常翠蓮 渠非 馮浩 黃麗麗

摘 要 為篩選出對(duì)蘋(píng)果炭疽葉枯病菌具有較好抑菌效果的生物源殺菌劑，采用菌絲生長(zhǎng)速率法，測(cè)定了9種生物源殺菌劑對(duì)蘋(píng)果炭疽葉枯病菌的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明，除0.5%大黃素甲醚AS和青枯立克AS對(duì)蘋(píng)果炭疽葉枯病菌沒(méi)有抑菌效果外，其余7種供試藥劑均有一定的抑菌效果。其中，100萬(wàn)/g寡雄腐霉菌WP和1%維大利DP的室內(nèi)毒力最強(qiáng)，其次為大蒜油EC和5%香芹酚AS，2億/g木霉菌WP、1%蛇床子素EW、0.3%丁子香酚SL抑菌效果相對(duì)較弱。

關(guān)鍵詞 蘋(píng)果炭疽葉枯病菌;生物源殺菌劑;毒力測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)：S436.611.12 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.15.070

我國(guó)是世界蘋(píng)果生產(chǎn)大國(guó)，但各種病蟲(chóng)害卻嚴(yán)重影響蘋(píng)果的產(chǎn)量和品質(zhì)。其中，蘋(píng)果炭疽葉枯病是我國(guó)蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生的重要葉部病害，常造成葉片早枯、脫落，削弱樹(shù)勢(shì)，引起次年減產(chǎn)[1]。近年來(lái)，該病害在我國(guó)山東、河南、陜西等蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生，主要在金冠、秦冠、嘎啦和喬納金等感病品種為害嚴(yán)重。

化學(xué)藥劑因其具有高效、快捷、經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)，一直以來(lái)都是病蟲(chóng)害防控的重要手段。自2011年我國(guó)發(fā)現(xiàn)蘋(píng)果炭疽葉枯病后，生產(chǎn)上主要采用咪鮮胺、吡唑醚菌酯等化學(xué)藥劑進(jìn)行防控[2-3]。但病菌對(duì)吡唑醚菌酯極易產(chǎn)生抗藥性，不宜多次重復(fù)使用;咪鮮胺對(duì)炭疽葉枯病的防效顯著，但其防治成本高，且藥劑持效期較短[4]。此外，果農(nóng)過(guò)于依賴(lài)化學(xué)藥劑，超量使用還會(huì)造成環(huán)境污染、農(nóng)藥殘留等問(wèn)題。生物藥劑具有安全、易降解、不易產(chǎn)生抗藥性等諸多優(yōu)點(diǎn)，成為近年來(lái)病蟲(chóng)害防治的熱點(diǎn)?；诖耍瑴y(cè)定9種生物源殺菌劑對(duì)蘋(píng)果炭疽葉枯病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果，以篩選出可用于防治蘋(píng)果炭疽葉枯病的生物源殺菌劑。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株及藥劑

蘋(píng)果炭疽葉枯病菌由西北農(nóng)林科技大學(xué)果樹(shù)病害病原生物學(xué)及綜合治理研究室提供。供試藥劑見(jiàn)表1。

1.1.2 培養(yǎng)基

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）用于蘋(píng)果炭疽葉枯病菌菌株培養(yǎng)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 9種生物源殺菌劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制效果測(cè)定

采用菌絲生長(zhǎng)速率法[5]，將9種供試藥劑分別用滅菌水稀釋成不同濃度梯度的藥液，吸取3 mL藥液加入27 mL已熔化冷卻至約45 ℃的PDA培養(yǎng)基中，充分混勻，倒入滅菌培養(yǎng)皿中制成含藥平板（每皿約10 mL），濃度梯度見(jiàn)表2。每種藥劑設(shè)置5～6個(gè)濃度，并以加入無(wú)菌水的PDA培養(yǎng)基作為空白對(duì)照，每個(gè)處理3次重復(fù)，試驗(yàn)重復(fù)3次。用滅菌打孔器從25 ℃黑暗培養(yǎng)5～6 d的炭疽葉枯病菌菌落邊緣打取直徑為5 mm的菌餅，倒置接種于含藥平板中央，繼續(xù)于25 ℃黑暗培養(yǎng)5～6 d后，利用十字交叉法測(cè)量培養(yǎng)皿內(nèi)菌落直徑（mm），按照公式1計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。

1.2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，以各藥劑濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)（x），菌絲生長(zhǎng)抑制率相對(duì)應(yīng)的概率值為縱坐標(biāo)（y），繪制毒力回歸曲線(xiàn)。計(jì)算不同藥劑對(duì)蘋(píng)果炭疽葉枯病菌的毒力回歸方程、EC50值和相關(guān)系數(shù)R2。

2 結(jié)果與分析

表3結(jié)果表明，100萬(wàn)/g寡雄腐霉菌WP和1%維大利DP抑菌效果顯著強(qiáng)于其他藥劑，其EC50分別為0.172 2 μg·mL-1和4.498 0 μg·mL-1;其次是大蒜油EC和5%香芹酚AS，EC50分別為88.640 0和90.390 0 μg·mL-1;2億/g木霉菌WP、1%蛇床子素EW和0.3%丁子香酚SL對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制效果較差，其EC50分別為214.600 0 μg·mL-1、259.500 0 μg·mL-1、480.600 0 μg·mL-1。0.5%大黃素甲醚AS和青枯立克AS對(duì)蘋(píng)果炭疽葉枯病菌菌絲生長(zhǎng)幾乎沒(méi)有抑制效果，因此并未在表中列出。

3 結(jié)論

研究中使用的9種生物源殺菌劑，除0.5%大黃素甲醚AS和青枯立克AS沒(méi)有抑制效果外，其余7種均對(duì)蘋(píng)果炭疽葉枯病菌有一定的抑制作用。其中100萬(wàn)/g寡雄腐霉菌WP和1%維大利DP的室內(nèi)毒力最強(qiáng)，EC50值分別為0.172 2 μg·mL-1和4.498 0 μg·mL-1，可以考慮作為防治炭疽葉枯病的候選生物源藥劑，但該效果評(píng)價(jià)均在室內(nèi)完成，其田間防效還有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)：

[1] 高峰，王磊，冷鵬，等.蘋(píng)果炭疽葉枯病發(fā)生規(guī)律及綜合防控技術(shù)[J].農(nóng)業(yè)科技通訊，2019（6）：342-345.

[2] 何艷維，宋梁棟，豆粉婷，等.關(guān)于蘋(píng)果炭疽葉枯病防治藥劑篩選研究[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，64（6）：38-39.

[3] 王冰，王彩霞，史祥鵬，等.不同殺菌劑對(duì)蘋(píng)果炭疽葉枯病的防治效果[J].植物保護(hù)，2014，40（6）：176-180.

[4] 韓文啟，孫厚行，劉馨蔚，等.7種防治蘋(píng)果炭疽葉枯病藥劑的效果試驗(yàn)[J].落葉果樹(shù)，2018，50（6）：49-51.

[5] 孫廣宇，宗兆鋒.植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002.

（責(zé)任編輯：劉昀）