徐輝 王麗霞 李生龍
摘要 為進(jìn)一步確診臨床發(fā)病雞的病原,無(wú)菌條件下取肝臟,進(jìn)行細(xì)菌的分離、培養(yǎng)及鑒定。鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果顯示,分離菌株在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上出現(xiàn)帶有金屬光澤的菌落特征,在麥康凱培養(yǎng)基顯示出粉紅色菌落的特征。結(jié)果表明,7只患病雞均為大腸桿菌感染。然后,針對(duì)分離純化的菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。西藥藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,硫酸慶大霉素、阿米卡星、硫酸新霉素、安普霉素均為高敏,阿莫西林耐藥,而鹽酸多西環(huán)素和恩諾沙星為中敏。中藥藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,四黃止痢顆粒和楊樹(shù)花口服液對(duì)分離菌株比較敏感。該試驗(yàn)結(jié)果可為大腸桿菌病的臨床用藥提供參考。
關(guān)鍵詞 病雞;大腸桿菌;分離與鑒定;藥敏試驗(yàn);藥物篩選
中圖分類號(hào) S858.31 ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A ?文章編號(hào) 0517-6611(2020)19-0084-05
doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2020.19.023
Abstract In order to further confirm the pathogen of diseased chicken in the clinic, the liver was collected under aseptic conditions to make the laboratory isolation,culture and identification of bacteria. The results of different culture media showed that the isolated strains showed the colony characteristic of metallic luster on EMB medium, ?and the MAC medium showed the characteristics of pink colony. The results showed that all seven infected chicken were infected with Escherichia coli. The drug sensitivity test results of western medicine showed that the gentamycin sulfate, amikacin, neomycin sulfate, and apramycin were highly sensitive to isolated strains, amoxicillin was tolerant to isolated strains, and doxycycline hydrochloride and enrofloxacin were intermediately sensitive to isolated strains. The sensitive test results of traditional Chinese medicine showed Sihuang Zhili Granules and Yangshuhua Oral Liquid were more sensitive to isolated strains. This experimental results could provide references for the clinical medication of colibacillosis.
Key words Sick chicken;Escherichia coli;Separation and identification;Drug sensitivity test;Drug screening
作者簡(jiǎn)介 徐輝(1980—),男,安徽宿州人,獸醫(yī)師,從事畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣、動(dòng)物檢疫和動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督執(zhí)法工作。
收稿日期 2020-07-14
