森林生態(tài)環(huán)境與保護(hù)研究所提供，原液濃度為8×109 PIB·mL-1。試蟲為林間采集的第二代美國白蛾3～4齡幼蟲。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法

試驗(yàn)設(shè)5個(gè)藥劑處理、1個(gè)清水對(duì)照。藥劑處理濃度分別為3×106 PIB·mL-1、5×106 PIB·mL-1、3×107 PIB·mL-1、5×107 PIB·mL-1、1×108 PIB·mL-1，每個(gè)處理3次重復(fù)，噴等量清水為對(duì)照（CK）。于2018年7月下旬，第二代美國白蛾發(fā)生期間，采用噴霧法，用上述5種病毒處理濃度懸液噴灑新鮮的楓楊Pterocarya stenoptera枝葉，以全部葉片均勻著藥并開始下滴為準(zhǔn)，待葉片晾干后用細(xì)密紗網(wǎng)罩住，再將每網(wǎng)接入40頭美國白蛾幼蟲。藥后蟲口調(diào)查自施藥后1 d起每隔1 d進(jìn)行1次，調(diào)查至藥后第9 d，以后每天進(jìn)行1次，調(diào)查至第15 d，共調(diào)查11次。用常規(guī)數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法結(jié)合SPSS 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)算蟲口減退率、校正死亡率，求出病毒濃度與校正死亡率關(guān)系方程。

蟲口減退率（%）=

防治前蟲口密度-防治后蟲口密度防治前蟲口密度×100

校正死亡率（%）=

處理組蟲口減退率-對(duì)照組蟲口減退率1-對(duì)照組蟲口減退率×100

2 結(jié)果與分析

2.1 噴施病毒后不同時(shí)間幼蟲感病癥狀及死亡情況

噴施病毒后的第1，3，5，7，9，10，11，12，13，14，15 d分別對(duì)各處理紗網(wǎng)內(nèi)的幼蟲感病及死亡情況進(jìn)行調(diào)查。由表1看出，噴施病毒后3 d開始，出現(xiàn)試蟲死亡現(xiàn)象，10 d后，除3×106處理濃度外，其他各處理試蟲累積死亡率均達(dá)到50%以上，13～14 d后，試蟲死亡逐漸達(dá)到高峰期，各處理試蟲累積死亡率均高于89.89%，其中處理1×108 PIB·mL-1的累積死亡率達(dá)到100%，且各處理的試蟲累積死亡率均顯著高于對(duì)照（見表1），15 d后各處理試蟲累積死亡率均高于91.01%，且呈現(xiàn)隨處理天數(shù)延長而遞增的態(tài)勢(shì)。從試蟲的感病癥狀來看，噴施病毒后幼蟲食欲減退明顯，生理代謝紊亂，體毛顯長（見圖1），后期蟲體反應(yīng)呆滯，行動(dòng)遲緩，部分體節(jié)腫大伸長，體色逐漸變黑褐色，體壁變薄，一觸即破（見圖2），有淺褐色膿液流出（見圖3），幼蟲死亡時(shí)以腹足抓緊寄主樹枝葉等呈倒掛狀，下垂死亡，蟲體逐漸腐爛，即將斷開（見圖4）。

2.2 噴施病毒后不同濃度HcNPV的防治效果

從噴施HcNPV的防治效果看，噴灑濃度為106 PIB·mL-1的兩處理其試蟲校正死亡率自第9 d起顯著高于對(duì)照，噴灑濃度為107 PIB·mL-1的兩處理其試蟲校正死亡率自第5 d起顯著高于對(duì)照（見表2）。不同施藥處理間，106 PIB·mL-1的兩處理其試蟲校正死亡率在同一調(diào)查時(shí)間無顯著差異，施藥濃度為5×107 PIB·mL-1處理自第9 d起防治效果均顯著高于3×106 PIB·mL-1、5×106 PIB·mL-1、3×107 PIB·mL-1三個(gè)濃度的，而當(dāng)施藥濃度增大為1×108 PIB·mL-1時(shí)，第9、11、12、13 d的防治效果顯著高于其他四個(gè)濃度的，說明隨著HcNPV濃度的增大，試蟲的感病時(shí)間縮短，防治效果增加。使用SPSS軟件計(jì)算感染濃度與試蟲校正死亡率獲得的回歸方程見表3，由表2和表3均可看出，試蟲校正死亡率與感染濃度呈正相關(guān)，從表3還可以看出，除1×108 PIB·mL-1外，隨著感染濃度的增加，試蟲校正死亡率與處理濃度之間的R2增大，因此，在生產(chǎn)實(shí)踐中，結(jié)合防效和成本，建議使用核型多角體病毒防治美國白蛾時(shí)選擇5×106 PIB·mL-1及以上濃度。

