馮剛 李向陽

摘要： 目的 探討蝦青素油對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用。方法 測定刀豆蛋白 A（ConA）誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力，二硝基氟苯（DNFB）誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng) （DTH），小鼠血清溶血素含量，小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能，小鼠碳廓清能力，抗體生成細(xì)胞能力，小鼠自然殺傷細(xì)胞（NK）活性指標(biāo)。結(jié)果與空白對照組比較，蝦青素油中、高劑量組小鼠刀豆蛋白 A（ConA）誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力（0D值）顯著增強(qiáng)（P<0.05） ，血清溶血素含量顯著升高（P<0.05），小鼠碳廓清吞噬指數(shù)顯著提高（P<0.01）;高劑量組小鼠二硝基氟苯（DNFB）誘發(fā)的DTH顯著增強(qiáng)（P<0.05）;蝦青素油各劑量組小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬率、吞噬指數(shù)未明顯變化（P<0.05），抗體生成細(xì)胞能力未明顯增強(qiáng)（P<0.05），自然殺傷（NK）細(xì)胞活性未明顯增強(qiáng)（P>0.05）。結(jié)論蝦青素油具有增強(qiáng)免疫功能的作用。

關(guān)鍵詞： 蝦青素油; 細(xì)胞免疫; 體液免疫;NK細(xì)胞

雨生紅球藻屬于綠藻門（Chlorophata）綠藻綱（hlorophyceae）團(tuán)藻目（Volvocales）紅球藻科（Haematococcaccae）紅球藻屬（Haematococcus，Ag）。雨生紅球藻細(xì)胞內(nèi)天然蝦青素的含量相對較高，可達(dá)干重的2%～5%[1]。蝦青素是一種葉黃素類胡蘿卜素。是迄今為止人類發(fā)現(xiàn)的自然界最強(qiáng)的抗氧化劑之一，其清除自由基的能力是天然維生素E 的1000倍，是天然β-胡蘿卜素的10倍，是番茄紅素的7倍。

通過整體實驗觀察，發(fā)現(xiàn)蝦青素等類胡蘿素均顯著促進(jìn)胸腺依賴抗原（TD-Ag）刺激時的抗體產(chǎn)生，分泌IgM和IgG的細(xì)胞數(shù)增加[2]。Jyonochi等[3]研究了蝦青素和β-胡蘿素2種類胡蘿素對小鼠淋巴細(xì)胞體外組織培養(yǎng)系統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)，結(jié)果表明類胡蘿素的免疫調(diào)節(jié)作用與有無VE活性無關(guān)。蝦青素的抗氧化作用能夠保持機(jī)體的自穩(wěn)態(tài)，從而保證細(xì)胞間隙的連接通訊正常發(fā)揮作用，進(jìn)而促進(jìn)淋巴細(xì)胞間的相互作用并分泌有免疫活性的細(xì)胞因子，最終表現(xiàn)為機(jī)體免疫能力的增強(qiáng)[4]。今年來從雨生紅球藻中提取蝦青素得到蝦青素油，蝦青素油用于營養(yǎng)保健類產(chǎn)品開發(fā)研究逐漸增多。

本實驗研究蝦青素油對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1動物SPF級昆明種雌性小鼠160只，體質(zhì)量18～22g，湖北省實驗動物研究中心提供。

1.2受試物 蝦青素油 批號20180124J，由上海萊雀生物科技有限公司提供，蝦青素含量5.10%

1.3主要儀器 動物天平、分析天平、水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板、離心機(jī)、游標(biāo)卡尺等

1.4實驗分組及劑量 160只小鼠隨機(jī)分為四個大組，分別進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、抗體生成細(xì)胞、血清溶血素;小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞;小鼠碳廓清;小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗、NK細(xì)胞活性實驗。四個大組再分成4個小組，蝦青素油高、中、低劑量組和對照組。劑量組分別灌胃蝦青素油8.3mg/kg·BW、17mg/kg·BW和51mg/kg·BW，對照組灌胃等體積大豆油。每日1次，灌胃體積為0.1ml/10g，連續(xù)30天。

2 方法

動物適應(yīng)環(huán)境5天后，三個劑量組分別灌胃蝦青素油8.3mg/kg·BW、17mg/kg·BW和51mg/kg·BW，對照組灌胃等體積大豆油。每日1次，灌胃體積為0.1ml/10g，連續(xù)30天后處死小鼠。按照中國衛(wèi)生部《保健食品審評與評價技術(shù)規(guī)范》2003版中“增強(qiáng)免疫功能實驗檢測方法”有關(guān)規(guī)定進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、抗體生成細(xì)胞、血清溶血素;小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞;小鼠碳廓清;小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗、NK細(xì)胞活性實驗。

數(shù)據(jù)處理 采用 SAS 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，行t 檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3實驗結(jié)果

結(jié)果見表1至表3。各組動物間體重增重、胸腺/體質(zhì)量比值和脾臟/體質(zhì)量比值無明顯差異（P>0.05）。與空白對照組比較，蝦青素油中、高劑量組小鼠刀豆蛋白 A（ConA）誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力（0D值）顯著增強(qiáng)（P<0.05） ，血清溶血素含量顯著升高（P<0.05），小鼠碳廓清吞噬指數(shù)顯著提高（P<0.01），高劑量組小鼠二硝基氟苯（DNFB）誘發(fā)的DTH 顯著增強(qiáng)（P<0.05）;蝦青素油各劑量組小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬率、吞噬指數(shù)未明顯變化（P<0.05） ，抗體生成細(xì)胞能力未明顯增強(qiáng)（P<0.05），自然殺傷（NK）細(xì)胞活性未明顯增強(qiáng)（ P>0.05）。

3討論

本實驗顯示，各組動物間體重增重、胸腺/體質(zhì)量比值和脾臟/體質(zhì)量比值無明顯差異（P>0.05）。與空白對照組比較，蝦青素油中、高劑量組小鼠刀豆蛋白 A（ConA）誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力（0D值）顯著增強(qiáng)（P<0.05） ，血清溶血素含量顯著升高（P<0.05），小鼠碳廓清吞噬指數(shù)顯著提高（P<0.01），高劑量組小鼠二硝基氟苯（DNFB）誘發(fā)的DTH 顯著增強(qiáng)（P<0.05）;蝦青素油各劑量組小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬率、吞噬指數(shù)未明顯變化（P<0.05） ，抗體生成細(xì)胞能力未明顯增強(qiáng)（P<0.05），自然殺傷（NK）細(xì)胞活性未明顯增強(qiáng)（ P>0.05）。表明蝦青素油對小鼠免疫調(diào)節(jié)具有正向作用，可提高小鼠免疫能力。

引用文獻(xiàn)

1. 曹平華，李曉霞，禹學(xué)禮，等.雨生紅球藻.飼料博覽.2004年第11期：42-43

2.JyonouchiH.Zhang I，Gross M eta1.Nutr.Cancer1994，21（1）：47

3.JyonouchiH.Hill R J.Tomita Yeta1 Nutr.Cancer.1991，16（2）：93～105

4.陳立武，曾維銓.蝦青素抗肝腫瘤生長的實驗研究.2012年2月，第9卷第4期：21-23