布魯氏菌病實(shí)驗(yàn)室診斷方法的研究進(jìn)展

馬梅霞/甘肅省臨夏州康樂(lè)縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 731500

布魯氏菌病是當(dāng)前比較嚴(yán)重的人畜共患病之一，每年呈現(xiàn)發(fā)病上升的趨勢(shì)。為此，應(yīng)該建立快速有效和操作方法簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)室診斷方法，為疾病的防控工作奠定基礎(chǔ)。本文主要闡述了布魯氏菌病檢測(cè)的主要方法，希望為相關(guān)的工作人員提供參考。

1 布魯氏菌病的危害

首先，布魯氏菌病可以傳染動(dòng)物和人類，具有很強(qiáng)的傳染性。發(fā)病動(dòng)物是主要的傳染源，同時(shí)被污染的糞便和排泄物也會(huì)帶有大量的病菌，造成該病的傳播。其次，布魯氏菌的種類有多種，其中羊種布病感染比較嚴(yán)重，一旦患病，母畜發(fā)生流產(chǎn)，公畜出現(xiàn)睪丸炎，影響繁殖能力。最后，人感染布魯氏菌病主要是因?yàn)榻佑|患病的動(dòng)物，或者接觸動(dòng)物制品?；疾≈髸?huì)出現(xiàn)明顯的發(fā)熱、多汗和關(guān)節(jié)疼痛的癥狀?，F(xiàn)階段，該疾病在全世界范圍內(nèi)都有流行，對(duì)畜牧養(yǎng)殖業(yè)的危害比較大，給養(yǎng)殖戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，為此，應(yīng)該不斷提高布魯氏菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷水平，為后來(lái)的防治工作奠定基礎(chǔ)。

2 布魯氏菌病的診斷技術(shù)

2.1 病原學(xué)診斷病原學(xué)檢測(cè)是診斷布魯氏菌病的主要技術(shù)，需要對(duì)病料進(jìn)行采集、保存、分離、培養(yǎng)和鑒定等。為此，需要在無(wú)菌條件下采集流產(chǎn)的胎兒或者胎盤等物質(zhì)，然后經(jīng)過(guò)瓊脂培養(yǎng)，待菌落長(zhǎng)成之后再對(duì)菌落的形態(tài)、生化反應(yīng)和染色特點(diǎn)進(jìn)行判斷。之后結(jié)合布魯氏菌的菌落的特征可以將其作具體的分類，其中光滑型菌落占絕大多數(shù)。經(jīng)過(guò)顯微鏡可以觀察紅色球狀小桿菌，呈現(xiàn)短鏈或串狀排列的形式。此外，最為直接的方法就是從血液和體液中能夠檢測(cè)到布魯氏菌。需要注意的是，病原學(xué)診斷對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員和環(huán)境的要求比較高，不適合臨床快速診斷。

2.2 免疫學(xué)診斷免疫學(xué)診斷方法包括血清學(xué)診斷，是比較常見(jiàn)的診斷方法，主要包括酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、膠體金標(biāo)試驗(yàn)等。

2.2.1 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)該種實(shí)驗(yàn)方法就是觀察動(dòng)物的紅細(xì)胞是否發(fā)生溶血，然后判斷血清中有無(wú)帶待檢抗體，該方法的主要特點(diǎn)是靈敏性高和特異性強(qiáng)。對(duì)牛、羊等布病的臨床診斷具有明顯的效果和價(jià)值，但是該種方法不適用豬布病的診斷。需要注意的是，該種方法的敏感性比較高，但是操作困難和繁瑣，可能存在一定的主觀性。

2.2.2 膠體金標(biāo)試驗(yàn)首先，膠體金標(biāo)試驗(yàn)是新型的免疫標(biāo)記技術(shù)，相關(guān)的學(xué)者研究表明，該種試驗(yàn)方法的主要特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單和反應(yīng)速度快，對(duì)布病的篩查和現(xiàn)場(chǎng)快速診斷具有重要的作用。其次，有的學(xué)者還對(duì)該種試驗(yàn)方法在不同地區(qū)的應(yīng)用情況進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該種試驗(yàn)方法能夠快速的發(fā)現(xiàn)患者，同時(shí)能夠有效的監(jiān)測(cè)疫情，具有很好的推廣應(yīng)用效果，對(duì)鞏固布魯氏菌病的防治成果具有重要的意義。此外，該種試驗(yàn)方法具有高度敏感和特異性的特點(diǎn)，能夠快速檢測(cè)疫病，也可以在基層畜牧養(yǎng)殖業(yè)中推廣使用。需要注意的是，該種方法不能實(shí)現(xiàn)定量的測(cè)定，同時(shí)靈敏度還需要進(jìn)一步的提升，但是市場(chǎng)發(fā)展空間良好。

2.2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)首先，該種試驗(yàn)方法在上個(gè)世紀(jì)70 年代比較流行，具有靈敏性高和特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，同時(shí)操作簡(jiǎn)單，能夠確定診斷，并且也可以作為篩選和鑒別診斷的方法。在具體的布病檢測(cè)的過(guò)程中，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)血清抗體的檢測(cè)。其次，當(dāng)前的布病檢測(cè)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)主要包括兩種，都能取得比較好的診斷效果。但是需要注意的是，雖然該種試驗(yàn)方法具有靈敏度高和特異性的特點(diǎn)，但是不能區(qū)分免疫接種產(chǎn)生的抗體是自然感染產(chǎn)生的抗體。

