一種產(chǎn)后小鼠束縛應(yīng)激模型的造模方法以及束縛裝置的制作

陳漫漫，高鵬飛

(復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院，上海 201500)

在醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中，小鼠屬于最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之一，常需在非麻醉狀態(tài)下對(duì)小鼠進(jìn)行保定從而進(jìn)行采血、注射等操作[1]。由于小鼠掙扎啃咬會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員安全造成威脅，徒手操作不便，必須借助固定裝置和輔助手段加以固定，從而保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員安全，縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間，提高實(shí)驗(yàn)效率[2]。目前，運(yùn)用最多的是使用金屬或有機(jī)玻璃制成的固定器，利用小鼠本能進(jìn)洞的思維[3]，使得小鼠主動(dòng)進(jìn)入固定器中(圖1A)。這些商品化的固定器價(jià)格較貴，如果對(duì)大批量實(shí)驗(yàn)鼠使用固定器，必耗費(fèi)較多金錢(qián)，并且讓實(shí)驗(yàn)鼠主動(dòng)進(jìn)入固定器的過(guò)程困難，效率低下。另有其他文獻(xiàn)報(bào)道的自制新型小鼠固定裝置，但是制作過(guò)程較為復(fù)雜[4]。有研究人員使用礦泉水瓶制作簡(jiǎn)易小鼠固定裝置，但是瓶體質(zhì)地較軟，實(shí)驗(yàn)鼠容易掙脫[5]。亦有些裝置體積較大不易存放且不易清洗[6]。鑒于上述小鼠固定器的不足，本文提出一種實(shí)驗(yàn)鼠固定器的簡(jiǎn)易制作方法，實(shí)驗(yàn)人員自制方便，大批量應(yīng)用而不需花費(fèi)過(guò)多錢(qián)財(cái)，有助于節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本，提高動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效率。

作者課題組從事應(yīng)激的中醫(yī)藥治療研究。產(chǎn)后應(yīng)激不但威脅產(chǎn)婦的身心健康并且影響嬰兒的生命安全。有關(guān)研究報(bào)道[7]孕期及產(chǎn)后應(yīng)激會(huì)造成子代的下丘腦-垂體-腎上腺軸調(diào)節(jié)作用紊亂，導(dǎo)致子代出現(xiàn)異常的精神行為。為對(duì)產(chǎn)后母鼠應(yīng)激疾病進(jìn)行研究，自制簡(jiǎn)易的小鼠束縛裝置，采用束縛應(yīng)激方式，制造小鼠產(chǎn)后束縛應(yīng)激模型。該模型在本課題組兩項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目里多次運(yùn)用，實(shí)驗(yàn)證明模型具有穩(wěn)定性和可重復(fù)性，可用于產(chǎn)后應(yīng)激疾病的相關(guān)研究?，F(xiàn)對(duì)模型以及造模束縛裝置進(jìn)行介紹。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

從上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物【SCXK(滬) 2013-0016】有限公司購(gòu)入60只SPF級(jí)ICR小鼠，雌雄各半。6周齡雌鼠，雌性體重(23.1 ± 1.7)g；7周齡雄鼠，雄性體重(27.2 ± 1.8)g，全部小鼠安置在上海公共衛(wèi)生臨床中心的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室【SYXK(滬) 2015-0008】。動(dòng)物房溫度(21 ± 1)℃，房?jī)?nèi)照明從早上7點(diǎn)到晚上7點(diǎn)，自由飲水與攝食。本研究所有的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)根據(jù)美國(guó)國(guó)立健康衛(wèi)生指導(dǎo)且經(jīng)復(fù)旦大學(xué)公共衛(wèi)生臨床中心動(dòng)物護(hù)理與使用委員會(huì)認(rèn)可。

1.2 方法

1.2.1 束縛裝置的制作

實(shí)驗(yàn)室就地取材，取實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備耗材50 mL離心管，自制簡(jiǎn)易小鼠束縛裝置。該裝置不僅可以用于束縛應(yīng)激模型的制備，而且可以用于尾靜脈采血、注射，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)取材方便，制作簡(jiǎn)便，操作亦是簡(jiǎn)單且使用效果良好，可實(shí)現(xiàn)較長(zhǎng)時(shí)間的保定。該裝置不僅能用于小鼠保定同樣也適用于大鼠。為了說(shuō)明方便，以小鼠舉例。下文將逐步對(duì)該小鼠束縛裝置的制作、使用方法及注意事項(xiàng)進(jìn)行介紹：

