華純芳　張純林　高錦偉　張潘

【摘要】目的：探討7項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體在兒童呼吸道感染中的診斷價(jià)值。方法：收集因呼吸道感染來(lái)無(wú)錫市第八人民醫(yī)院住院的患兒2898例，采用間接免疫熒光法檢測(cè)7種病原體，從病原體的構(gòu)成、季節(jié)分布、性別差異、年齡差異等幾方面分析其流行病學(xué)特征。結(jié)果：2898例患兒中共檢出陽(yáng)性1170例，陽(yáng)性率40.37%，以肺炎支原體-IgM（MP-IgM）的檢出率最高（27.78%） ;混合病毒感染檢出107例（3.69%），占全部感染例數(shù)的9.15%，其中MP與乙型流感病毒-IgM（IFB-IgM）的混合感染在混合感染中所占比例最高為5.64%;不同季節(jié)呼吸道病毒檢出率不同，以秋季的檢出率最高（53.49%）;不同性別間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），女童呼吸道病毒檢出率較高（45.95%）;不同年齡組呼吸道病毒檢出率不同（P<0.05），4～6歲患兒陽(yáng)性檢出率最高（53.75%）。結(jié)論：兒童呼吸道病原體檢出率較高，MP是無(wú)錫地區(qū)兒童呼吸道病毒感染的主要病原體，在4～6歲患兒和秋冬季高發(fā)，要加強(qiáng)防護(hù)。

【關(guān)鍵詞】呼吸道病原體;間接免疫熒光法;兒童

[中圖分類號(hào)]R725.6;R446.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]2096-5249（2021）10-0184-02

急性呼吸道感染是一組嚴(yán)重危害人類健康的疾病，其傳染力極強(qiáng)，傳播速度快，發(fā)病率占急性傳染病的首位，在我國(guó)每年都有不同程度的流行[1]。呼吸道病原體種類和致病率因不同國(guó)家、不同地區(qū)、不同季節(jié)等而有所差異，同一病原體可引起疾病的不同臨床表現(xiàn)，相同的臨床表現(xiàn)也可能是由不同或多種混合病原體引起。呼吸道感染是兒童時(shí)期常見(jiàn)的疾病之一，發(fā)病初期，快速診斷呼吸道感染病原體至關(guān)重要，否則，醫(yī)生很難僅憑臨床癥狀，對(duì)病原體進(jìn)行針對(duì)性治療，常會(huì)致抗生素的濫用，延擱患兒的診斷和治療。本文通過(guò)對(duì)7項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體的檢測(cè)結(jié)果分析，旨在為兒童預(yù)防呼吸道感染及臨床診斷治療提供依據(jù)。

1 解決方法與執(zhí)行過(guò)程

1.1 標(biāo)本來(lái)源 收集2019年1月1日～2019年12月31日來(lái)無(wú)錫市第八人民醫(yī)院住院的呼吸道感染患兒2898例，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、咽痛、流涕、咳嗽等癥狀，其中男1590例，女1308例。年齡在1個(gè)月至18歲之間，<1歲318例（占10.97%），1～3歲1258例（占43.41%），4～6歲800例（占27.61%），>6歲522例（占18.01%）。

1.2 標(biāo)本采集 清晨抽取患兒空腹靜脈血3ml，3500r/min分離血清，當(dāng)日完成檢測(cè)。

1.3 試劑和儀器 試劑盒為歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司提供的呼吸道病原體譜抗體IgM檢測(cè)試劑盒，采用間接免疫熒光法對(duì)患者血清標(biāo)本進(jìn)行7項(xiàng)呼吸道病原體[甲型流感病毒-IgM（IFA-IgM），乙型流感病毒-IgM（IFB-IgM），肺炎支原體-IgM（MP-IgM），肺炎衣原體-IgM（CP-IgM），腺病毒-IgM（ADV-IgM），呼吸道合胞病毒-IgM（RSV-IgM），副流感病毒-IgM（PIV-IgM）]檢測(cè)。儀器為倒置熒光顯微鏡（EUROStar Ⅲ Plus），旋渦混合器為上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠生產(chǎn)（XW-80A），臺(tái)式離心機(jī)購(gòu)置北京白洋醫(yī)療器械有限公司（G16），生物安全柜（蘇凈安泰BSC-130011132）。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作及結(jié)果判斷。上述所有生物試劑都有正式批號(hào)，均在有效期內(nèi)使用。

