豬精液保存的一些方法

李和進(jìn)，馮佩平

（1.安徽省休寧縣獸醫(yī)站，安徽 黃山 242700；2.齊魯動物保健品有限公司，山東 濟(jì)南 250100）

豬精液的保存對精液的質(zhì)量維持至關(guān)重要，目前豬液態(tài)精液的保存還是主流，但在國際貿(mào)易中凍精是較受歡迎的，而近些年豬凍精發(fā)展迅速，其中的保存方法也有了一些新的嘗試。

1 凍精的保存

豬精子對低溫比較敏感，單次用量大，而常溫保存也能滿足用量需求，隨著牛等凍精的發(fā)展，對優(yōu)良品種的需求、跨國運(yùn)輸?shù)某杀疽约吧锇踩膬?nèi)在要求，使得豬凍精得到一定發(fā)展。目前，精液冷凍保存的方法有液氮保存、干冰保存。陳明明（2016）等介紹-80 ℃超低溫冰箱中冷凍保存豬精，通過添加甘氨酸7.5 mg/mL，檸檬酸含量1.3%，甘油濃度3%為基礎(chǔ)液進(jìn)行凍存，在61 ℃解凍，存活率達(dá)到61%。在精液的解凍與冷凍過程中，都會使精子質(zhì)膜受到損傷，因此，需要在解凍過程中快速越過-60 ℃的和-15 ℃的的兩個臨界溫度區(qū)。如果解凍的溫度達(dá)到69 ℃，解凍后的精子存活率會下降。

2 液態(tài)精液的保存

我國規(guī)模化豬場95%以上使用液態(tài)保存精液，少部分使用冷凍精液。在豬商品化生產(chǎn)中，精液液態(tài)保存的條件、保存后的使用效果是確保人工授精成功的關(guān)鍵技術(shù)，相對而言越新鮮的精液受胎率越高，保存2 d 的精液受胎率一般為60%～70%，到第5 d 時，分娩率降至50%（孫夢等，2019）。研究發(fā)現(xiàn)，精子內(nèi)鈣離子濃度升高，使精子獲能，進(jìn)而使其老化死亡，加入螯合劑后可降低精子內(nèi)鈣離子濃度，減少精子的死亡，乙二胺四乙酸（EDTA）與乙二醇雙（2-氨基乙基醚）四乙酸（EGTA）都可使鈣離子濃度降低，孫夢等認(rèn)為EGTA 更有優(yōu)勢，添加3 mmol/L 則對精液保存有促進(jìn)作用，進(jìn)而可提高精子的受精率及胚胎發(fā)育能力。李琦等認(rèn)為，在17 ℃恒溫箱保存時，篩選正常大氣壓、-0.02 MPa、-0.04 MPa、-0.08 Mpa，研究發(fā)現(xiàn)，-0.04 MPa 條件可降低超氧陰離子自由基（O2-）、H2O2、羥自由基（OH-），對提高豬精子活率、減少精子的呼吸代謝和降低氧化有幫助，可延長保存時間。

高效穩(wěn)定的稀釋粉配方是該領(lǐng)域的研究方向，謝東淇等認(rèn)為天然物質(zhì)的添加對精液液態(tài)保存有幫助，如TPP，它主要由兒茶素、黃酮類、酚酸類和花色素類等物質(zhì)組成，其中兒茶素類在抗氧化活性中起重要作用，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在添加0.04 g/L 的TPP 時，保存5 d 的精子活率大多在60%以上。王雙慧等（2019）認(rèn)為，可利用誘導(dǎo)細(xì)胞休眠的方式來延長豬精液的保存時間，使用冬眠合劑（氯丙嗪和異丙嗪），在8 ℃低溫稀釋液中，添加冬眠合劑保存9 d 后，精子活率可以達(dá)到60%。胡傳活等（2015）發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖對豬精液低溫保存有幫助，黃芪多糖具有抗衰老、抗氧化、抗病毒、抗細(xì)胞凋亡、抗應(yīng)激等作用，效果最好的添加濃度為0.3 g/L，但對于黃芪多糖保護(hù)豬精子的機(jī)制目前并不清楚，但是該方法開拓了思路。

隨著物流運(yùn)輸?shù)谋憷?，個性化需求，尤其是近些年引種風(fēng)險增加，出于生物安全的考慮，對凍精及精液液態(tài)運(yùn)輸帶來新的契機(jī)，可操作性強(qiáng)，效果穩(wěn)定的技術(shù)將是規(guī)模場、家庭農(nóng)場、散養(yǎng)戶的追求。

3 非洲豬瘟后的豬精發(fā)展

非洲豬瘟疫情發(fā)生以來，一些地方，經(jīng)歷了恐慌性拋售，導(dǎo)致清欄。國家為了滿足市場豬肉的需求，陸續(xù)推出寬松政策鼓勵養(yǎng)豬，減少養(yǎng)豬成本，目前種豬的需求量持續(xù)旺盛，連續(xù)3 個月環(huán)比增長，一豬難求，種豬更難求，豬精市場更是持續(xù)火爆，從非洲豬瘟暴發(fā)前的數(shù)十元到目前的數(shù)百元。豬精液以安全性高，方便性強(qiáng)成為市場新寵，大多以新鮮精液為主，目前市場比較大的公司有廣西揚(yáng)翔，通過各地經(jīng)銷商輸送到養(yǎng)殖場，也有一些本省的龍頭企業(yè)發(fā)展豬精優(yōu)勢明顯。目前主要是解決母豬安全繁殖的問題，市場上三元母豬的繁殖性能低，仔豬成活率低，更需要優(yōu)質(zhì)豬精。

下一步將是針對不同的品種開發(fā)具有針對性的豬精品種或基因改良，來引領(lǐng)市場的發(fā)展。公豬站的發(fā)展將會越來越成熟，與母豬的距離越來越短，安全、優(yōu)質(zhì)、方便將是各型養(yǎng)殖場的追求。