(1)束縛裝置的制備

選擇容量規(guī)格適合小鼠身型的離心管、剪刀、膠布、橡皮筋共四樣(圖1B)。例如50 mL離心管可用于產(chǎn)后束縛應(yīng)激小鼠模型(體重在30 ～ 40 g之間)的制備[8](圖1C)。選擇合適規(guī)格的離心管，取掉離心管的蓋子，在離心管蓋上用剪刀扎透氣孔(圖1D)，然后用剪刀在離心管壁任意一側(cè)，縱向豎直向下剪，由離心管開(kāi)口剪到管底部，橫向根據(jù)小鼠尾部根部粗細(xì)，在離心管一側(cè)剪出寬為0.5 cm左右的開(kāi)口(圖1E)，再用膠布在管壁剪開(kāi)的開(kāi)口周?chē)N上膠布(圖1F)，防止管壁開(kāi)口毛刺劃傷小鼠。經(jīng)過(guò)以上的操作，一個(gè)小鼠簡(jiǎn)易束縛裝置基本制作完成，后續(xù)搭配離心管蓋、膠布、橡皮筋使用(圖1G)。

(2)使用方法

操作者左手持小鼠束縛裝置，裝置管口朝外，管底部朝自身，側(cè)壁間隙朝上。右手抓住小鼠尾部，將小鼠放在鼠籠上方或任一平面，用管口對(duì)準(zhǔn)小鼠臀部，右手施力拖動(dòng)小鼠尾巴在管壁間隙中滑行，沿著管壁間隙從管口縱行拉向管底，然后用離心管蓋抵住洞口，膠布貼于離心管蓋及其兩側(cè)管壁進(jìn)行加固，即可把小鼠固定于裝置內(nèi)且小鼠尾部暴露在管壁外(圖1H)。接著用橡皮筋箍緊管壁(圖1I)，既可以防止小鼠從管壁間隙中逃走也能限制小鼠在管內(nèi)的活動(dòng)空間。亦可不用離心管蓋抵住洞口，選用膠布繞1～2圈小鼠尾巴根部然后環(huán)繞管底周?chē)鼙趲兹纯晒潭ㄐ∈笥谘b置內(nèi)。該裝置只需操作者施力即可迅速把小鼠拖入管內(nèi)，不需要等待引誘小鼠主動(dòng)進(jìn)洞，避免小鼠掙扎緊抓洞口耗費(fèi)時(shí)間，提高實(shí)驗(yàn)效率，非常方便。

圖1 束縛裝置的制作步驟Figure 1 Manufacturing procedure of the fixing device

(3)注意事項(xiàng)

①剪管壁間隙時(shí)，要注意間隙的寬度要適合小鼠的尾部粗細(xì)，間隙尺度要略大于尾部最粗端的尺度，但是不可以過(guò)大而讓小鼠鉆出。

②選擇離心管蓋抵住離心管口來(lái)固定小鼠時(shí)，要注意在離心管蓋上用剪刀插上孔。雖然管壁上方有一縱行貫穿的間隙，已經(jīng)不影響管內(nèi)空氣流通，但是保險(xiǎn)起見(jiàn)需在離心管蓋上用剪刀插上孔透氣，孔不能過(guò)大以防小鼠嘴巴伸出啃咬。為了離心管蓋能穩(wěn)固地抵住離心管口，可以用膠布貼于離心管蓋和兩側(cè)管壁進(jìn)行加固。

③選擇膠布固定小鼠尾部于管壁時(shí)，用膠布繞小鼠尾巴根部1 ～ 2圈，勿緊，過(guò)緊會(huì)導(dǎo)致小鼠尾部血液不暢。正確操作是使膠布粘住鼠尾，余下膠布纏繞管底周?chē)鼙趲兹?，觀察鼠尾顏色，確定不影響尾部血循即可，原則是固定而不過(guò)緊。

