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      骨髓形態(tài)聯(lián)合免疫分型檢測在慢性淋巴細(xì)胞白血病中的應(yīng)用

      2020-10-09 10:39:10周月平
      中國當(dāng)代醫(yī)藥 2020年24期
      關(guān)鍵詞:白血病淋巴細(xì)胞

      周月平

      [摘要]目的 探討骨髓形態(tài)聯(lián)合免疫分型檢測在慢性淋巴細(xì)胞白血病中的應(yīng)用。方法 選取我院2015年5月~2018年12月收治的80例慢性淋巴細(xì)胞白血病患者的臨床資料,均采用流式細(xì)胞術(shù)對骨髓或者外周血標(biāo)本進(jìn)行免疫表型檢測。依據(jù)細(xì)胞形態(tài)學(xué)差異分為典型組(65例)和混合組(15例)。分析骨髓形態(tài)學(xué)特征和免疫分型情況,比較兩組抗原表達(dá)陽性率。結(jié)果 骨髓形態(tài)學(xué)特征方面,所有患者淋巴細(xì)胞比例明顯增高,伴有不同比例的幼稚淋巴細(xì)胞、粒系、紅系及巨核系表現(xiàn)不同程度減少。80例患者中,抗原表達(dá)陽性率由高到低依次為CD19、HLA-DR、CD5、CD20、CD22、CD23、CD38、FMC-7。兩組CD5、CD19、CD20、CD22、CD23、FMC-7和HLA-DR陽性表達(dá)率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但混合組CD38的陽性表達(dá)率高于典型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 慢性淋巴細(xì)胞白血病的臨床檢查中,骨髓形態(tài)聯(lián)合免疫分型檢測具有一定的診斷和鑒別效果,但仍需進(jìn)一步探究證實(shí)。

      [關(guān)鍵詞]白血病;淋巴細(xì)胞;免疫分型;骨髓形態(tài)

      [中圖分類號(hào)] R44 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? ? ? ?[文章編號(hào)] 1674-4721(2020)8(c)-0158-03

      [Abstract] Objective To explore the application of bone marrow morphology combined with immunotyping in chronic lymphocytic leukemia. Methods From May 2015 to December 2018, 80 patients with chronic lymphocytic leukemia admitted to our hospital were tested for immunophenotypes in bone marrow or peripheral blood samples by flow cytometry. Immunophenotype detection was performed on bone marrow or peripheral blood samples by flow cytometry. According to the cell morphology, they were divided into typical group (65 cases) and mixed group(15 cases). The morphological characteristics and immunotyping of bone marrow were analyzed, and the positive rates of antigen expression in the two groups were compared. Results In terms of the morphological characteristics of bone marrow, the proportion of lymphocytes increased significantly in all patients, accompanied by different proportions of juvenile lymphocytes, granulocytes, red lines and megakaryons showed different degrees of decrease. Among the 80 patients, the positive rates of antigen expression were CD19, HLA-DR, CD5, CD20, CD22, CD23, CD38 and FMC-7 in descending order. There were no statistically significant differences in the positive expression rates of CD5, CD19, CD20, CD22, CD23,F(xiàn)MC-7and HLA-DR between the two groups (P>0.05), but the positive expression rate of CD38 in the mixed group was higher than that in the typical group, the difference was statistically significant (P<0.05). Conclusion In the clinical examination of chronic lymphocytic leukemia, bone marrow morphology combined with immunotyping has certain diagnostic and differential effects, but it still needs to be further confirmed.