2.3 不同齡期幼蟲對(duì)HcNPV的敏感性及致死率調(diào)查 ?于2018年5月下旬，第一代美國白蛾發(fā)生期間，用1.8×107 PIB·mL-1的HcNPV分別感染美國白蛾3齡、4齡幼蟲，統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，在感染病毒后的前7 d，4齡幼蟲的死亡率高于3齡幼蟲的，這可能與4齡幼蟲已破除網(wǎng)幕且其爬行能力強(qiáng)、取食量較大，3齡幼蟲則是在網(wǎng)幕中取食，網(wǎng)幕具有一定的保護(hù)作用，在一定程度上影響了藥劑的滲入有關(guān)。自第9 d起，3齡幼蟲的死亡率則高于4齡幼蟲的，呈現(xiàn)出死亡率與蟲齡負(fù)相關(guān)態(tài)勢(shì)，幼蟲死亡率隨著蟲齡的增大而減小。15 d的校正死亡率各齡期均高于95.33%（見表4）。

3 結(jié)論與討論

美國白蛾核型多角體病毒是一種調(diào)控美國白蛾種群密度的理想生物制劑，具有較強(qiáng)的專一性，本次林間藥效試驗(yàn)結(jié)果表明，在噴灑HcNPV的濃度為5×106 PIB·mL-1以上時(shí)，15 d后各處理的防治效果均達(dá)到90.28%以上，說明應(yīng)用HcNPV防治美國白蛾防效顯著。同時(shí)要指出的是，雖然HcNPV對(duì)美國白蛾的最終防效高，但見效緩慢，前9 d藥效較低。相關(guān)研究表明，利用Bt和HcNPV復(fù)配可使美國白蛾提前2～3 d發(fā)病[4]，LT50縮短0.5～2.1 d[5]，因此，在實(shí)際應(yīng)用過程中，建議將Bt和HcNPV復(fù)配，充分發(fā)揮Bt的速效性和HcNPV的持效性，達(dá)到對(duì)害蟲的高效、持久防治。

HcNPV對(duì)不同齡期的美國白蛾幼蟲均具有致病效果，致病敏感性的大體趨勢(shì)為隨蟲齡的增加而降低，幼蟲的發(fā)病時(shí)間隨蟲齡的增加而增加。同一齡期幼蟲，死亡時(shí)間隨HcNPV濃度的增大而縮短。這與很多研究者的結(jié)論相同[1，2]。

HcNPV不僅對(duì)當(dāng)代供試美國白蛾幼蟲防治效果顯著，還可將病毒有效的傳遞到子代[6，7]使美國白蛾種群長期處于“亞健康”狀態(tài)，當(dāng)環(huán)境條件成熟時(shí)，病毒就可在種群內(nèi)流行致使美國白蛾種群數(shù)量急劇下降[8]，有利于節(jié)約美國白蛾除治成本。化學(xué)防治帶來的抗藥性、環(huán)境污染等問題已經(jīng)受到各國的廣泛關(guān)注，包括HcNPV在內(nèi)的生物防治技術(shù)對(duì)人畜無害，且不造成環(huán)境污染問題，已成為有害生物防控的新型技術(shù)和趨勢(shì)。

參 考 文 獻(xiàn)

[1]吳戈宇，劉玉書，李銀，等.美國白蛾核型多角體病毒毒力的生物測(cè)定[J]華中昆蟲研究（第五卷），中國會(huì)議，2018-11-03.

[2]趙海燕，王艷士，修玉義，等.美國白蛾核型多交替病毒林間藥效試驗(yàn)[J]中國森林病蟲，2012，31（1）：38-39.

[3]鄭桂玲，周洪旭，耿以龍，等.美國白蛾核型多角體病毒青島分離株的生物活性測(cè)定[J]青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，28（2）：107-109.

[4]李紅靜，王西南，武海衛(wèi)，等.應(yīng)用美國白蛾核型多角體病毒防治美國白蛾效果評(píng)價(jià)[J]山東林業(yè)科技，2013（2）：80-83.

[5]段彥麗，陶萬強(qiáng)，曲良建，等.HcNPV和Bt復(fù)配對(duì)美國白蛾的致病性[J]中國生物防治，2008，24（3）：223-238.

[6]王金梅，范克勝，王俊洲，等.利用核型多角體病毒防治美國白蛾的試驗(yàn)[J]中國園藝文摘，2018（6）：51-52.

[7]肖放，張文學(xué)，王昶遠(yuǎn)，等.病毒和細(xì)菌類生物制劑防治美國白蛾試驗(yàn)[J]中國森林病蟲害，2005（24）3：34-36.

[8]段彥麗，曲良建，王玉珠，等.美國白蛾核型多角體病毒傳播途徑及對(duì)寄主的持續(xù)作用[J]林業(yè)科學(xué)，2009（45）6：83-86.

（責(zé)任編輯：唐 嵐）