④橡皮筋捆于管壁，不要太靠近小鼠頭部處，容易被咬斷，最佳位置是捆于小鼠軀干處的管壁。如果沒(méi)有皮筋，可用膠布替代捆于管壁，膠布繞過(guò)管壁間隙接觸小鼠毛發(fā)處容易粘住動(dòng)物毛發(fā)，所以另撕一小節(jié)膠布，反向貼于膠布粘性一側(cè)，使不粘的一側(cè)接觸動(dòng)物毛發(fā)，從而保護(hù)小鼠安全。

⑤為了加強(qiáng)小鼠保定束縛效果可以既用離心管蓋抵住管口又用膠布粘住小鼠尾部固定于管壁，根據(jù)操作者需求進(jìn)行選擇。如果只是短暫的保定束縛，可以只選擇用離心管蓋抵住管口，如果是為了給予長(zhǎng)時(shí)間束縛應(yīng)激，可以把兩種固定方式結(jié)合，加強(qiáng)固定效果。

⑥可以根據(jù)小鼠的身長(zhǎng)對(duì)離心管管壁進(jìn)行修剪。當(dāng)離心管管壁過(guò)長(zhǎng)，可以用剪刀適當(dāng)裁剪管壁長(zhǎng)度來(lái)匹配小鼠的身長(zhǎng)，盡量縮小小鼠的活動(dòng)空間。修剪后的管口直徑仍然略小于離心管蓋的直徑，然后用離心管蓋罩住管口，并且用膠布加固離心管蓋與管壁的連結(jié)。

(4)裝置適用范圍

①尾靜脈采血、注射。

小鼠的尾部暴露于離心管外，便于操作者進(jìn)行尾靜脈采血、注射。

②束縛應(yīng)激模型制作。

例如把產(chǎn)后小鼠固定于裝置內(nèi)限制其行動(dòng)，每天給予3 h的束縛應(yīng)激，連續(xù)造模21 d即可制備產(chǎn)后束縛應(yīng)激小鼠模型[9]。

③其它。

在管壁所需要的部位剪洞，進(jìn)行腹腔注射或者背部注射。

1.2.2 小鼠產(chǎn)后束縛應(yīng)激模型建立

(1)造模方法

小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，以1只雌性搭配2只雄性小鼠交配的方式，將小鼠放在同一鼠籠4 d進(jìn)行交配，4 d后取出雄性小鼠，單獨(dú)飼養(yǎng)妊娠成功的雌性母鼠直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。在母鼠產(chǎn)后第2天，將母鼠移出鼠籠，母子分離，把母鼠裝于于自制的束縛裝置(后文詳述)，每天上午9點(diǎn)至中午12點(diǎn)，連續(xù)束縛3 h，結(jié)束后把母鼠移回原鼠籠，每天1次連續(xù)3周，直到斷乳。

(2)分組與干預(yù)

將相似體重的產(chǎn)后母鼠分為2組，正常組(Control)與產(chǎn)后應(yīng)激組(immobilization stress， IS)，每組8只。產(chǎn)后每天記錄母鼠體重與攝食量和仔鼠體重。對(duì)于產(chǎn)后應(yīng)激組母鼠，產(chǎn)后第2天開(kāi)始，在母子分離基礎(chǔ)上，每天給予3 h束縛應(yīng)激，對(duì)正常組母鼠不操作。在產(chǎn)后第22天，通過(guò)紅外線(xiàn)計(jì)數(shù)器，測(cè)算母鼠運(yùn)動(dòng)量，之后人道地處死母鼠，摘取胃與下丘腦。