大腸桿菌是微生物界普遍存在的一種微生物,它主要寄生于人和動(dòng)物腸道中,一般分為致病性大腸桿菌和非致病性大腸桿菌,一般正常的禽類體內(nèi)都會(huì)存在大腸桿菌潛在基因。大腸桿菌能引起禽類多種疾病,每年對(duì)養(yǎng)殖業(yè)和畜牧業(yè)都會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,隨著養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)抗生素的普遍應(yīng)用,大腸桿菌不斷產(chǎn)生耐藥性,已經(jīng)成為社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)之一。大腸桿菌病的主要表現(xiàn)為精神頹廢、不能長(zhǎng)時(shí)間站立、不食或厭食、頭部耷拉、呆立或蹲伏不動(dòng)、肛門周圍羽毛沾有綠色或淺黃色稀糞。當(dāng)雞體的免疫系統(tǒng)下降或者雞體的皮膚防御系統(tǒng)遭到破壞,就會(huì)傳染給其他雞群,導(dǎo)致大腸桿菌的大量繁殖,從而引發(fā)大腸桿菌類似疾病。病雞排出的細(xì)菌,也會(huì)經(jīng)過(guò)空氣、糞便、飲水等方式傳染給健康雞群[1]。大腸桿菌這類疾病還是以預(yù)防為主,在養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)注意場(chǎng)地的衛(wèi)生環(huán)境,同時(shí)加強(qiáng)養(yǎng)殖場(chǎng)的飼養(yǎng)管理和飲水衛(wèi)生,除了對(duì)雞群進(jìn)行科學(xué)的飼養(yǎng)管理、做好日常清潔、消毒等工作外,合理使用藥物也是防治該病的關(guān)鍵。
由于大腸桿菌對(duì)多種青霉素、磺胺類、氨基糖苷類都比較敏感[2],所以社會(huì)廣泛使用敏感的抗生素對(duì)大腸桿菌來(lái)進(jìn)行治療,這些年來(lái)由于抗生素的不正當(dāng)使用,不僅造成耐藥菌株的不斷增加和抗生素的極大浪費(fèi),同時(shí)延長(zhǎng)的治療時(shí)間也給養(yǎng)殖業(yè)和畜牧業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),所以在臨床上合理使用抗生素非常有必要,同時(shí)中藥制劑在臨床上的應(yīng)用研究也不斷深入,如果篩選出有效的抗菌組方,就能減少抗生素給社會(huì)帶來(lái)的負(fù)面影響。
目前獸藥藥物的殘留問(wèn)題也越來(lái)越受到人們的關(guān)注,已經(jīng)成為社會(huì)熱點(diǎn)問(wèn)題,尤其是肉雞與蛋雞的藥物殘留問(wèn)題一直是國(guó)家有關(guān)部門嚴(yán)格監(jiān)察的問(wèn)題,鑒于目前養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)抗生素的廣泛使用,而蛋雞在產(chǎn)蛋期患病可用藥物較少,養(yǎng)殖戶迫于對(duì)疾病的治療和利益的追求,會(huì)選擇一些蛋雞禁用抗生素來(lái)進(jìn)行治療,從而導(dǎo)致動(dòng)物源性食品質(zhì)量的不安全,還有患病動(dòng)物長(zhǎng)期服用抗生素可在體內(nèi)殘留累積藥殘,人類食用含抗生素殘留的動(dòng)物產(chǎn)品也會(huì)引起過(guò)敏反應(yīng),間接致病,嚴(yán)重時(shí)甚至能引起人類的生命安全。盡管抗生素在很大程度上能起到很好的治療效果,但長(zhǎng)期使用抗生素會(huì)使雞大腸桿菌的耐藥菌種不斷出現(xiàn)和耐藥譜的不斷增加[3],治療效果事倍功半,而中藥由于無(wú)耐藥性[4],近年來(lái)在治療禽類大腸桿菌病癥中通過(guò)獸醫(yī)工作者的大量試驗(yàn)已經(jīng)取得顯著的效果。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 病料來(lái)源。
在實(shí)習(xí)期與安徽華澳生物技術(shù)有限公司合作的數(shù)個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)送來(lái)數(shù)只疑似患有大腸桿菌疾病的病雞,其中包括安徽省肥西縣、六安市、亳州市、池州青陽(yáng)縣、宿州市等。
1.1.2 臨床診斷。
對(duì)送檢病雞的精神狀況、采食飲水情況以及糞便情況進(jìn)行觀察,主要表現(xiàn)為不食或厭食、精神萎靡不振、頭部耷拉呆立或蹲伏不動(dòng)、肛門周圍羽毛沾有綠色或淺黃色稀糞,不能長(zhǎng)時(shí)間站立。在無(wú)菌條件下對(duì)患雞進(jìn)行解剖,觀察病變的器官組織。
1.1.3 試驗(yàn)耗材與儀器。