      [Key words] Leukemia; Lymphocyte; Immunotyping; Bone marrow morphology

      白血病是臨床致死率最高的疾病之一,是世界各國衛(wèi)生組織高度關(guān)注的疾病類型。慢性淋巴細(xì)胞白血病是淋巴細(xì)胞的惡性增殖性疾病,在臨床上并不少見,具有一定的發(fā)病率,其主要特點(diǎn)為看似成熟的小淋巴細(xì)胞聚集在了外周血液、骨髓、外周淋巴器官[1]。近年來,慢性淋巴細(xì)胞白血病的發(fā)病率逐年上升,嚴(yán)重威脅到人類的身體健康和生命安全。因此,加強(qiáng)對該病的檢測研究,對臨床診治和預(yù)后的改善有十分積極的意義[2]。骨髓形態(tài)檢測和免疫分型檢測在淋巴細(xì)胞惡性增生性疾病的檢測中已被廣泛使用,取得了良好的檢測效果。但是從臨床關(guān)于慢性淋巴細(xì)胞白血病的檢測研究中,關(guān)于骨髓形態(tài)學(xué)聯(lián)合免疫分型檢測的報(bào)道并不多見,二者聯(lián)合檢測的價(jià)值如何,仍舊有待進(jìn)一步深入探究[3]。對于慢性淋巴細(xì)胞白血病患者而言,科學(xué)有效地檢測直接影響著治療的效果和預(yù)后的改善,加強(qiáng)對骨髓形態(tài)聯(lián)合免疫分型檢測的應(yīng)用研究至關(guān)重要[4]。為此,本研究收集慢性淋巴細(xì)胞白血病患者臨床資料,通過對骨髓形態(tài)聯(lián)合免疫分型檢測的價(jià)值展開分析,旨在為臨床診治提供理論參考,現(xiàn)報(bào)道如下。

      1資料與方法

      1.1一般資料

      選取我院2015年5月~2018年12月收治的80例慢性淋巴細(xì)胞白血病患者,按照細(xì)胞形態(tài)學(xué)差異分為典型組(65例)和混合組(15例)。典型組中,男35例(53.84%),女30例(46.16%);年齡28~87歲,平均(51.65±2.38)歲?;旌辖M中,男9例(60.00%),女6例(40.00%);年齡29~88歲,平均(51.72±2.42)歲。兩組患者一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)臨床癥狀及外周血淋巴細(xì)胞、特征性淋巴細(xì)胞形態(tài)學(xué)確診為慢性淋巴細(xì)胞白血病;②患者年齡≥20歲;③入組者一般資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):①重要臟器功能受損,生命體征異常波動(dòng);②合并其他類型白血病;③認(rèn)知水平有限,配合度差;④中途退出。

      1.2方法

      兩組患者均進(jìn)行骨髓形態(tài)學(xué)和免疫分型檢查。(1)骨髓形態(tài)學(xué)檢查[5-6]:抽取的骨髓組織迅速涂片3~5張,涂片制成后應(yīng)迅速扇干進(jìn)行吉姆薩染色,每份骨髓涂片分出200~500個(gè)有核細(xì)胞,髓涂片有骨髓小粒、鏡下可見骨髓中特有的細(xì)胞表明取材良好,如巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞等。除骨髓片外,應(yīng)同時(shí)附2~3張血片和病歷摘要一份,由專業(yè)的人員進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析,低倍鏡檢查:①觀察取材、涂片、染色情況。②根據(jù)成熟紅細(xì)胞與有核細(xì)胞之比來判斷骨髓增生程度。③觀察圖片中有無特殊異常細(xì)胞。④低倍鏡計(jì)數(shù)全片巨核細(xì)胞數(shù)量。嚴(yán)格按照慢性淋巴細(xì)胞白血病的診斷方式進(jìn)行確診。(2)免疫分型檢查:取患者肝素抗凝的骨髓液和外周的血液3~5 ml,通過淋巴細(xì)胞分離液分離獲得單個(gè)細(xì)胞核,采用專門的儀器檢測單克隆抗體,抗體類型有:CD5、CD19、CD20、CD22、CD23、FMC-7和HLA-DR、CD38。陽性標(biāo)準(zhǔn):白血病細(xì)胞表面抗原陽性率≥20%為陽性。

      1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

      采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用百分比(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2結(jié)果

      2.1骨髓形態(tài)學(xué)特征

      所有患者骨髓象增生度均達(dá)活躍-極度活躍,淋巴細(xì)胞比例明顯增高,多為類似成熟的小淋巴細(xì)胞,伴有不同比例的幼稚淋巴細(xì)胞、粒系、紅系及巨核系表現(xiàn)不同程度減少。

      2.2免疫分型分析

      80例患者中,抗原表達(dá)陽性率,CD5為90.00%,CD19為97.50%,CD20為80.00%,CD22為77.50%,CD23為67.50%,F(xiàn)MC-7為15.00%,HLA-DR為93.75%,CD38為36.25%。

      2.3兩組抗原表達(dá)陽性率的比較

      典型組和混合組患者的CD5、CD19、CD20、CD22、CD23、FMC-7和HLA-DR陽性表率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?;旌辖MCD38陽性表達(dá)率高于典型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

