陳莉杰

(湖州婦幼保健院乳腺科，浙江 湖州 313000)

乳腺癌是全球范圍內(nèi)嚴重威脅女性身心的一種惡性腫瘤，臨床調(diào)查顯示其發(fā)病率呈不斷上升趨勢[1]。隨著人們健康意識的不斷提高，乳腺鉬靶X線、MRI、乳腺超聲、乳房自檢等乳腺癌診斷策略使得越來越多女性接受，從而為早發(fā)現(xiàn)和早治療提供了更多可能。三陰性乳腺癌是一種特殊類型的乳腺癌，占乳腺癌總數(shù)的15%～20%，其表現(xiàn)為人類表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor，HER2)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)和雌激素受體(estrogen receptor，ER)均表達為陰性[2]。三陰性乳腺癌具有侵襲性強、惡性程度高、容易出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移及預后不佳等特點，故而早發(fā)現(xiàn)、早治療尤為重要。Ki67是細胞周期活性相關(guān)蛋白，與細胞生長分數(shù)具有良好相關(guān)性，并且在多種惡性腫瘤中均有表達[3]。本文探討Ki67在三陰性乳腺癌中的表達及其與臨床預后相關(guān)性分析，旨在為臨床診斷和治療三陰性乳腺癌提供參考。

1資料與方法

1.1 一般資料

收集湖州婦幼保健院于2015年5月至2017年5月收治的三陰性乳腺癌患者113例。納入標準：①經(jīng)穿刺活檢或乳腺癌根治術(shù)，且經(jīng)病理證實為三陰性乳腺癌；②術(shù)前均未行放化療和內(nèi)分泌治療；③均為女性。排除標準：①其他類型乳腺癌或惡性腫瘤者；②手術(shù)禁忌者；③精神疾病者。113例患者年齡32～78歲，平均年齡(58.93±7.25)歲；臨床分期：Ⅰ期18例，Ⅱ期54例，Ⅲ期41例；平均腫瘤大小(3.25±0.87)cm。

1.2方法

1.2.1 免疫組化法測定Ki67表達

取所有患者乳腺癌組織標本，經(jīng)10%甲醛溶液固定24h、脫水、石蠟包埋，以免疫組化法測定Ki67表達。其中以PBS溶液代替一抗作為陰性對照，以已知陽性的乳腺癌組織標本作為陽性對照組。

1.2.2 結(jié)果判定

Ki67表達于細胞核，染色后以細胞核內(nèi)棕色顆粒為陽性，取5個高倍視野，每個視野計數(shù)100個，根據(jù)Ki67陽性細胞數(shù)占細胞總數(shù)的比例判定其表達情況：①(-)：所占比例<15%；②(+)：所占比例≥15%且<30%；③(++)：所占比例≥30%且<45%；④(+++)：所占比例≥45%且<60%；⑤(++++)：所占比例≥60%。

1.3 隨訪

所有患者均隨訪至2020年5月31日，采用門診定期隨訪復查方式，以隨訪末或死亡為隨訪終點，觀察3年無病生存期(disease free survival，DFS)和總生存期(overall survival，OS)，其中以手術(shù)確診之日至出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移、局部或區(qū)域復發(fā)的時間為DFS，以手術(shù)確診之日至由于任何原因造成患者死亡的時間為OS。

1.4 統(tǒng)計學方法

運用統(tǒng)計學軟件SPSS 22.0軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用例數(shù)和百分比表示，組間比較采用卡方檢驗，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1 Ki67在三陰性乳腺癌中表達情況

113例三陰性乳腺癌組織中，其中Ki67陽性表達患者69例，陽性表達率為61.06%；Ki67陰性表達患者44例，陰性表達率為38.94%，見表1。

表1 Ki67在三陰性乳腺癌中表達情況

2.2 Ki67表達與臨床病理因素的關(guān)系

Ki67陽性表達與年齡、臨床分期和腫瘤大小無顯著相關(guān)性(均P>0.05)，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者Ki67陽性表達率顯著高于無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 Ki67表達與臨床病理因素的關(guān)系[n(%)]

