膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)臨床中的運(yùn)用研究

王翔宇

（蘭考縣畜牧局，河南蘭考 475300）

膠體金免疫層析技術(shù)結(jié)合了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、膠體金技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)以及免疫層析技術(shù)等各種技術(shù)，具備敏感與快速的優(yōu)勢(shì)。膠體金免疫層析技術(shù)利用膠體金的顯色特點(diǎn)，結(jié)合免疫層析技術(shù)來(lái)獲得檢測(cè)結(jié)果，利用膠體金當(dāng)做標(biāo)記物，結(jié)合待測(cè)物獲得配體捕獲實(shí)現(xiàn)顯色，從而實(shí)現(xiàn)快速的檢測(cè)。

1 膠體金免疫層析技術(shù)概述

膠體金免疫層析技術(shù)主要是把膠體金標(biāo)記技術(shù)、免疫檢測(cè)技術(shù)、蛋白層析技術(shù)等多項(xiàng)技術(shù)結(jié)合。利用硝酸纖維素膜當(dāng)做固相載體，樣品溶液利用毛細(xì)作用原理處于層析條當(dāng)中泳動(dòng)。并且，樣品當(dāng)中待測(cè)物品和層析材料當(dāng)中針對(duì)待測(cè)物的抗原形成高特異性、高親和性的免疫反應(yīng)，在層析的過(guò)程當(dāng)中免疫復(fù)合物會(huì)被富集以及截留于層析材料當(dāng)中的檢測(cè)帶，經(jīng)由膠體金顆粒于短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)聚集進(jìn)而獲得直觀的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，游離標(biāo)記物會(huì)越過(guò)檢測(cè)帶，實(shí)現(xiàn)與標(biāo)記物之間自動(dòng)化的分離。膠體金免疫層析技術(shù)主要利用了膠體金所具備的顯色特點(diǎn)，基于免疫層析技術(shù)進(jìn)而完成相應(yīng)的檢測(cè)操作，層析的過(guò)程中利用膠體金標(biāo)記物，標(biāo)記物和待測(cè)物的絡(luò)合物會(huì)被配體實(shí)現(xiàn)捕獲進(jìn)而濃集顯色，利用纖維膜中顯色帶來(lái)快速檢測(cè)。因無(wú)需把結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物之間分離，所以省略了加樣與洗滌等各個(gè)步驟。膠體金免疫層析技術(shù)的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便快捷，對(duì)操作人員的專(zhuān)業(yè)技術(shù)要求較低，不用特殊的儀器設(shè)備，檢測(cè)結(jié)果直觀明了、便于保存，在現(xiàn)場(chǎng)的快速檢測(cè)中十分適用。在動(dòng)物病毒、細(xì)菌以及寄生蟲(chóng)等獸醫(yī)病原學(xué)檢測(cè)與臨床診斷當(dāng)中應(yīng)用廣泛。膠體金免疫層析技術(shù)是現(xiàn)階段獸醫(yī)動(dòng)物疫病臨床診斷中最簡(jiǎn)單且快速、特異的一項(xiàng)免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)[1]。

2 膠體金免疫層析技術(shù)在動(dòng)物細(xì)菌病診斷中的應(yīng)用

動(dòng)物細(xì)菌性疫病的檢驗(yàn)中，膠體金免疫層析技術(shù)屬于關(guān)鍵性技術(shù)。近年來(lái)，臨床診斷領(lǐng)域逐步研究并且投入使用了細(xì)菌性疾病膠體金診斷試紙。臨床診斷當(dāng)中，部分基層地區(qū)的獸醫(yī)也大量使用膠體金免疫層析技術(shù)。如王友華闡述了在獸醫(yī)領(lǐng)域中膠體金免疫層析技術(shù)的應(yīng)用原理，促使膠體金免疫層析技術(shù)應(yīng)用獸醫(yī)領(lǐng)域得到全面發(fā)展[2]。目前，膠體金免疫層析技術(shù)已經(jīng)變成了初篩的一種試驗(yàn)，針對(duì)人工污染樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，適用性非常的強(qiáng)，具備極高的推廣性與應(yīng)用性。