(3)檢測(cè)指標(biāo)與方法

①RT-qPCR 法測(cè)基因的mRNA相對(duì)的表達(dá)量

采用逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-qPCR)的方法測(cè)定胃內(nèi)ghrelin,5-HT2b受體mRNA表達(dá)水平和下丘腦內(nèi)ghrelin, 5-HT2c受體的mRNA水平。使用RN easy Mini Kit(Qiagen, Hilden, Germany)從樣本組織中分離出總RNA，利用Improm-IITM逆轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)(Promega, Madison, WI, USA)合成cDNA。使用表1列出的引物和QuantiFast SYBR Green RT-PCR(Roche，Swiss)試劑盒進(jìn)行qPCR分析。循環(huán)參數(shù)設(shè)計(jì)在95℃初始化5 min,然后在95℃下10 s為周期進(jìn)行連續(xù)40個(gè)循環(huán)的變性、延伸、擴(kuò)增，最后在60℃退火30 s。根據(jù)其熔解曲線(xiàn)，以GAPDH基因作內(nèi)參基因，使用2-ΔΔCt方法測(cè)定相對(duì)mRNA表達(dá)。

②蛋白質(zhì)印跡(Western blot)法測(cè)蛋白的總量

將樣本組織放入RIPA緩沖液中裂解。將裂解物進(jìn)行聚丙烯酰胺電泳(SDS-PAGE)并電轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜。將該膜放入1%脫脂奶粉中封閉1 h，并在4℃下分別用抗生長(zhǎng)素釋放肽，抗5-HT2b受體，抗5-HT2c受體?？垢视腿?-磷酸脫氫酶(GAPDH)孵育過(guò)夜，再與過(guò)氧化物酶綴合的二抗孵育后，通過(guò)增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光底物檢測(cè)條帶信號(hào)信號(hào)值，并使用Image Studio軟件相對(duì)定量分析結(jié)果。

表1 實(shí)時(shí)PCR引物序列Table 1 Primer sequences for Real-time PCR

③免疫組織化學(xué)染色法

將組織樣品固定在多聚甲醛中，然后石蠟包埋切片。脫蠟和脫水后，將切片浸入3%過(guò)氧化氫中，用來(lái)阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性，再用pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液進(jìn)行抗原的修復(fù)。在4℃下將切片分別與生長(zhǎng)素釋放肽，5-HT2b受體、5-HT2c受體的抗體孵育過(guò)夜，然后于室溫下和二抗孵育1 h。3,3-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)溶液應(yīng)用于切片，并用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 產(chǎn)后束縛應(yīng)激母鼠運(yùn)動(dòng)量的變化

如圖2所示通過(guò)紅外線(xiàn)感知計(jì)數(shù)器測(cè)量產(chǎn)后第22天母鼠10 min的運(yùn)動(dòng)量，發(fā)現(xiàn)壓力組母鼠的運(yùn)動(dòng)量少于正常組母鼠(P< 0.01)，兩者運(yùn)動(dòng)量的差異具有顯著性。

2.2 產(chǎn)后束縛應(yīng)激母鼠體重與攝食的變化

兩組母鼠產(chǎn)后記錄體重與攝食，如圖3所示。應(yīng)激組母鼠的體重與攝食總體上低于正常組母鼠(P< 0.05；P< 0.01；P< 0.001)，差異具有顯著性。產(chǎn)后母鼠在束縛應(yīng)激壓力作用下體重與攝食減少。

2.3 產(chǎn)后束縛應(yīng)激母鼠胃與下丘腦內(nèi)相關(guān)基因的變化

圖4顯示在母鼠產(chǎn)后第22天，采用RT-qPCR方法，檢測(cè)胃和下丘腦中與情緒以及代謝相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平?？梢钥吹较虑鹉X中的5-HT2c受體與胃中5-HT2b受體在應(yīng)激組的表達(dá)要低于正常組(P< 0.001)，下丘腦中的ghrelin和胃中g(shù)hrelin在應(yīng)激組的表達(dá)要高于正常組(P< 0.001)，差異具有顯著性。

圖5顯示免疫組織化學(xué)染色法和蛋白質(zhì)印記法檢測(cè)母鼠產(chǎn)后第22天胃內(nèi)ghrelin、5-HT2b受體和下丘腦內(nèi)ghrelin和5-HT2c受體的表達(dá)水平。圖表顯示胃和下丘腦標(biāo)本中應(yīng)激組的ghrelin蛋白表達(dá)表達(dá)高于正常組(P< 0.001)，應(yīng)激組胃內(nèi)5-HT2b受體(P< 0.001)和下丘腦中5-HT2c受體(P< 0.05)的蛋白表達(dá)低于正常組，差異具有顯著性。

