基于多種網(wǎng)絡(luò)藥理平臺(tái)探討小陷胸湯治療高血壓的作用機(jī)制

龐小涵 陳建新 賈彩霞

摘要 目的：基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法探討小陷胸湯治療高血壓的作用機(jī)制。方法：通過SymMap、TCMSP、DrugBank 3個(gè)數(shù)據(jù)庫獲得小陷胸湯的有效成分及其靶點(diǎn);并與TCMSP、TCMIP、DrugBank 3個(gè)數(shù)據(jù)庫收集的高血壓的靶點(diǎn)進(jìn)行比對(duì)，獲得小陷胸湯作用于高血壓的靶點(diǎn)。運(yùn)用David數(shù)據(jù)庫對(duì)小陷胸湯和高血壓共同作用靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行GO富集分析和KEGG通路富集分析;運(yùn)用STRING數(shù)據(jù)庫得到小陷胸湯作用于高血壓的PPI網(wǎng)絡(luò);運(yùn)用Cytoscape對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治龅玫疥P(guān)鍵靶點(diǎn)。結(jié)果：小陷胸湯作用于高血壓的有效成分有33個(gè)，相關(guān)靶點(diǎn)48個(gè)，關(guān)鍵靶點(diǎn)基因14個(gè)。GO富集分析顯示，小陷胸湯治療高血壓的生物過程顯著富集在對(duì)非生物刺激的反應(yīng)、毒蕈堿型乙酰膽堿受體信號(hào)通路、系統(tǒng)過程的調(diào)節(jié)、第二信使介導(dǎo)的信號(hào)、細(xì)胞增殖等;細(xì)胞組分主要富集在軸突、質(zhì)膜部分、不對(duì)稱突觸、神經(jīng)末梢、神經(jīng)元投射、突觸后膜、細(xì)胞外基質(zhì)等;分子功能主要富集在胺受體活性、腎上腺素受體活性、毒蕈堿乙酰膽堿受體活性、G蛋白偶聯(lián)的乙酰膽堿受體活性、α-腎上腺素受體活性等;KEGG通路富集顯示小陷胸湯治療高血壓影響的通路主要有神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣信號(hào)通路、血管平滑肌收縮、肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的調(diào)節(jié)、色氨酸代謝等。結(jié)論：小陷胸湯治療高血壓的機(jī)制可能是通過小陷胸湯黃連的成分槲皮素、小檗堿、R-氫化小檗堿，半夏的成分卡文定堿、豆甾醇、松柏苷和瓜蔞的成分菠菜甾醇等達(dá)到抗炎抗氧化應(yīng)激，改善內(nèi)皮功能等作用，通過調(diào)節(jié)相關(guān)靶蛋白的基因表達(dá)，調(diào)控血管組織重構(gòu)與細(xì)胞外基質(zhì)代謝，減輕炎性反應(yīng)，參與神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣信號(hào)通路、血管平滑肌收縮等通路來降低血壓。

關(guān)鍵詞 小陷胸湯;高血壓;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);作用機(jī)制;靶點(diǎn)作用;通路富集