2.3 分子生物學(xué)診斷分子生物學(xué)診斷技術(shù)是比較新型的技術(shù)，包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、核酸探針檢測(cè)等。

2.3.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)首先，該技術(shù)的主要特點(diǎn)是快速、準(zhǔn)確、靈敏和高效，是當(dāng)前比較常見(jiàn)的布魯氏菌病診斷方法。其次，熒光定量聚合酶酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是在該技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的新技術(shù)，最大的特點(diǎn)是能夠?qū)崟r(shí)的捕捉熒光信號(hào)，直接顯示在電腦上，該種方法是現(xiàn)階段比較靈敏和準(zhǔn)確的檢測(cè)樣品中的核酸含量的檢測(cè)方法，提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確率。但是該種方法成本比較高，不適合在基層養(yǎng)殖業(yè)中推廣。

2.3.2 核酸探針檢測(cè)核酸探針檢測(cè)是現(xiàn)階段分子生物學(xué)中應(yīng)用比較廣泛的基礎(chǔ)。該技術(shù)的主要特點(diǎn)是靈敏度高和特異性，同時(shí)操作簡(jiǎn)單，應(yīng)用于臨床樣本檢測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查中都具有重要的意義，尤其在血清學(xué)陽(yáng)性和慢性病人血清的檢測(cè)中發(fā)揮著重要的作用。

2.3.3 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)該技術(shù)的特異性比較強(qiáng)，具有很好的擴(kuò)張效果。此外，該技術(shù)的靈敏度和特異性都比較好，具有檢測(cè)速度快、簡(jiǎn)單和經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)，不需要采取專用的儀器設(shè)備，在基層畜牧業(yè)發(fā)展中可以用于布魯氏菌的快速檢測(cè)，是當(dāng)前快速檢測(cè)布魯氏菌的有效手段。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)越來(lái)越明顯，對(duì)設(shè)備的要求不高，操作簡(jiǎn)單，減少了檢測(cè)過(guò)程中的費(fèi)用。

3 布魯氏菌病的防治

3.1 定期的免疫接種通過(guò)免疫接種能夠預(yù)防布魯氏菌病，結(jié)合養(yǎng)殖地所在的實(shí)際情況選擇疫苗接種。為了加強(qiáng)免疫的效果，在接種完成的兩年內(nèi)可以進(jìn)行再一次接種。如果檢測(cè)出陽(yáng)性群，需要用3 年的時(shí)間接種，可以在第4 年停止接種，然后進(jìn)行疫情的觀測(cè)。

3.2 提高防疫工作的認(rèn)識(shí)程度布魯氏菌病是牛羊養(yǎng)殖業(yè)中重要的傳染性疾病，在養(yǎng)殖中要提高養(yǎng)殖人員的防疫意識(shí)，保證人畜的健康。加強(qiáng)防疫工作的管理力度，認(rèn)真落實(shí)好各個(gè)部門的責(zé)任，將具體的責(zé)任落到實(shí)處，提高防疫的效果，防疫站應(yīng)該負(fù)起自身的責(zé)任，加強(qiáng)對(duì)牛羊的檢疫，做好日常養(yǎng)殖中的消毒工作，一旦檢測(cè)出疫病的存在，對(duì)養(yǎng)殖地區(qū)進(jìn)行全面的消毒，防止疫情的擴(kuò)散。

3.3 加大資金的投入力度加大資金的投入力度也能提高防疫的效果，政府應(yīng)該重視對(duì)基礎(chǔ)設(shè)施的建設(shè)，建立疫苗技術(shù)試驗(yàn)基地，購(gòu)買最新的設(shè)備，聘請(qǐng)專家研究牛羊布魯氏菌病的防疫對(duì)策，提高防治的效果。重視對(duì)布魯氏菌病防疫工作的推廣，可以借助互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)的力量，在官網(wǎng)中傳播動(dòng)物防疫工作的信息，加大對(duì)防疫工作的人事宣傳力度，讓更多的人認(rèn)識(shí)到該病的危害。引導(dǎo)養(yǎng)殖戶利用網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)掌握最新的養(yǎng)殖技術(shù)，能夠通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)平臺(tái)掌握布魯氏菌病的防疫技術(shù)，從整體上提高防疫的效果。

3.4 完善防疫體系相關(guān)部門要建立疫病防疫制度，完善防疫體系，保證牛羊布魯氏菌病防疫工作的順利開展。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和科技水平的進(jìn)步，需要科研工作者不斷努力和實(shí)驗(yàn)研究出最先進(jìn)的診斷方法，為布魯氏菌病的治療提供有效的數(shù)據(jù)支持，確保布魯氏菌病防控工作的順利開展。

4 結(jié)語(yǔ)

隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和科技水平的進(jìn)步，布魯氏菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)也在提高，同時(shí)出現(xiàn)了越來(lái)越多的診斷方法，對(duì)確診布魯氏菌病意義重大，為布魯氏菌病的防治工作奠定了基礎(chǔ)。