林曉紅 李雁 王曉彤

摘 要： 《水質(zhì) 糞大腸菌群的測定 多管發(fā)酵法》（HJ/T 347.2-2018）該方法對《水質(zhì) 糞大腸菌群的測定 多管發(fā)酵法和濾膜法（試行）》（HJ/T 347-2007）中多管發(fā)酵法部分的修訂。此次驗證實驗通過進行空白對照、陰性陽性對照實驗、精密度和準確度等項目，結(jié)果均合格，故本實驗室條件滿足新方法要求。

關(guān)鍵詞： 糞大腸菌群;多管發(fā)酵法;方法驗證

【中圖分類號】X832 ? ? 【文獻標(biāo)識碼】A ? ? 【DOI】10.12215/j.issn.1674-3733.2020.38.241

1 引言

糞大腸菌群又叫耐熱大腸菌群，是總大腸菌群的一部分，主要來源于糞便。水質(zhì)中糞大腸菌群超標(biāo)主要引起腹瀉，腸胃感染等，對人體健康具有潛在的危險性。水中糞大腸菌群的檢驗是研究水體污染和環(huán)境衛(wèi)生的的重要指標(biāo)，具有廣泛的衛(wèi)生學(xué)意義[1]。

《水質(zhì) 糞大腸菌群的測定 多管發(fā)酵法》（HJ/T 347.2-2018）對《水質(zhì) 糞大腸菌群的測定 多管發(fā)酵法和濾膜法（試行）》（HJ/T 347-2007）中多管發(fā)酵法部分進行了修訂和完善[2]，主要包括：完善了方法原理的表述;增加了12管法和15管法的檢出限;分析步驟中增加了12管法，完善了樣品稀釋方法;增加了規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、樣品采集、樣品保存、儀器和設(shè)備、干擾和消除、精密度和準確度、質(zhì)量保證和質(zhì)量控制、廢物處理等章節(jié)。

本文通過方法驗證，驗證現(xiàn)有的實驗條件和儀器設(shè)備是否滿足新方法要求。

2 實驗部分

2.1 儀器設(shè)備及試劑材料

采樣瓶、接種環(huán)、試管、乳糖蛋白胨培養(yǎng)基、EC培養(yǎng)基、無菌水;高壓蒸汽滅菌器（LD2X-50KBS型）、生化培養(yǎng)箱（WH-21C型）、ph計。

2.2 驗證內(nèi)容

2.2.1 空白對照

用無菌水進行實驗室空白測定，重復(fù)6次實驗，結(jié)果見表1：

2.2.2 陽性及陰性對照實驗

采用愛德士公司大腸菌群有證標(biāo)準物質(zhì)（糞大腸菌群可接受范圍為78-1541MPN/100ml）作為陽性菌株，用愛德士公司綠膿桿菌有證標(biāo)準物質(zhì)（綠膿桿菌可接受范圍為36-312MPN/100ml）作為陰性菌株，進行實驗。實驗結(jié)果陽性菌株呈現(xiàn)陽性反應(yīng)，陰性菌株呈現(xiàn)陰性反應(yīng)，實驗結(jié)果合格。

2.2.3 精密度驗證

本次驗證實驗共選取低濃度（取自地下水）、中濃度（取自李村河河流）、高濃度（取自污水處理廠入口）三個不同濃度的樣品進行6次重復(fù)性實驗，結(jié)果見表2、表3、表4：

2.2.4 準確度驗證

實驗室對愛德士公司大腸菌群有證標(biāo)準物質(zhì)031418（糞大腸菌群真值為429±71MPN/100ml，可接受范圍為72-2720MPN/100ml）進行六次重復(fù)性實驗，結(jié)果由表5所示：

3 驗證結(jié)果及結(jié)論

本次驗證項目空白對照、陰性陽性對照、精密度及準確度檢測的結(jié)果均符合HJ347.2-2018《水質(zhì) 糞大腸菌群的測定 多管發(fā)酵法》方法的要求，所以本實驗室可以用該標(biāo)準方法進行日常的監(jiān)測工作。

參考文獻

[1] 李恒，張志君，王光惠，陳泓霖.多管發(fā)酵法與紙片法測定水中總大腸和糞大腸[J].湖南：儀器儀表與分析監(jiān)測，2020，3：33-35.

[2] 水質(zhì) 糞大腸菌群的測定 多管發(fā)酵法（HJ 347.2-2018）.北京;國家標(biāo)準出版社，2018.