Abstract Objective：To explore the mechanism of Xiaoxianxiong Decoction in treating of hypertension based on network pharmacology.Methods：The effective chemical constituents and targets of Xiaoxianxiong Decoction were obtained from three databases：SymMap，TCMSP，DrugBank.The targets of hypertension collected by TCMSP，TCMIP and DrugBank databases were compared to the targets of Xiaoxianxiong Decoction to obtain the targets of Xiaoxianxiong Decoction in treating of hypertension.The David database was used to analyze the GO and KEGG pathway enrichment analysis of the mutual target proteins of Xiaoxianxiong Decoction and hypertension.The STRING database was used to construct the PPI network of Xiaoxianxiong Decoction in treating of hypertension.The Cytoscape was used to perform the topological analysis of the PPI network to obtain the key targets.Results：There were 33 active components of Xiaoxianxiong Decoction in treatment of hypertension，48 related targets and 14 key target genes.GO enrichment analysis showed that the biological processes of Xiaoxianxiong Decoction in treatment of hypertension were significantly enriched on the response to abiotic stimulus，muscarinic acetylcholine receptor signaling pathway，regulation of systemic processes，second-messenger-mediated signaling，and cell proliferation etc.Cell components were mainly concentrated on axons，plasma membrane part，asymmetric synapse，nerve terminal，neuron projection，postsynaptic membrane，extracellular matrix etc.Molecular functions were mainly concentrated on amine receptor activity，adrenoceptor activity，muscarinic acetylcholine receptor activity，G-protein coupled acetylcholine receptor activity，alpha-adrenergic receptor activity etc.KEGG pathway enrichment analysis showed that affected pathways included neuroactive ligand-receptor interaction，calcium signaling pathway，vascular smooth muscle contraction，regulation of actin cytoskeleton，tryptophan metabolism etc.Conclusion：The mechanism of Xiaoxianxiong Decoction in treating hypertension may resist inflammatory and oxidative stress and improve endothelial function by quercetin，berberine，R-Hydrogenated berberine of golden thread，cavidine，stigmasterol，coniferin of pinellia tuber and spinasterol of snakegourd fruit，etc.The mechanism of reducing blood pressure may also be through regulating gene expression of related target proteins，regulating vascular tissue remodeling and extracellular matrix metabolism，reducing inflammatory responses，participating in neuroactive ligand-receptor interactions，calcium signaling pathways，and vascular smooth muscle.

Keywords Xiaoxianxiong Decoction; Hypertension; Network pharmacology; Mechanism;Target action; Pathway enrichment

中圖分類號(hào)：R285 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.22.001

高血壓屬于中醫(yī)“眩暈”“頭痛”等范疇，臨床表現(xiàn)有頭痛、頭暈、目眩、耳鳴等。是導(dǎo)致多種心腦血管疾病和死亡的的重要病因和危險(xiǎn)因素，嚴(yán)重威脅著人類的健康和生命質(zhì)量。2012—2015年全國高血壓抽樣調(diào)查顯示，18歲以上成人高血壓（≥140/90 mm Hg，1 mm Hg=0.133 kPa）患病率（未調(diào)整人口比例粗率）為27.9%，知曉率為46.9%，治療率為40.7%，控制率為15.3%，知曉治療率為86.8%，治療控制率為37.6%[1]。與2002年第4次全國營(yíng)養(yǎng)與健康調(diào)查比較，高血壓患病率顯著升高（+9.1%），但控制率也顯著提高（+9.2%）[2]。但不管是知曉率，還是治療控制率，均處于不足50%的較低水平[1]。高血壓病已成為影響人類生命健康的重要疾病之一，其治療的目的不僅僅局限于降低血壓本身，更重要的是在于降低心腦血管事件的發(fā)病率和病死率，改善患者癥狀及中醫(yī)證候，防治靶器官損害，減少并發(fā)癥，提高生命質(zhì)量。中醫(yī)中藥在改善高血壓病癥狀及防止靶器官損害等方面顯示出自身獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)[3-4]。