試驗(yàn)所用耗材有解剖剪、接種環(huán)、消毒棉簽、消毒鑷子、酒精燈、滅菌試管、培養(yǎng)皿、牛津杯、移液槍及槍頭等;試驗(yàn)所用儀器有分析電子天平、百分電子天平、數(shù)控超聲波清洗器、高壓蒸汽滅菌鍋、電熱恒溫培養(yǎng)箱、電熱鼓風(fēng)干燥箱、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、水浴加熱鍋、水浴恒溫振蕩器、超凈工作臺(tái)等。
1.1.4 試劑。
生理鹽水、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MAC)、伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EMB)、三糖鐵瓊脂(TSI)、大腸桿菌生化鑒定管、營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、革蘭氏染液等。
1.1.5 病原菌獲取。
在實(shí)習(xí)期間安徽華澳生物技術(shù)有限公司各地區(qū)技術(shù)員從其負(fù)責(zé)區(qū)域養(yǎng)殖場(chǎng)送來(lái)數(shù)只疑似患有大腸桿菌病的病雞,經(jīng)剖檢觀察病雞初步診斷是否患有大腸桿菌癥狀,在無(wú)菌環(huán)境下取其病變的器官(如肝臟、心臟或分泌物),并將對(duì)應(yīng)的病雞做好標(biāo)記,然后將采集的病料及時(shí)放于冰箱中冷藏備用。
1.1.6 藥品配制。
參照CLSI標(biāo)準(zhǔn)、獸藥國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和中華人民共和國(guó)獸藥典(2015年版)一部確定各種抗生素母液所用藥物原料的有效含量(或單位效價(jià))及溶劑稀釋劑方法[5]。該試驗(yàn)所制母液的理想濃度為1 024 μg/mL,根據(jù)理論母液濃度計(jì)算出配制100 mL母液所需的原藥質(zhì)量,具體配制方法見(jiàn)表1[6],計(jì)算公式如下:
母液理想濃度=藥物原料質(zhì)量×效價(jià)1 024 μg/mL=100 mL
鴨漿寧:稱取50 g樣品,加入10倍量的水,水浴蒸煮1 h,在同樣條件下提取3次,將3次所得提取液進(jìn)行統(tǒng)一抽濾,然后將其旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至50 mL待用。
大桿康:稱取30 g樣品加入100 mL水,攪拌溶解待用。
楊樹(shù)花口服液:取安徽華澳生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的楊樹(shù)花口服液,搖勻待用。
四黃止痢顆粒:稱取100 g樣品,加入100 mL水,攪拌溶解待用。
在微生物室無(wú)菌環(huán)境下將配制好的藥液分別用無(wú)菌注射器吸取后,再裝入0.22 μm無(wú)菌濾頭進(jìn)行過(guò)濾,然后將過(guò)濾好的藥液分裝到經(jīng)高壓滅菌的離心管中,按壓封緊,用記號(hào)筆標(biāo)記好相應(yīng)藥物,置于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2 方法
1.2.1 病原菌的分離與培養(yǎng)。
將病料從冰箱取出,用滅菌后的解剖剪刀剪去病料表面被污染的部分,再用消毒過(guò)的棉簽沾取病變器官內(nèi)的組織液,分別在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基和伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上面進(jìn)行涂抹,形成十字區(qū)域,接種完成后于恒溫箱37 ℃培養(yǎng)18~24 h,觀察菌落生長(zhǎng)形態(tài)。
1.2.2 病原菌的鏡檢。
采用革蘭氏染色法對(duì)病原菌進(jìn)行染色鏡檢,革蘭氏染色具體步驟如下。
1.2.2.1 初染。點(diǎn)燃酒精燈,將載玻片用洗瓶先沖洗干凈,用吸水紙擦干或自然晾干,再用接種環(huán)從伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基或者麥康凱瓊脂培養(yǎng)基挑取單個(gè)菌落涂抹于載玻片中心區(qū)域,涂抹成薄薄的一層,然后滴加草酸銨結(jié)晶紫染液到涂菌部位,染色2 min后,用洗瓶沖洗數(shù)次。
1.2.2.2 媒染。加碘液,保存1 min,再傾斜載玻片傾去碘液,最后用洗瓶沖洗至無(wú)色。
1.2.2.3 脫色。用吸水紙將載玻片上的水吸干或者自然晾干,然后再用95%乙醇脫色,持續(xù)30 s后立即洗去95%乙醇。
1.2.2.4
復(fù)染。將載玻片上的水自然晾干或用吸水紙吸干,再用番紅復(fù)染色2 min,水洗,最后用吸水紙吸干。
1.2.2.5
結(jié)果觀察。將載玻片涂上香柏油,置于顯微鏡下由低倍切換到高倍鏡觀察。
1.2.3 病原菌的生化鑒定。
