不規(guī)則抗體篩查弱陽性結(jié)果對(duì)臨床輸血的意義

蔡娟 孫紅

隨著輸血醫(yī)學(xué)理念的發(fā)展, 臨床輸血安全日益得到關(guān)注，輸血前不規(guī)則抗體的篩查變得更加重要，臨床輸血技術(shù)規(guī)范[1]也明確規(guī)定對(duì)于有輸血史及妊娠史的患者輸血前要求進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查。并非所有抗體篩查鑒定工作都是簡(jiǎn)單而明確的，在臨床工作中由于諸多因素導(dǎo)致抗體篩查結(jié)果常常出現(xiàn)假陽性、弱陽性。一些醫(yī)院，特別是基層醫(yī)院對(duì)此項(xiàng)技術(shù)的開展還不成熟，對(duì)抗體篩查弱陽性結(jié)果也認(rèn)識(shí)不足。目前有關(guān)弱陽性抗篩結(jié)果的報(bào)道很少，鑒于此，本研究收集本院患者不規(guī)則抗體篩查弱陽性結(jié)果，并分析其特異性分布及可能的原因，希望為輸血工作者提供借鑒。

資料與方法

1 研究對(duì)象 選取2017年7月～2019年6月本院不規(guī)則抗體篩查結(jié)果凝集強(qiáng)度≤1+弱陽性病例71例，其中男31例，女40例，年齡分布在12～82歲。

2 試劑和儀器 抗體篩選紅細(xì)胞試劑盒（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）；十六系抗體譜紅細(xì)胞（荷蘭sanquin公司）；抗人球蛋白（IgG/C3d）檢測(cè)卡、AUTOVUE全自動(dòng)血型及配血分析系統(tǒng)（美國Ortho公司），01-BV-7212離心機(jī)（美國Ortho）和Heat Block-32免疫微柱孵育器（美國Ortho）；B600-A低速離心機(jī)（北京白洋醫(yī)療器械有限公司）；KA-2200血庫專用離心機(jī)（日本久保田（中國）投資有限公司）。

3 方法 采用AUTOVUE全自動(dòng)血型分析儀進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，操作步驟參照說明書。同時(shí)加做鹽水法不規(guī)則抗體篩查（在各加有患者血漿2滴的3個(gè)潔凈試管中分別加入3%～5%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗篩細(xì)胞1滴后用血型血清學(xué)專用離心機(jī)以1 000 g離心15 s觀察結(jié)果）。不規(guī)則抗體鑒定：①抗人球蛋白法：抗人球蛋白卡每孔加50 μL 1%對(duì)應(yīng)譜細(xì)胞及25 μL的患者血漿，經(jīng)37℃孵育15 min，專用微柱離心機(jī)離心觀察結(jié)果。②鹽水法：標(biāo)記相應(yīng)序號(hào)的16支潔凈試管各加入患者血漿2滴，然后分別加入3%～5% 對(duì)應(yīng)序號(hào)的抗篩譜細(xì)胞1滴，血型血清學(xué)專用離心機(jī)以1 000 g離心15 s觀察結(jié)果。部分抗體鑒定由北京解放軍總院輸血科完成。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 不規(guī)則抗體弱陽性分布情況 共有71 例弱陽性，有輸血史比例高于無輸血史，檢測(cè)出抗體特異性的高達(dá)73%，具體見表1。

2 不同年齡、性別人群不規(guī)則抗體弱陽性分布情況不規(guī)則抗體弱陽性人群中，女性陽性率高于男性，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；不規(guī)則抗體的弱陽性率也與年齡無關(guān)（P＞0.05），見表2。

表1 不規(guī)則抗體弱陽性分布情況

表2 不同年齡、性別人群不規(guī)則抗體弱陽性率比較

3 抗體特異性分布情況 檢出特異性抗體52例，其中Rh血型系統(tǒng)13例，占25%；P和MNSs血型系統(tǒng)各10例，均占19.2%；自身抗體6例，占11.5%；Duffy系統(tǒng)抗體4例，占7.7%；Lewis血型系統(tǒng)、Kidd血型系統(tǒng)和抗-HI 各2例，均占3.8%；聯(lián)合抗體3例，占5.8%，具體見表3。

討 論

輸血前進(jìn)行血型不規(guī)則抗體篩選，選擇無相應(yīng)抗原的血液輸注對(duì)精準(zhǔn)輸血和提高輸血療效具有重要的意義[2,3]。 不規(guī)則抗體篩查結(jié)果經(jīng)常出現(xiàn)弱陽性，而很多弱陽性結(jié)果復(fù)查后為假陽性。這種現(xiàn)象致使有的檢驗(yàn)者認(rèn)為弱陽性結(jié)果基本上以假陽性為主，沒有復(fù)查必要，更不需要進(jìn)一步鑒定，直接判定為假陽性，沒有選擇相應(yīng)紅細(xì)胞輸注，造成臨床輸血患者出現(xiàn)無效輸血或溶血性反應(yīng)。確實(shí)有部分原因使抗篩假陽性以弱陽性結(jié)果出現(xiàn)，如文獻(xiàn)報(bào)道某些廠家的微柱卡假陽性率較高，原因可能為纖維蛋白原干擾、保存過程中的細(xì)胞變形或細(xì)胞碎片增多等抗篩細(xì)胞的自身問題[4]。也可能與患者自身疾病有關(guān)，特別是自身免疫性疾病患者的自身抗體、藥物性抗體，或患者血漿中某些物質(zhì)與抗人球蛋白卡中物質(zhì)反應(yīng)所致[5]。許多醫(yī)院進(jìn)行了意外抗體篩查，但未能進(jìn)一步進(jìn)行抗體鑒定，直接判斷弱陽性為假陽性或無意義。然而并非所有弱陽性結(jié)果都是假陽性，有很多實(shí)驗(yàn)人員沒有重視弱陽性結(jié)果，甚至認(rèn)為弱陽性對(duì)輸血意義不大。本研究分析71例弱陽性抗篩結(jié)果和進(jìn)一步抗體鑒定結(jié)果，提示抗篩弱陽性結(jié)果的重要性，為輸血工作者提供參考。