小陷胸湯出自張仲景的《傷寒論·辨太陽病脈證并治》：“小結(jié)胸病，正在心下，按之則痛，脈浮滑者，小陷胸湯主之”。方中瓜蔞甘寒清熱滌痰，寬胸散結(jié)，用時(shí)先煮，意在“治上宜治緩”;黃連苦寒泄熱除痞，半夏辛溫化痰散結(jié)，兩藥相伍體現(xiàn)辛開苦降之法;三藥合用清熱化痰，散結(jié)開痞[5]。有臨床研究表明，小陷胸湯能改善痰濕壅盛型高血壓患者頭如裹、胸悶、嘔吐痰涎癥狀和UmAlb水平[6]，干預(yù)患者早期動(dòng)脈硬化改變[7]，還能逆轉(zhuǎn)左心室肥厚，降低高血壓左心室肥厚（痰熱互結(jié)兼瘀血型）患者的中醫(yī)癥候積分，改善其中醫(yī)臨床癥狀和心臟舒張功能和收縮功能[8]。但是由于小陷胸湯成分復(fù)雜多樣，其所發(fā)揮治療高血壓的作用機(jī)制目前尚未有明確研究報(bào)道。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)自系統(tǒng)生物學(xué)和多向藥理學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來，其研究的觀點(diǎn)與中藥方劑注重多組分配伍、多靶點(diǎn)及整合調(diào)節(jié)的思想有許多相似之處[9]，能夠在一定程度上揭示中藥復(fù)方治療臨床疾病的作用機(jī)制，提高藥物的治療效果，降低不良反應(yīng)，節(jié)約藥物研發(fā)費(fèi)用。本文通過對(duì)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行挖掘，收集和分析疾病、藥物信息，以獲得小陷胸湯作用于高血壓的相關(guān)信息，進(jìn)而對(duì)其治療高血壓的機(jī)制進(jìn)行探索，以期為進(jìn)一步深入研究小陷胸湯治療高血壓機(jī)制提供研究思路和理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 小陷胸湯（黃連、半夏和瓜蔞）的藥物成分（所含化合物）和靶點(diǎn)，高血壓的靶點(diǎn)及小陷胸湯作用于高血壓的分子機(jī)制。

1.2 小陷胸湯治療高血壓的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究思路 ?對(duì)下圖進(jìn)行簡(jiǎn)要說明：通過SymMap、TCMSP、DrugBank 3個(gè)數(shù)據(jù)庫獲得小陷胸湯的有效成分及靶點(diǎn);通過TCMSP、TCMIP、DrugBank 3個(gè)數(shù)據(jù)庫獲得高血壓的靶點(diǎn);兩者靶點(diǎn)取交集獲得小陷胸湯作用于高血壓的靶點(diǎn)。通過Cytoscape構(gòu)建“小陷胸湯-成分-靶點(diǎn)-高血壓”網(wǎng)絡(luò);David數(shù)據(jù)庫對(duì)小陷胸湯和高血壓共同作用靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行GO富集分析和KEGG通路富集分析;STRING數(shù)據(jù)庫得到小陷胸湯作用于高血壓的PPI網(wǎng)絡(luò);運(yùn)用Cytoscape對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治龅玫疥P(guān)鍵靶點(diǎn)。見圖1。

1.3 藥物有效成分篩選 使用中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫和分析平臺(tái)（TCMSP）數(shù)據(jù)庫（http：//ibts.hkbu.edu.hk/LSP/tcmsp.php），分別以“黃連”“半夏”“瓜蔞”為檢索詞，根據(jù)設(shè)置條件“藥物口服生物利用度（OB）≥30%和藥物相似度（DL）≥0.18”篩選出符合條件的候選有效成分。

1.4 藥物有效成分和高血壓的靶點(diǎn)收集 使用TCMSP，SYMMAP，DrugBank 3個(gè)數(shù)據(jù)庫分別收集3味中藥有效成分的靶點(diǎn)。以“hypertension”為檢索詞，在TCMSP，TCMIP，DrugBank 3個(gè)數(shù)據(jù)庫中收集高血壓的相關(guān)靶點(diǎn)。

1.5 獲取小陷胸湯治療高血壓的靶點(diǎn) 收集的藥物有效成分的靶點(diǎn)和高血壓的靶點(diǎn)均通過UniProt數(shù)據(jù)庫（http：//www.uniprot.org/）進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，限定為“Reviewed（Swiss-Prot）”“Human”條件，然后兩者靶點(diǎn)取交集，獲得小陷胸湯治療高血壓的靶點(diǎn)。

