毒力因子可以促進(jìn)真菌對(duì)寄主的定殖,真菌的致病性依賴(lài)于毒力因子的正確定位和分泌。蛋白質(zhì)糖基化是一種常見(jiàn)的蛋白質(zhì)翻譯后修飾。與許多蛋白質(zhì)一樣,毒力因子也必須通過(guò)糖基化的翻譯后修飾才能實(shí)現(xiàn)正常的定位、分泌并發(fā)揮功能。因此,糖基化缺失與動(dòng)植物病原菌的毒力喪失有關(guān)。雖然蛋白質(zhì)糖基化與致病機(jī)制的相關(guān)性已經(jīng)得到很好的驗(yàn)證,但在糖基化缺失的真菌中,與毒力喪失相關(guān)的主要糖蛋白還沒(méi)有被鑒定出來(lái)。
西班牙巴勃羅德奧拉維德大學(xué)——安達(dá)盧西亞生物發(fā)展研究中心(CentroAndaluz de Biología del Desarrollo)的AlfonsoFernández-álvarez 團(tuán)隊(duì)在PLOS Pathogens上在線(xiàn)發(fā)表了題為“N-glycosylationof the protein disulfide isomerase Pdi1 ensures full Ustilago maydis virulence”的文章,創(chuàng)新性的設(shè)計(jì)了一種鑒定新的糖基化真菌效應(yīng)因子的有效方法,并揭示了蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(Pdi1)的N-糖基化對(duì)于玉米黑粉菌毒力的重要性。
本研究設(shè)計(jì)了一種蛋白質(zhì)組學(xué)分析和2D-DIGE相結(jié)合的方法,鑒定了玉米黑粉菌中與感染植物有關(guān)的糖蛋白,其中,Pdi1的缺失對(duì)真菌毒力影響最大。實(shí)驗(yàn)證明,Pdi1的N-糖基化是玉米黑粉菌完全發(fā)揮其致病力所必需的,可能因?yàn)镻di1是侵染相關(guān)的糖基化和分泌蛋白正確折疊所必需的。值得注意的是,Pdi1 N-糖基化缺失的菌株與ΔPDI1缺陷的菌株在感染過(guò)程中觀(guān)察到的表型相似,這暗示著可能是N-糖基化缺失造成了Pdi1功能的改變。隨后實(shí)驗(yàn)證明了這一假設(shè),只有Pdi1的N-糖基化與其在毒力中的作用相關(guān)。所有這些觀(guān)察結(jié)果,再加上在毒性程序激活下Pdi1蛋白和RNA的表達(dá)量都上升的事實(shí),都表明Pdi1糖基化對(duì)玉米黑粉菌的正常發(fā)病是至關(guān)重要的。本研究的結(jié)果為糖基化在真菌發(fā)病機(jī)制中的作用提供了新的見(jiàn)解。該機(jī)制的保守性也告訴我們,有必要繼續(xù)探索Pdi1在其他病原真菌中的作用。