根據(jù)本文資料，不規(guī)則抗體篩查弱陽性結(jié)果女性例數(shù)高于男性，不同年齡段的弱陽性率不同，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與張玉萍報(bào)道的無效輸血與性別、年齡無關(guān)一致[6]。由于本資料弱陽性樣本量較小，對(duì)結(jié)果一般性有所影響，因此對(duì)于不規(guī)則抗體弱陽性與性別、年齡、輸血史的關(guān)系，仍需要臨床進(jìn)一步擴(kuò)大樣本研究容量，為臨床評(píng)估提供更加嚴(yán)謹(jǐn)、科學(xué)的參考依據(jù)。弱陽性標(biāo)本檢出特異性抗體52例，包括P、Rh、MNSs、Duffy、Lewis和Kidd血型系統(tǒng)、抗-HI、自身抗體、聯(lián)合抗體等。弱陽性標(biāo)本檢出抗體的種類與文獻(xiàn)報(bào)道的抗篩檢出抗體種類基本一致[2,3]。這些出現(xiàn)弱陽性的抗體，如抗P、抗M，其抗體性質(zhì)多為IgM型，在微柱介質(zhì)中凝集強(qiáng)度較弱，而其它抗體可能與劑量效應(yīng)、低效價(jià)抗體有關(guān)。

Rh，MNS，Kidd，Duffy血型系統(tǒng)的抗體易出現(xiàn)“劑量效應(yīng)”現(xiàn)象[7]。其中，抗-E、抗-C、抗-M、抗-S更易表現(xiàn)出“劑量效應(yīng)”[4]。某些抗篩細(xì)胞的抗原譜設(shè)計(jì)不全或?yàn)殡s合子，就會(huì)出現(xiàn)意外抗體漏檢或凝集較弱[8]。劉自強(qiáng)報(bào)道某些抗篩細(xì)胞在檢測(cè)抗-Fyb、-Jka、-S時(shí), 當(dāng)抗體效價(jià)低于1∶4時(shí)存在漏檢可能[9]。人產(chǎn)生不規(guī)則抗體后，若沒有繼續(xù)受到免疫刺激，抗體效價(jià)會(huì)逐漸降低，但在再次輸入有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞后，會(huì)迅速激活記憶細(xì)胞產(chǎn)生大量IgG抗體，造成遲發(fā)型溶血。關(guān)于低效價(jià)不規(guī)則抗體，近年來諸多文獻(xiàn)報(bào)道其漏檢是輸血無效的原因之一[9,10]。李海云等報(bào)道71例低效價(jià)不規(guī)則抗體陽性分布與本文弱陽性標(biāo)本抗體特異性分布一致[10]。本資料中抗篩弱陽性標(biāo)本進(jìn)行抗體鑒定還會(huì)出現(xiàn)與譜細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果全陰性的現(xiàn)象，可能為患者存在低頻抗原對(duì)應(yīng)的抗體或效價(jià)低、活性弱的抗體。還有部分弱陽性標(biāo)本抗體特異性不明確，封彥楠[5]等對(duì)同種抗體特異性不明確的81名患者血清學(xué)特征分析及紅細(xì)胞輸注效果評(píng)價(jià)，認(rèn)為抗體特異性不明確原因可能為以下四種：（1）低效價(jià)同種抗體；（2）無法明確抗體特異性；（3）特異性抗體聯(lián)合未知抗體；（4）疑似某種特異性抗體。對(duì)于弱陽性標(biāo)本，須同時(shí)用鹽水法和微柱凝膠法做交叉配血試驗(yàn)，選擇相合的血液輸注。

臨床上經(jīng)常有患者存在不明原因的貧血，或輸血后無法解釋Hb不升或下降的現(xiàn)象，大量研究表明，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是輸血無效及溶血性輸血不良反應(yīng)的主要原因[10]。如果忽視弱陽性結(jié)果，有的患者即使某次輸血沒有產(chǎn)生溶血反應(yīng)或產(chǎn)生不明顯的反應(yīng)，當(dāng)患者再次輸血接受免疫刺激，會(huì)誘導(dǎo)潛在抗體與相應(yīng)抗原發(fā)生免疫記憶反應(yīng)，產(chǎn)生大量抗體，出現(xiàn)紅細(xì)胞輸注無效、遲發(fā)型溶血性輸血反應(yīng)，并且會(huì)加重原發(fā)病甚至威脅生命。應(yīng)選擇適宜方式篩查不規(guī)則抗體，重視弱陽性結(jié)果，以避免漏檢致受血者輸入含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞，才能保證臨床輸血安全、提高輸注效果[11]。

（本組研究資料得到北京解放軍總醫(yī)院第一醫(yī)學(xué)中心輸血科的幫助，在此致謝?。?/p>

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突