選取從麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的粉紅色菌落或者伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的黑色帶有金屬光澤的菌落接種到三糖鐵培養(yǎng)基中恒溫37 ℃培養(yǎng)18~20 h,檢查該菌株對(duì)糖的發(fā)酵能力、是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣,如果有相應(yīng)現(xiàn)象產(chǎn)生,則表明該菌種是大腸桿菌。
1.2.4 大腸桿菌的藥敏試驗(yàn)。
1.2.4.1 菌液的制備。
用接種環(huán)分別挑取EMB培養(yǎng)基上的單個(gè)紫黑色菌落接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)中,在水浴振蕩培養(yǎng)箱中37 ℃恒溫培養(yǎng)8 h左右,然后用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在波長(zhǎng)600 nm處測(cè)定菌液OD值,最好用營(yíng)養(yǎng)肉湯進(jìn)行校零。
①吸取0.5 mL菌液加入到9.5 mL營(yíng)養(yǎng)肉湯中,混勻后檢測(cè)OD600 nm是否介于0.08~0.10。
②根據(jù)測(cè)定數(shù)值結(jié)果,調(diào)整原培養(yǎng)液濃度(用營(yíng)養(yǎng)肉湯稀釋原培養(yǎng)液以降低OD600 nm值或者延長(zhǎng)原培養(yǎng)液的培養(yǎng)時(shí)間來(lái)升高OD600 nm值)。
③用于點(diǎn)板的菌液需在上述步驟稀釋所得的混合液基礎(chǔ)上再稀釋1 000倍或直接使用原培養(yǎng)液稀釋10 000倍。
1.2.4.2 藥物 MIC的測(cè)定。
①無(wú)菌96孔板第1行加入200 μL營(yíng)養(yǎng)肉湯,第2行加入100 μL營(yíng)養(yǎng)肉湯+100 μL制備的菌液,第3~8行加入100 μL營(yíng)養(yǎng)肉湯。
②第3~8行每行第一孔加入一種抗生素母液100 μL,逐次倍比稀釋至第12孔,最后從每行第12孔棄掉100 μL。
③第3~8行每孔加入100 μL制備菌液。
④制備菌液和抗生素上樣完畢后蓋好板蓋,37 ℃恒溫孵育12~20 h后觀察結(jié)果。
結(jié)果判讀:當(dāng)?shù)?行所有孔無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)、第2行所有孔有細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí),第3~8行每行最后一清亮孔所對(duì)應(yīng)的藥物濃度為該藥的MIC。當(dāng)出現(xiàn)跳孔現(xiàn)象,若為單一跳孔,記錄最高M(jìn)IC,若為多處跳孔,則此行無(wú)效,不報(bào)告該種藥物的MIC。當(dāng)?shù)?行有孔出現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象,同樣不應(yīng)該報(bào)告該板所檢測(cè)的各抗菌藥物的MIC。
1.2.4.3 牛津杯法檢測(cè)。
在超凈工作臺(tái)中,打開(kāi)送風(fēng),點(diǎn)燃酒精燈,將普通瓊脂培養(yǎng)基倒入7個(gè)培養(yǎng)皿中并鋪平,待其完全凝固即可,然后,用消毒過(guò)的棉簽沾取每株病原菌于培養(yǎng)皿中輕輕涂抹,呈十字區(qū)域;然后,用記號(hào)筆在培養(yǎng)皿底部分成5塊區(qū)域,每塊區(qū)域分別標(biāo)注為鴨漿寧、大桿康、楊樹(shù)花口服液、四黃止痢顆粒、新霉素(西藥對(duì)照);用消毒過(guò)的鑷子往每塊培養(yǎng)皿上放上5個(gè)滅菌的牛津杯,輕輕按壓,使其與培養(yǎng)皿表面貼合無(wú)空隙[7],分別加入各試驗(yàn)用藥200 μL,完成后將其置于37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10~12 h后再觀察結(jié)果。
1.2.4.4 藥物敏感試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)。
中藥細(xì)菌抑菌圈直徑標(biāo)準(zhǔn)判定如下:若抑菌圈直徑>20 mm,判為極敏;若抑菌圈直徑為15~20 mm,判為高敏;若抑菌圈直徑為10~14 mm,判為中敏;若抑菌圈直徑為0~10 mm,判為低敏;若抑菌圈直徑為0,判為不敏。
2 結(jié)果與分析
2.1 臨床診斷結(jié)果
對(duì)送檢病雞的精神狀況、采食飲水情況及糞便情況進(jìn)行觀察,可見(jiàn)病雞個(gè)別頭部耷拉、精神萎靡、呆立不動(dòng)(圖1A);病雞解剖結(jié)果見(jiàn)圖1B、C。