注：與正常組母鼠運(yùn)動(dòng)量比較，**P< 0.01。圖2 母鼠運(yùn)動(dòng)量的變化Note. Comparison of exercise amount with maternal mice in control group,**P < 0.01.Figure 2 Changes of exercise amount in maternal mice

注：與正常組母鼠體重與攝食比較，*P < 0.05,**P < 0.01,***P< 0.001。圖3 母鼠體重與攝食的變化Note. Compared with the weight and food intake of maternal mice in control group,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001.Figure 3 Changes of body weight and food intake in maternal mice

注：與正常組相關(guān)基因mRNA表達(dá)相比，***P < 0.001。圖4 應(yīng)激影響母鼠胃與下丘腦內(nèi)相關(guān)基因的變化Note. Compared with mRNA expression of related genes in control group,***P< 0.001.Figure 4 Changes of related genes in stomach and hypothalamus

注：通過(guò)免疫組織化學(xué)染色法和蛋白質(zhì)印記法檢測(cè)基因表達(dá)，**P < 0.01, ***P < 0.001。圖5 應(yīng)激影響母鼠胃與下丘腦內(nèi)相關(guān)基因的變化(×200)Note. Detection of gene expression by immunohistochemical staining and Western blot, **P < 0.01, ***P < 0.001.Figure 5 Changes of related genes in stomach and hypothalamus(×200)

2.4 產(chǎn)后應(yīng)激母鼠對(duì)子代的影響

應(yīng)激母鼠產(chǎn)后記錄仔鼠的體重，如圖6所示，應(yīng)激組母鼠的仔鼠體重和身長(zhǎng)低于正常組母鼠仔鼠(P< 0.001)，差異具有顯著性。雖然是給予母鼠束縛應(yīng)激，但是也對(duì)小鼠造成了發(fā)育不良。體重增長(zhǎng)曲線(xiàn)持續(xù)觀察10周，應(yīng)激組仔鼠體重仍沒(méi)有追上正常組仔鼠(P< 0.01)。表明母鼠產(chǎn)后應(yīng)激會(huì)影響子代發(fā)育，導(dǎo)致仔鼠持續(xù)的生長(zhǎng)遲緩，造成子代低體重與營(yíng)養(yǎng)不良。

另外在第8周應(yīng)激組仔鼠的運(yùn)動(dòng)量高于正常組仔鼠(P< 0.01)，差異具有顯著性，表明仔鼠長(zhǎng)大后有多動(dòng)的傾向。

注：正常組母鼠的子代與應(yīng)激組母鼠的子代比較發(fā)育狀況，**P < 0.01, ***P < 0.001。圖6 產(chǎn)后應(yīng)激母鼠對(duì)子代的影響Note. Comparison of offspring development between normal and stressed maternal mice,**P < 0.01, ***P < 0.001.Figure 6 Effect of postpartum stressed maternal mice on the offspring

3 討論

使用本文自制的束縛裝置制作小鼠產(chǎn)后束縛應(yīng)激模型，具有低體重低攝食，ghrelin高表達(dá)，5-HT2受體低表達(dá)的特征，并且能造成子代生長(zhǎng)發(fā)育遲緩。本課題組之前的實(shí)驗(yàn)[10-12]，同樣采用此束縛裝置制作產(chǎn)后束縛應(yīng)激小鼠模型，與正常組相比，應(yīng)激母鼠的體重與攝食同樣呈現(xiàn)減少趨勢(shì)，母鼠胃和下丘腦內(nèi)ghrelin表達(dá)量升高，下丘腦中的5-HT2c受體與胃中5-HT2b受體表達(dá)下降，并且應(yīng)激組母鼠的仔鼠體質(zhì)量同樣低于正常組母鼠的仔鼠體質(zhì)量。以上實(shí)驗(yàn)證明該裝置制作的產(chǎn)后束縛應(yīng)激模型具有穩(wěn)定性和可重復(fù)性。