      3討論

      慢性淋巴細(xì)胞白血病是一種異質(zhì)性較大的成熟B淋巴細(xì)胞腫瘤,表現(xiàn)為肝脾淋巴結(jié)腫大和外周血中多見表達(dá)CD5+的淋巴細(xì)胞。慢性淋巴細(xì)胞白血病在西方人群較常見,年發(fā)病率約5/10萬,但在亞洲人群的發(fā)病率則明顯低于白種人,提示了慢性淋巴細(xì)胞白血病的發(fā)生過程中存在種族差異[7]。有些研究還發(fā)現(xiàn),亞洲國家慢性淋巴細(xì)胞白血病患者的分子遺傳學(xué)特征,如免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgVH)突變情況和西方國家患者明顯不同,這意味著亞洲慢性淋巴細(xì)胞白血病患者可能有獨(dú)特的臨床和分子遺傳學(xué)特點(diǎn)[8]。根據(jù)幼稚淋巴細(xì)胞在淋巴細(xì)胞中所占的不同比例可將慢性淋巴細(xì)胞白血病分為3種亞型:①典型慢性淋巴細(xì)胞白血病,90%以上為類似成熟的小淋巴細(xì)胞;②慢性淋巴細(xì)胞白血病伴隨幼淋細(xì)胞增多,幼稚淋巴細(xì)胞10%~54%;③混合細(xì)胞型,有不同比例的不典型淋巴細(xì)胞,幼稚淋巴細(xì)胞<10%。本組80例慢性淋巴細(xì)胞白血病患者中65例為典型慢性淋巴細(xì)胞白血病,形態(tài)學(xué)表現(xiàn)以體積較小的類似成熟小淋巴細(xì)胞為主,15例為混合型慢性淋巴細(xì)胞白血病,幼稚細(xì)胞胞體較大,核漿比減低,胞漿呈不同程度嗜堿性。

      外周血液/骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查是慢性淋巴細(xì)胞白血病最基本的診斷方式。細(xì)胞免疫分型是斷定血液惡性腫瘤的重要參考之一,對于慢性淋巴細(xì)胞的斷定、預(yù)后等有著重要的作用。慢性淋巴細(xì)胞白血病屬于B淋巴細(xì)胞腫瘤[9-11],主要臨床特點(diǎn)是CD5為陽性細(xì)胞,當(dāng)CD5+、CD10+共同表達(dá)CD23、CD20,對于CD22弱化表達(dá),并且不表達(dá)出CD79b,F(xiàn)MC7。本研究中,慢性淋巴細(xì)胞白血病抗原表達(dá)陽性最高的是CD19,然后依次是HLA-DR、CD5、CD20、CD22、CD23、CD38,說明慢性淋巴細(xì)胞白血病可同時(shí)表達(dá)CD19、CD5、CD20、CD22,這些指標(biāo)均可用于慢性淋巴細(xì)胞白血病的判定。通常情況下,CD5為該疾病的主要特征,但并不排除CD5結(jié)果為陰性慢性淋巴細(xì)胞白血病患者的存在[12-14]。據(jù)相關(guān)報(bào)道指出,也有7%~20%的患者不表達(dá)CD5[15-16],該結(jié)論和本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)吻合,本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有8例為陰性。因此對CD5呈陰性且CD19和CD20為陽性的患者進(jìn)行診斷時(shí),應(yīng)聯(lián)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)、遺傳學(xué)和臨床表現(xiàn)等影響因素,以提高診斷準(zhǔn)確性[17]。有學(xué)者在研究中發(fā)現(xiàn)[18],CD38陽性表達(dá)者無進(jìn)展生存期明顯短于CD38陰性表達(dá)者,對藥物敏感度低,疾病進(jìn)展快,治療效果有限。由此可見典型的慢性淋巴細(xì)胞白血病患者預(yù)后良好,臨床給予骨髓形態(tài)聯(lián)合免疫分型監(jiān)測,對于疾病治療可提供一定的指導(dǎo)意義。

      綜上所述,在慢性淋巴細(xì)胞白血病中骨髓形態(tài)聯(lián)合免疫分型檢測的應(yīng)用,能夠?yàn)榧膊〉脑\斷檢查提供參考價(jià)值。當(dāng)然本次研究時(shí)長和樣本數(shù)量存在局限性,所得結(jié)論可信度有限,應(yīng)在后期適當(dāng)增加病例數(shù),延長研究時(shí)長,以獲得更具參考價(jià)值的研究結(jié)果。

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