2.3 Ki67表達與患者3年DFS關(guān)系

三陰性乳腺癌113例患者至末次隨訪時，3年DFS患者87例，占76.99%；3年OS患者97例，占85.84%。Ki67陰性表達3年DFS患者39例，占88.64%，Ki67陽性表達3年DFS患者48例，占69.57%，Ki67陰性表達者3年DFS率顯著高于Ki67陽性表達者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.019)，見表3。

表3 Ki67表達與患者3年DFS關(guān)系[n(%)]

2.4 Ki67表達與患者3年OS關(guān)系

Ki67陰性表達3年OS患者42例，占95.45%，Ki67陽性表達3年DFS患者55例，占79.71%，Ki67陰性表達者3年OS率顯著高于Ki67陽性表達者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.019)，見表4。

表4 Ki67表達與患者3年OS關(guān)系

3 討論

3.1 三陰性乳腺癌治療的難點

乳腺癌是高度異質(zhì)性的一種惡性腫瘤，在生物學行為、免疫表型及組織學形態(tài)等發(fā)面存在較大差異。三陰性乳腺癌以浸潤性導管癌為主，呈高組織學分級，腫瘤侵襲性強，很容易出現(xiàn)局部復發(fā)及浸潤轉(zhuǎn)移，且該類患者預后較差[4]。目前，對三陰性乳腺癌患者無法針對PR受體和ER受體陽性進行內(nèi)分泌治療以及HER2陽性的靶向治療，臨床上三陰性乳腺癌治療方案較少[5]。因此，三陰性乳腺癌患者應用內(nèi)分泌治療、放療和化療等方法效果并不十分理想，而其中化療是唯一的全身性治療，乳腺癌治療指南中尚無針對三陰性乳腺癌制定標準的治療方案[6]。

3.2 Ki67與三陰性乳腺癌的關(guān)系

臨床研究報道顯示，三陰性乳腺癌分子生物學特征對制定有效治療方案以及判斷腫瘤預后具有重要意義[7]。Ki67主要是細胞核內(nèi)分裂增殖相關(guān)蛋白，并且是具有增殖活性的細胞核中表達的一種核抗原，組成包含15個外顯子和14個內(nèi)含子，分子結(jié)構(gòu)具有特異性。Ki67抗原在有絲分裂經(jīng)磷酸化及去磷酸化，在細胞周期的G0期不表達，而在細胞周期的G1、S、G2和M期均有不同程度表達。Ki67在細胞核內(nèi)隨細胞周期改變，定位形式復雜，特異性明顯。Ki67在腫瘤細胞增殖活性判斷中具有較高的靈敏度，能夠準確反映細胞增殖狀態(tài)，以及與腫瘤發(fā)生、發(fā)展及增殖轉(zhuǎn)移有關(guān)[8]。細胞增殖失控且向周圍侵襲轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最基本的生物學特性，Ki67表達越高，則細胞增殖活性也越高。本文研究結(jié)果顯示，113例三陰性乳腺癌組織中，其中Ki67陽性表達率為61.06%。Ki67陽性表達與患者年齡、臨床分期和腫瘤大小無顯著相關(guān)性(P>0.05)，而腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者Ki67陽性表達率顯著高于無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。研究報道顯示Ki67表達在惡性腫瘤中遠高于正常組織，且其與惡性腫瘤發(fā)展和預后密切相關(guān)[9]。多數(shù)研究證實Ki67表達程度在乳腺良、惡性腫瘤鑒別中具有重要作用，且可作為判斷腫瘤侵襲能力的新型的一種分子蛋白標志物[10]。此外，本研究結(jié)果結(jié)果還發(fā)現(xiàn)Ki67陰性表達者3年DFS率、3年OS率均顯著高于Ki67陽性表達者(P<0.019)，提示Ki67表達與患者預后密切相關(guān)，Ki67陽性表達越高生存越短。Pan等研究發(fā)現(xiàn)，三陰性乳腺癌患者Ki-67高表達與復發(fā)風險和預后相關(guān)，是DFS或OS的獨立變量，這與本研究結(jié)果相似[11]。

綜上所述，Ki67在三陰性乳腺癌中高表達，且與預后密切相關(guān)，Ki67陽性表達率越高生存率越低。