近些年來(lái)，一些研究表明ghrelin在情緒調(diào)節(jié)中起著重要作用，例如自殺未遂患者的血清ghrelin水平顯著增加[13]、側(cè)腦室注射ghrelin可增加雄性幼年大鼠抑郁樣行為[14]、抑郁癥患者血清內(nèi)高ghrelin表達(dá)，并且隨抑郁的嚴(yán)重程度加重而表達(dá)增加[15]。

許多研究已經(jīng)證實(shí)5-羥色胺(5-HT) 與情緒障礙相關(guān)[16]，例如恐懼、焦慮、抑郁等不良情緒。據(jù)報(bào)道，低血清素活性可能導(dǎo)致許多心理障礙，如沖動(dòng)性，攻擊性和自殺意念，并且血清素能系統(tǒng)和生長(zhǎng)素釋放肽之間存在相互作用[17-19]。

在人類(lèi)和動(dòng)物模型中，血清素(又名5-羥色胺或5-HT)的攝取與焦慮、抑郁等情緒密切相關(guān)，是廣泛使用的抗抑郁和抗焦慮藥物的作用位點(diǎn)[20]。5-HT的受體具有許多亞型，有研究報(bào)道抑郁癥患者較正常人腦內(nèi)5-HT受體的數(shù)量偏低且敏感性下降[21]，其中5-HT2受體與抑郁癥密切相關(guān)[22]。5-HT2b受體主要分布于周?chē)M織，有研究顯示5HT2b受體的表達(dá)與抑郁癥狀呈相關(guān)性，在帕金森伴抑郁小鼠的腦皮質(zhì)中5-HT2b受體表達(dá)下降[23]。在慢性應(yīng)激導(dǎo)致快感缺乏的小鼠中，5-HT2b受體表達(dá)顯著降低[24]。激活胃內(nèi)5-HT2b受體能夠抑制ghrelin的分泌[25]。5-HT2C受體是5-HT受體的另一種亞型，廣泛分布于中樞神經(jīng)，在抑郁癥新治療策略的開(kāi)發(fā)受到重要的關(guān)注[26]。5-羥色胺再攝取抑制劑治療對(duì)5-HT2C受體的間接激活，可能有助于改善厭食和焦慮作用[27]。

本文介紹的產(chǎn)后小鼠束縛應(yīng)激模型具有低體重低攝食，胃與下丘腦以及血清內(nèi)ghrelin表達(dá)量增加，5-HT2受體等基因表達(dá)量減少，運(yùn)動(dòng)量減少等抑郁樣癥狀，能造成子代生長(zhǎng)發(fā)育遲緩并有多動(dòng)傾向，可供產(chǎn)后應(yīng)激疾病等研究。并且多次實(shí)驗(yàn)[8,10-11,28]證明此束縛裝置對(duì)于束縛應(yīng)激模型的造模是具有可重復(fù)性和穩(wěn)定性。

此文章講述的自制簡(jiǎn)易小鼠束縛裝置，材料準(zhǔn)備方便，制作簡(jiǎn)便，成本低廉，體積小巧，便于收納保存。該裝置只需選取合適容量規(guī)格的離心管，能夠?qū)Υ笮〔煌膶?shí)驗(yàn)鼠進(jìn)行固定限位。只需操作者施力即可迅速把實(shí)驗(yàn)鼠拖入管內(nèi)，不需要等待實(shí)驗(yàn)鼠主動(dòng)進(jìn)洞，避免實(shí)驗(yàn)鼠掙扎緊抓洞口耗費(fèi)時(shí)間，有利于提高實(shí)驗(yàn)效率。使用該裝置進(jìn)行尾靜脈采血或注射，能保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員不被小鼠咬傷，且透明管壁有助于觀察小鼠的情況。

除了運(yùn)用于小鼠束縛應(yīng)激模型的制備外，該裝置還可以用于尾靜脈采血、注射。根據(jù)實(shí)驗(yàn)鼠身型大小選擇合適容量的容器，用上述方法制作簡(jiǎn)易束縛裝置，既能運(yùn)用于小鼠又能用于大鼠。以上全部?jī)?nèi)容就是產(chǎn)后束縛小鼠應(yīng)激模型以及束縛裝置的制作方法介紹，供實(shí)驗(yàn)人員借鑒與使用。