3 在動(dòng)物病毒病診斷中的應(yīng)用

在動(dòng)物病毒性疫病的診斷過(guò)程中，廣泛應(yīng)用了膠體金免疫層析技術(shù)。目前為止，在犬細(xì)小病毒病、狂犬病、傳染性支氣管炎病、口蹄疫以及豬繁殖與呼吸綜合征等各類(lèi)疫病當(dāng)中，都研制了針對(duì)性的膠體金診斷試紙，并且還具備一定的技術(shù)保障，推動(dòng)了現(xiàn)代化動(dòng)物疫病預(yù)防與監(jiān)測(cè)工作的進(jìn)一步發(fā)展。例如利用膠體金免疫層析技術(shù)來(lái)進(jìn)行狂犬病毒抗原的特異性反應(yīng)，針對(duì)48份有可能患有狂犬病的犬唾液樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，能夠獲得88%左右的符合率。這就能夠看出，在野外環(huán)境中對(duì)于唾液以及動(dòng)物大腦內(nèi)狂犬病毒抗原進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，膠體金免疫層析診斷試紙非常適用。

4 動(dòng)物寄生蟲(chóng)病診斷中的應(yīng)用

目前已知的人畜共患病中有相當(dāng)一部分是寄生蟲(chóng)病，因此進(jìn)行畜禽寄生蟲(chóng)病的正確診斷，具有突出的公共衛(wèi)生學(xué)意義。目前的旋毛蟲(chóng)病以及豬囊蟲(chóng)病等多種疫病的相應(yīng)膠體金檢測(cè)試紙廣泛地應(yīng)用于臨床檢測(cè)當(dāng)中。例如利用膠體金試紙來(lái)進(jìn)行家畜血腫內(nèi)抗血吸蟲(chóng)抗體的檢測(cè)。利用膠體金快速試紙來(lái)進(jìn)行弓形蟲(chóng)抗體與動(dòng)物弓形蟲(chóng)病血清抗體的檢測(cè)。通過(guò)研究表明，膠體金試紙具備極高的敏感度。相比于弓形蟲(chóng)的IHA診斷試劑而言，前者的結(jié)果能夠早兩天獲得。目前，牛新孢子蟲(chóng)病診斷中利用膠體金免疫層析技術(shù)，具備極為突出的臨床使用價(jià)值，非常適用于基層地區(qū)的獸醫(yī)工作[3]。

5 發(fā)展前景

膠體金免疫層析技術(shù)所具備的簡(jiǎn)便、快速、敏感以及特異等優(yōu)勢(shì)，使其在獸醫(yī)臨床的快速檢測(cè)以及現(xiàn)場(chǎng)診斷當(dāng)中得到了廣泛的應(yīng)用，膠體金免疫層析技術(shù)的發(fā)展?jié)摿Ψ浅＞薮?，且具備廣闊的應(yīng)用前景。就現(xiàn)階段的實(shí)際情況而言，膠體金免疫層析技術(shù)成為了眾多領(lǐng)域當(dāng)中的研究熱點(diǎn)。針對(duì)膠體金免疫層析技術(shù)的相關(guān)研究在不斷地深入，與此同時(shí)，膠體金免疫層析技術(shù)的檢測(cè)范圍同樣在不斷地?cái)U(kuò)展，其中涉及了病原體、激素、毒品、藥物以及重金屬等眾多方面。但是，就目前的膠體金免疫層析技術(shù)而言，依舊存在一定的不足之處，例如檢測(cè)時(shí)靈敏度還需要進(jìn)一步的提高。隨著膠體金免疫層析技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)中的廣泛應(yīng)用，必須不斷地提升膠體金免疫層析試驗(yàn)的整體敏感性與特異性，讓其能夠完成多元檢測(cè)、定量與半定量檢測(cè)等，這也是膠體金免疫層析技術(shù)未來(lái)的發(fā)展方向。膠體金免疫層析技術(shù)提供給動(dòng)物疫病診斷技術(shù)以全新的模式，促進(jìn)了動(dòng)物疫病診斷領(lǐng)域的進(jìn)一步發(fā)展。隨著全新標(biāo)記物以及制備方法的研制與使用，標(biāo)記技術(shù)不斷地成熟，還有單克隆抗體技術(shù)以及分子生物學(xué)技術(shù)等被廣泛的應(yīng)用，會(huì)進(jìn)一步的拓寬膠體金免疫層析技術(shù)的應(yīng)用范圍與價(jià)值。

6 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，膠體金免疫層析技術(shù)在臨床當(dāng)中廣泛應(yīng)用，其特異性與敏感性仍需進(jìn)一步的提高，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)定量、半定量與多元檢測(cè)。利用膠體金免疫層析技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)病毒的快速準(zhǔn)確的檢測(cè)，為動(dòng)物疫病預(yù)防與治療提供幫助，促進(jìn)我國(guó)基層獸醫(yī)領(lǐng)域的進(jìn)一步發(fā)展，為我國(guó)畜牧養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展奠定了堅(jiān)實(shí)的物質(zhì)條件。