1.6 PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建及關(guān)鍵靶點(diǎn)篩選 將藥物-疾病交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING（https：//string-db.org/）數(shù)據(jù)庫進(jìn)行蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用（PPI）分析，限定研究物種為“人”（Homo sapiens），最低相互作用評(píng)分設(shè)置為中等信度（“medium confidence（0.400）”），其余參數(shù)保持默認(rèn)設(shè)置，得到小陷胸湯作用于高血壓的PPI網(wǎng)絡(luò)。借助Cytoscape 3.7.2軟件中的“Network Analyzer”對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?，選取自由度（Degree）、介數(shù)（Betweenness）和中心性（Closeness）都大于平均值的靶點(diǎn)為關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.7 生物學(xué)功能和通路分析 利用David 6.7數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/），物種選擇“人”（Homo sapiens，Human），對(duì)小陷胸湯和高血壓共同作用靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行GO富集分析和KEGG通路富集分析。GO富集分析主要用于描述基因靶點(diǎn)的功能，包括細(xì)胞功能、分子功能和生物功能，KEGG富集分析可以得到小陷胸湯和高血壓共同靶點(diǎn)所富集的信號(hào)通路，均以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 小陷胸湯有效成分的篩選 小陷胸湯中有黃連、半夏和瓜蔞共3味中藥，在TCMSP數(shù)據(jù)庫中獲得黃連48個(gè)，半夏116個(gè)，瓜蔞80個(gè)，共244個(gè)成分，篩選參數(shù)設(shè)定為OB≥30%、DL≥0.18，獲取黃連14個(gè)、半夏13個(gè)、瓜蔞11個(gè)，共38個(gè)有效成分，逐一對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)黃連3個(gè)、半夏1個(gè)、瓜蔞1個(gè)共5個(gè)成分無對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)，即小陷胸湯最終有效成分有33個(gè)。包括黃連成分Coptisine（黃連素）、Berlambine（小檗浸堿）、Corchoroside A_qt（黃麻甙A）、Berberine（小檗堿）、（R）-Canadine（R-氫化小檗堿）、Berberrubine（小檗紅堿）、Palmatine（巴馬汀）、Quercetin（槲皮素），半夏成分Cavidine（卡文定堿）、Cycloartenol（環(huán)烯醇）、Stigmasterol（豆甾醇）、beta-sitosterol（β-谷甾醇）、Coniferin（松柏苷），瓜蔞成分Spinasterol（菠菜甾醇）、7-oxo-dihydrokaro-unidiol（7-氧代二氫鉀一二醇）、vitamin-e（維生素-E）。結(jié)果見表1。

2.2 小陷胸湯有效成分的靶點(diǎn)和高血壓的靶點(diǎn)篩選 通過TCMSP，SYMMAP，DrugBank 3個(gè)數(shù)據(jù)庫收集3味中藥有效成分的靶點(diǎn)，刪除重復(fù)靶點(diǎn)后最終得到小陷胸湯有效成分的靶點(diǎn)258個(gè)。同時(shí)通過TCMSP，TCMIP，DrugBank 3個(gè)數(shù)據(jù)庫收集高血壓的靶點(diǎn)，刪除重復(fù)靶點(diǎn)后最終得到高血壓的靶點(diǎn)388個(gè)。然后將小陷胸湯有效成分的靶點(diǎn)和高血壓的靶點(diǎn)取交集，最終得到小陷胸湯防治高血壓的靶點(diǎn)48個(gè)，結(jié)果見圖2、表2。