2.2 病原菌鑒定結(jié)果
經(jīng)選擇性培養(yǎng)基分離培養(yǎng)后,結(jié)果發(fā)現(xiàn)此病菌接種在普通瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)18~24 h,形成圓形、濕潤(rùn)、半透明、隆起的乳白色中等大小菌落;在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上長(zhǎng)出黑色稍凸圓形菌落,直徑大小約2~5 mm,菌落邊緣整齊且表面光滑濕潤(rùn),并帶有金屬光澤(圖2A)[8];在麥康凱培養(yǎng)基上長(zhǎng)出邊緣整齊且表面光滑濕潤(rùn)的粉紅色菌落,直徑2~5 mm圓形凸起(圖2B)[9];然后,再挑取典型的大腸桿菌單株菌落在營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基上傳代培養(yǎng)2~3代,使細(xì)菌生長(zhǎng)穩(wěn)定,狀態(tài)良好。最后,經(jīng)過(guò)肉湯培養(yǎng)的病原菌標(biāo)號(hào)分別為C-1、C-2、C-3、C-4、C-5、C-6、C-7。
2.3 病原菌的鏡檢結(jié)果
經(jīng)鏡檢,病原菌革蘭氏染色結(jié)果為陰性桿菌,如圖3所示。
2.4 病原菌的生化鑒定結(jié)果
通過(guò)對(duì)病原菌進(jìn)行三糖鐵生化鑒定,結(jié)果顯示為斜面和底層產(chǎn)酸,不產(chǎn)硫化氫,靛基質(zhì)試驗(yàn)和甲基紅試驗(yàn)結(jié)果均呈陽(yáng)性,VP試驗(yàn)和西蒙氏檸檬酸鹽試驗(yàn)結(jié)果均呈陰性,符合大腸桿菌生化特性,表明該病原菌為典型的大腸埃希氏菌。
2.5 微量肉湯稀釋法檢測(cè)MIC結(jié)果
用滅菌96孔板測(cè)定
試驗(yàn)分離純化出的7株大腸桿菌,各孔板陰性對(duì)照均未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng),陽(yáng)性對(duì)照的細(xì)菌在孔內(nèi)生長(zhǎng)情況良好,各抗菌藥對(duì)大腸桿菌的MIC(最低抑菌濃度)見(jiàn)表2。
由表2可知,96孔板試驗(yàn)結(jié)果顯示硫酸慶大霉素、阿米卡星、硫酸新霉素和安普霉素對(duì)分離的7株大腸桿菌的MIC值較其他藥物更低。
2.6 牛津杯法檢測(cè)結(jié)果
通過(guò)牛津杯法檢測(cè)試驗(yàn)所選中藥對(duì)7株大腸桿菌的藥敏性[10],結(jié)果見(jiàn)表3、4。
由表3可知,該試驗(yàn)所用中藥對(duì)分離的大腸桿菌菌株都有不同程度的敏感性,其中四黃止痢顆粒、楊樹(shù)花口服液對(duì)每株菌種均具有極高的敏感性,與新霉素的敏感度一致;鴨漿寧和大桿康只對(duì)某些菌株有很高的敏感性。
從大腸桿菌藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果(表4)可知,四黃止痢顆粒和楊樹(shù)花口服液與對(duì)照硫酸新霉素的敏感度相同,均為100%;鴨漿寧和大桿康敏感度低于楊樹(shù)花口服液、四黃止痢顆粒和硫酸新霉素,分別為85.7%和71.4%,由此可見(jiàn)中藥組方優(yōu)先選用楊樹(shù)花口服液和四黃止痢顆粒。
3 討論
3.1 臨床耐藥菌產(chǎn)生的原因
大腸桿菌是一種無(wú)芽孢的革蘭氏陰性菌,常見(jiàn)的腸道感染菌種之一,在正常的雞體內(nèi)也會(huì)存在潛在大腸桿菌,當(dāng)雞體的皮膚防御系統(tǒng)遭到破壞和免疫系統(tǒng)降低時(shí),雞群便會(huì)遭到感染,再傳染給其他雞群,從而誘發(fā)大腸桿菌類疾病。為了能快速控制雞群疾病,養(yǎng)殖場(chǎng)會(huì)優(yōu)先使用新一代抗生素或大劑量、大組方進(jìn)行治療,長(zhǎng)期以往容易導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性。近些年,大腸桿菌的耐藥率和耐藥譜不斷增高,而且目前被發(fā)現(xiàn)的大腸桿菌的血清型有很多種[11],很大程度上增加了獸醫(yī)工作者的工作難度,還間接導(dǎo)致食品安全問(wèn)題的越來(lái)越嚴(yán)重,尤其是蛋雞和肉雞攜帶的耐藥基因會(huì)通過(guò)食物鏈等方式傳給人類[12],危害食品安全和人類健康。該試驗(yàn)結(jié)果顯示各種抗菌藥物對(duì)不同地區(qū)的大腸桿菌病原菌的敏感度不一樣,產(chǎn)生的原因應(yīng)該是與各地區(qū)的用藥史有關(guān),由于檢測(cè)的病雞來(lái)源于不同地區(qū),所以導(dǎo)致不同地區(qū)的大腸桿菌對(duì)各種藥物的敏感度不一樣[13]。通過(guò)藥敏試驗(yàn)可選擇發(fā)病場(chǎng)的敏感藥物對(duì)患有大腸桿菌病的雞群進(jìn)行治療,能達(dá)到較好的治療效果,也能避免細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。
