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      獸藥中非法添加硝基咪唑類藥物的檢查方法

      2020-07-20 00:52:58
      四川畜牧獸醫(yī) 2020年7期
      關(guān)鍵詞:異丙硝唑替硝唑

      1 適用范圍

      1.1 本方法適用于鹽酸多西環(huán)素可溶性粉和硫酸新霉素可溶性粉中非法添加羅硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑、奧硝唑或異丙硝唑的檢查。

      1.2 用于其他獸藥制劑中非法添加羅硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑、奧硝唑或異丙硝唑檢查時,需進(jìn)行空白試驗(yàn)和檢測限測定。

      2 檢查方法

      照高效液相色譜法(《中國獸藥典》一部附錄0512)測定。

      2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(Agilent EclipsePlus C18 4.6 mm×250 mm,5 μm 色譜柱或其他等效的色譜柱);以甲醇為流動相A,以水為流動相B,流速為每分鐘0.8 mL,按表1進(jìn)行線性梯度洗脫;柱溫25 ℃;二極管陣列檢測器檢測,采集波長范圍為200~400 nm,分辨率為1.2 nm,記錄320 nm 波長處的色譜圖。供試品溶液中羅硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑、奧硝唑和異丙硝唑的色譜峰與相鄰色譜峰的分離度應(yīng)符合要求。

      表1 線性梯度洗脫程序

      2.2 測定法 取供試品1.0 g,置具塞錐形瓶中,加甲醇50 mL,超聲處理10 min,冷卻至室溫,濾過;取續(xù)濾液5.0 mL,置50 mL 量瓶中,用30%甲醇溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,作為供試品溶液。分別取羅硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑、奧硝唑和異丙硝唑?qū)φ掌犯骷s25 mg 置50 mL 量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度;取適量,用30%甲醇溶液定量稀釋制成每1 mL中各含約50 μg的溶液,作為對照品溶液。取對照品溶液和供試品各20 μL,分別注入液相色譜儀,同時記錄色譜圖和光譜圖。必要時,可調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛龋箖烧叻迕娣e接近。通過與對照品溶液色譜圖保留時間、光譜圖的對比,確定供試品中是否含有羅硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑、奧硝唑或異丙硝唑。

      3 結(jié)果判定

      3.1 供試品溶液色譜圖中如出現(xiàn)與相應(yīng)對照品溶液色譜圖中保留時間一致的色譜峰(差異不大于±5%),且為單一物質(zhì)峰;在規(guī)定的采集波長范圍內(nèi),兩者紫外光譜圖匹配,且最大吸收波長一致(差異不大于±2 nm),判定為檢出羅硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑、奧硝唑或異丙硝唑。

      3.2 供試品溶液色譜圖中峰保留時間與相應(yīng)對照品峰相同,但峰面積小于檢測限峰面積,判定為未檢出羅硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑、奧硝唑或異丙硝唑。

      4 檢測限

      本方法中羅硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑、奧硝唑或異丙硝唑的檢測限為1 mg/g。

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