2.4 GO富集分析 將小陷胸湯和高血壓的48個(gè)共同靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID 6.7數(shù)據(jù)庫，物種選擇“Homo sapiens（Human）”，根據(jù)顯著性程度P<0.05（P值由小到大）進(jìn)行排序，取排名前15的進(jìn)行部分展示，結(jié)果見圖5～7。結(jié)果提示小陷胸湯-高血壓-基因的生物過程（Biological Progress，BP）顯著富集在對(duì)非生物刺激的反應(yīng)、毒蕈堿型乙酰膽堿受體信號(hào)通路、系統(tǒng)過程的調(diào)節(jié)、第二信使介導(dǎo)的信號(hào)、細(xì)胞增殖、循環(huán)系統(tǒng)過程、血液循環(huán)、心臟收縮的調(diào)節(jié)、cAMP介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)、組織重塑、去甲腎上腺素-腎上腺素對(duì)全身動(dòng)脈血壓的調(diào)節(jié)、多細(xì)胞生物過程的負(fù)調(diào)控等;細(xì)胞組分（Cellular Component，CC）主要富集在軸突、質(zhì)膜部分、不對(duì)稱突觸、神經(jīng)末梢、神經(jīng)元投射、突觸后膜、細(xì)胞外基質(zhì)等。分子功能（Molecular Function，MF）主要富集在胺受體活性、腎上腺素受體活性、毒蕈堿乙酰膽堿受體活性、G蛋白偶聯(lián)的乙酰膽堿受體活性、α-腎上腺素受體活性、乙酰膽堿結(jié)合、藥物結(jié)合、胺結(jié)合、乙酰膽堿受體活性、電子載流子活性、蛋白質(zhì)二聚活性、神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合、α1-腎上腺素受體活性、神經(jīng)遞質(zhì)受體活性、類固醇激素受體活性等。

2.5 KEGG信號(hào)通路分析 通過DAVID數(shù)據(jù)庫對(duì)小陷胸湯治療高血壓的48個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG富集分析得到通路18條，根據(jù)P<0.05得到通路11條，包括神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣信號(hào)通路、血管平滑肌收縮、肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的調(diào)節(jié)、色氨酸代謝等。結(jié)果見表3。提示小陷胸湯可能通過作用于這些通路起到治療高血壓的作用。

3 討論

3.1 小陷胸湯成分分析 通過數(shù)據(jù)挖掘和整理得出小陷胸湯治療高血壓的有效成分有33個(gè)，通過表2可以發(fā)現(xiàn)，小陷胸湯黃連的成分槲皮素包含的靶點(diǎn)最多，其次是黃連的成分小檗浸堿、小檗堿、R-氫化小檗堿和半夏的成分卡文定堿、豆甾醇、β-谷甾醇、松柏苷，瓜蔞成分所包含的靶點(diǎn)相比半夏和黃連較少，說明以上成分可能在小陷胸湯治療高血壓中發(fā)揮關(guān)鍵作用。槲皮素為黃酮類化合物，具有很好抗炎，抗氧化應(yīng)激、抗血小板聚集等心血管保護(hù)作用[10]?？梢酝ㄟ^降低氧化應(yīng)激水平、干擾RAAS系統(tǒng)、抑制ACE、改善血管內(nèi)皮功能等多種機(jī)制降低血壓[11]。小檗堿能直接作用于血管平滑肌，使四肢、皮膚及部分內(nèi)臟血管擴(kuò)張，也能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、容量血管，增加冠脈流量，拮抗腎上腺索、去甲腎上腺素、麥角新堿和苯福林引起的收縮，可能競(jìng)爭(zhēng)性地阻斷血管平滑肌上的α受體，使外周血管阻力降低[12]。小檗堿能減弱去甲腎上腺素和腎上腺素的升壓反應(yīng)，其降壓效應(yīng)可被預(yù)先應(yīng)用酚妥拉明所抵消。小檗堿還能翻轉(zhuǎn)乙酰膽堿的升壓作用，與膽堿酯酶的活性中心的Y-陰離子部位結(jié)合，競(jìng)爭(zhēng)性抑制多種動(dòng)物血清、腦、心房、脾等組織的真性和假性膽堿酯酶活性，且對(duì)真性膽堿酯酶的抑制作用更強(qiáng)烈，故能增強(qiáng)和延長(zhǎng)乙酰膽堿及迷走神經(jīng)的降壓反應(yīng)。其抗膽堿酯酶活性使乙酰膽堿堆積，興奮突觸前膜M受體，抑制去甲腎上腺素釋放而擴(kuò)張血管，也是其降壓機(jī)制之一[13]。有實(shí)驗(yàn)研究表明氫化小檗堿具有鎮(zhèn)痛和消炎的作用[14]。豆甾醇、β-谷甾醇具有抗氧化的作用[15]。通過抗氧化和抗炎來達(dá)到降壓的作用。研究結(jié)果與以上報(bào)道相符，說明小陷胸湯治療高血壓具有多成分共同作用的特點(diǎn)。