3.2 減少藥物殘留的方法
隨著抗生素的廣泛使用,藥物的殘留導(dǎo)致動(dòng)物源性的食品安全問(wèn)題越來(lái)越嚴(yán)重,尤其體現(xiàn)在蛋雞和肉雞上,它們體內(nèi)攜帶的耐藥基因和藥物殘留會(huì)通過(guò)食物鏈等方式傳給人類,嚴(yán)重危害食品安全和人類健康[14]。中藥組方或單方治療模式便應(yīng)運(yùn)而生,因?yàn)橹兴幵谀壳皼](méi)有被發(fā)現(xiàn)很強(qiáng)的耐藥性,相比于抗生素中耐藥性其危害可以忽略不計(jì),因?yàn)橹兴幗M方主要調(diào)節(jié)機(jī)制就是改善機(jī)體內(nèi)的新陳代謝,使之調(diào)節(jié)到平衡穩(wěn)態(tài),缺點(diǎn)就是沒(méi)有抗生素效果來(lái)的有效和快速。因此,在減少藥物殘留方面,在速成的肉雞前期發(fā)病可選用療效快速的西藥組方,同時(shí)也要注意用藥劑量和療程,合理用藥。等病情穩(wěn)定后再改用中藥組方進(jìn)行療效鞏固,應(yīng)分開(kāi)該場(chǎng)保健和常用治療藥物。此外,蛋雞在生長(zhǎng)期可選用西藥組方,開(kāi)產(chǎn)后發(fā)病的可選用無(wú)抗組方,在最大程度上減少藥物的殘留問(wèn)題。
參考文獻(xiàn)
[1] 霍清合.大腸桿菌病多發(fā)原因及防治[J].家禽科學(xué),2005(3):22-23.
[2] 楊玉榮.雞大腸桿菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性及其感染治療的研究[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.
[3] 惲?xí)r鋒,潘震寰,鄭明球.雞大腸桿菌病研究進(jìn)展[J].畜牧與獸醫(yī),2008,30(6):277-280.
[4] 蘇建青,褚秀玲,劉文強(qiáng),等.中草藥防治雞大腸桿菌病的機(jī)理和臨床應(yīng)用效果[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,48(8):1964-1965,2003.
[5] 中國(guó)獸藥典委員會(huì).獸藥國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品、中藥卷:第1冊(cè)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2013:65,108.
[6] 中國(guó)獸藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)獸藥典(2015年版)[S].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2016.
[7] 趙景田.中藥治療雞大腸桿菌病[J].河南畜牧獸醫(yī),2003,24(11):50.
[8] 彭貴青,吳斌,劉夢(mèng)元.仔豬致病性大腸桿菌分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J].養(yǎng)殖與飼料,2013(5):29-31.
[9] 劉萍,胡世君,周秀富.某雞場(chǎng)大腸桿菌和沙門氏菌病病原的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J].畜禽業(yè),2005(7):40-42.
[10] 昌莉麗,李華坤,劉桂蘭.中西藥聯(lián)用對(duì)禽源大腸桿菌的體外抑菌效果研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(16):5037-5038.
[11] 阮祥春,曾明華,黃媛媛,等.安徽省部分地區(qū)致病性大腸桿菌耐藥性分析[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2013,40(3):430-433.
[12] 戴秀美,常維山.2012年我國(guó)部分地區(qū)豬源大腸桿菌耐藥性分析[J].畜禽業(yè),2013(1):50-52.
[13] 郝智慧,肖希龍,邱梅,等.不同區(qū)域雞大腸桿菌對(duì)抗菌藥的耐藥性比較[J].中國(guó)獸醫(yī)科學(xué),2009,39(1):84-88.
[14] CLSI.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing;Twentythird informational supplement[S].Wayne,PA:CLSI,2015.