3.2 關(guān)鍵靶點(diǎn)分析 利用Cytoscape軟件對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?，得到EGFR、MMP9、JUN、TP53、VEGFA、PPARG、SLC6A4、NR3C1等14個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)，提示這14個(gè)靶蛋白很可能在小陷胸湯治療高血壓中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。目前認(rèn)為高血壓的發(fā)病機(jī)制之一是因外周小動(dòng)脈壁平滑肌張力升高及其對(duì)血管活性物質(zhì)反應(yīng)性增加，導(dǎo)致血管發(fā)生結(jié)構(gòu)性變化引起外周血管阻力增加所致[16-17]。EGFR是一種受體型蛋白酪氨酸激酶，廣泛表達(dá)于包括心臟和血管的正常組織，是調(diào)控許多基本的細(xì)胞生物過程如分化、增殖、遷移等的重要因子[18]。EGFR過表達(dá)或過度刺激可以導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)紊亂和組織重構(gòu)。有研究表明EGRF可能參與了某些繼發(fā)性高血壓所致的心肌肥大和血管平滑肌細(xì)胞增殖的發(fā)生發(fā)展[19]。還有研究表明，“兩腎一夾”（Two-kidney，One-clip，2K1C）Goldblatt大鼠的心肌和主動(dòng)脈中EGFR及其下游激酶ERK 1/2表達(dá)上調(diào)，并且與高血壓的嚴(yán)重程度相關(guān)，EGFR可能參與了腎血管性高血壓大鼠心血管重構(gòu)的發(fā)生和發(fā)展[20]。MMP9是MMPs家族中的一員，作為一種內(nèi)源性鋅-依賴性酶，是促進(jìn)膠原基質(zhì)降解的重要調(diào)節(jié)因子[21]。研究表明，細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)于維持組織的完整性至關(guān)重要，其中的基質(zhì)金屬蛋白酶/組織金屬蛋白酶抑制劑（Matrix Metal Loproteinases/tissue Inhibitors of Metal Loproteinases，MMPs/TIMPs）系統(tǒng)參與細(xì)胞外基質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)[22]。長(zhǎng)期高血壓、高血壓心臟病、高血壓腎病、血管重構(gòu)以及動(dòng)脈粥樣硬化均能夠引起MMPs/TIMP系統(tǒng)的失衡[23]。轉(zhuǎn)化因子β1（TGFβ1）、MMPs和TIMPs參與腎小球系膜中細(xì)胞外基質(zhì)膨脹的過程，此過程可導(dǎo)致動(dòng)脈高壓中腎小球硬化和慢性腎病的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)在自發(fā)性高血壓大鼠（Spontaneously Hypertensive Rats，SHR）的腎皮質(zhì)區(qū)和髓質(zhì)區(qū)MMP9水平升高[24]，MMP9可能在高血壓血管重構(gòu)的早期階段起著關(guān)鍵作用[25]。而外源性MMP9抑制劑巴馬司他（Batimastat）可以減少M(fèi)MP介導(dǎo)的血管功能障礙，通過降低高血壓小鼠血清中MMP9的表達(dá)和活性來降低小鼠血壓水平[26]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，生理狀態(tài)下，刺激和抑制血管生成受到內(nèi)源性正向、負(fù)向調(diào)節(jié)因子的調(diào)控，其生長(zhǎng)和抑制處于一種動(dòng)態(tài)平衡，導(dǎo)致血管的數(shù)量、形態(tài)、結(jié)構(gòu)保持高度穩(wěn)定[27]。病理狀態(tài)下這種動(dòng)態(tài)平衡被打破，其中VEGF是導(dǎo)致血管生成的主要因素，缺氧是促使VEGF高表達(dá)的主要原因，阻斷VEGF活性能抑制新生血管化的進(jìn)程。PPARs是配體誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子的亞家族，過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARG）屬于核激素受體超家族的成員，控制與代謝穩(wěn)態(tài)，脂質(zhì)，脂肪形成和炎性反應(yīng)有關(guān)的大量基因的表達(dá)，調(diào)節(jié)與代謝疾病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)的大量代謝途徑及疾病，例如心血管疾病[28]。綜上所述，小陷胸湯可能通過調(diào)節(jié)上述基因靶點(diǎn)的表達(dá)，減輕由其引發(fā)的組織重構(gòu)、炎性反應(yīng)等，從而達(dá)到降壓的作用。

3.3 通路結(jié)果分析 表2和表4聯(lián)合分析，以靶蛋白為媒介，中藥成分與相關(guān)通路存在密切聯(lián)系。一些不良反應(yīng)的發(fā)生可能與多種神經(jīng)遞質(zhì)及其受體相關(guān)，而神經(jīng)活性配體受體相互作用信號(hào)通路是質(zhì)膜上所有與細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)通路相關(guān)的受體和配體的集合[29]。在神經(jīng)活性配體-受體相互作用的通路中，黃連、半夏發(fā)揮重要功效，有效成分作用于ADRA1A、ADRA1B、ADRA1D、ADRA2C、ADRB2、CHRM1、CHRM3、CHRM5調(diào)控神經(jīng)活性配體-受體的相互作用。腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)參與了高血壓的發(fā)生、發(fā)展，血管緊張素-Ⅱ經(jīng)相關(guān)受體發(fā)揮作用，能加重血管收縮與腎臟鈉吸收程度，加速醛固酮的合成，提高血壓水平;反之，若血管緊張素-Ⅱ直接激活血管緊張素-Ⅱ2型受體，則機(jī)體對(duì)腎臟鈉的重吸收將大大減少，此時(shí)血管擴(kuò)張，血管阻力減少[30-31]。在血管平滑肌收縮的通路中，黃連、半夏發(fā)揮重要功效，其有效成分可能作用于ADRA1A、ADRA1B、ADRA1D、CALM1調(diào)控血管平滑肌收縮。鈣激活離子通道可調(diào)節(jié)神經(jīng)元的興奮性，通過降低血管平滑肌細(xì)胞的興奮性，降低動(dòng)脈張力。同時(shí)，大電導(dǎo)鈣離子激活鉀通道，下調(diào)降低鉀通道的活性，造成血管平滑肌功能障礙[30]。在鈣信號(hào)通路中，黃連、半夏、瓜蔞均發(fā)揮作用，其有效成分可能作用于ADRA1A、ADRA1B、ADRA1DCHRM1、CHRM2、CHRM3、CHRM5調(diào)控鈣信號(hào)。

通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法發(fā)現(xiàn)小陷胸湯中黃連素、小檗浸堿、小檗堿、R-氫化小檗堿、巴馬汀、槲皮素卡文定堿、豆甾醇、松柏苷等多種成分可作用于EGFR、MMP9、VEGFA、PPARG、NR3C1、ADRB2、CHRM1等多個(gè)作用靶點(diǎn)，通過調(diào)節(jié)神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣信號(hào)通路、血管平滑肌收縮、肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的調(diào)節(jié)、色氨酸代謝等多條信號(hào)通路來發(fā)揮治療高血壓的作用，為其進(jìn)一步藥理學(xué)研究及臨床應(yīng)用提供參考。但是數(shù)據(jù)主要來源于數(shù)據(jù)庫，盡管同時(shí)使用多個(gè)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行綜合分析篩選，但仍可能與小陷胸湯治療高血壓發(fā)揮作用的實(shí)際情況存在差別，并且未考慮中藥的劑型、劑量、品質(zhì)、煎煮方法等因素，所得出的結(jié)論還需通過進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證。

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（2020-01-08收稿 責(zé)任編輯：王明）