1.4 檢測(cè)方法 ①取患兒血清22.5ul，用樣本稀釋液1：10稀釋后，3000r/min離心10min去除沉淀，②取30ul稀釋后的樣本上清液加至除肺炎支原體以外的反應(yīng)區(qū);取22.5ul稀釋后的樣本上清液，再用PBS吐溫緩沖液1：10稀釋，取上述卜100稀釋后的標(biāo)本30ul加至肺炎支原體的反應(yīng)區(qū)，陰陽(yáng)性對(duì)照同樣本，③18～25℃溫育30min，用PBS吐溫緩沖液沖洗后立即放入裝有PBS吐溫緩沖液中浸泡至少5min，④取出自然風(fēng)干后滴加25ul FITC標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，⑤重復(fù)步驟③，⑥取出自然風(fēng)干后，滴加10ul甘油，用熒光顯微鏡200倍觀察熒光模型。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組間病原體陽(yáng)性率比較采用x2檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 單項(xiàng)呼吸道感染病毒陽(yáng)性檢出率 2898例標(biāo)本中共檢出陽(yáng)性1170例，陽(yáng)性率40.37%，以MP的檢出率最高（27.78%），其它依次為IFB（7.25%），CP（2.24%），PIV（1.62%），IFA（0.93%），ADV（0.41%），RSV（0.14%）。

2.2 混合病原體感染結(jié)果 2898例標(biāo)本中，三重感染本研究?jī)H檢出2例，都為MP+IFA+IFB，混合感染中以MP或IFB參與的感染最多，占比9.15%（107/1170），見(jiàn)表1。

2.3 不同季節(jié)呼吸道病原體檢出率 MP在四季中的陽(yáng)性率均最高，IFB在冬季的陽(yáng)性率最高，PIV在秋季的陽(yáng)性率最高。RSV全年僅4例，秋冬季各2例。詳見(jiàn)表2。

2.4 不同性別與呼吸道病原體感染的關(guān)系 2898例標(biāo)本中，男女性別間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=30.78，P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.5 各年齡組中呼吸道病原體的檢出情況 四個(gè)年齡組中，4～6歲患兒陽(yáng)性檢出率最高（53.75%），其次為>6歲組（40.8%），1～3歲組（38.79%），<1歲組（12.26%），前三組陽(yáng)性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[6歲組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。MP、IFB、CP在4～6歲組均高于其他年齡組。

3 討論

本研究對(duì)具有呼吸道感染癥狀的2898名患兒采用間接免疫熒光法進(jìn)行7項(xiàng)呼吸道病原體IgM檢測(cè)，該檢測(cè)方法方便、快速，一次可檢測(cè)7個(gè)項(xiàng)目，既可檢測(cè)出單項(xiàng)感染，又可發(fā)現(xiàn)病原體的混合感染，其結(jié)果方便臨床醫(yī)生正確選擇有效的抗感染藥物，有利于對(duì)患者進(jìn)行針對(duì)性治療。2898例患兒共檢測(cè)出1170例陽(yáng)性，陽(yáng)性率40.37%（1170/2898），與韓歡等[2]的研究結(jié)果有很大的區(qū)別，韓歡等研究結(jié)果的陽(yáng)性率為19.20%，這可能與不同地區(qū)的氣候差異、不同人群、不同檢測(cè)方法有關(guān)，韓歡等采用的是直接免疫熒光法，RSV的感染陽(yáng)性率最高，而本研究采用的間接免疫熒光法，以MP的感染最高27.78%，與陳文華等[3]報(bào)道的MP陽(yáng)性率26.39%相近，其次是IFB（7.25%），MP、IFB感染率占陽(yáng)性病例的86.75%。混合感染107例，混合感染率3.69%（107/2898），其中MP+IFB混合感染66例，MP+PIV混合感染 19例，MP+CP混合感染14例，三重感染本研究?jī)H檢出2例，都為MP+IFA+IFB，混合感染中以MP或IFB參與的感染最多，占陽(yáng)性病例的9.15%（107/1170）。從統(tǒng)計(jì)結(jié)果來(lái)看，無(wú)錫地區(qū)秋冬季引起呼吸道感染的主要病原體為MP，其次為IFB，對(duì)于采取針對(duì)性的預(yù)防措施有一定的意義，可以起到一定的預(yù)防作用，減少M(fèi)P的感染。肺炎支原體主要通過(guò)呼吸道飛沫傳播，容易造成患兒的呼吸道感染，感染一種病原體后患者的身體處于較弱階段，免疫力下降，如果與其他患兒接觸，交叉感染的機(jī)會(huì)就會(huì)增加[4]。

綜上所述，本地區(qū)兒童呼吸道病原體感染的首要病原是MP，在4～6歲的孩子中發(fā)病率最高，秋冬季高發(fā)，女童的陽(yáng)性率高于男童。通過(guò)本次研究可知，7項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)在兒童呼吸道感染中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，能及時(shí)為臨床提供病原學(xué)資料，為兒童呼吸道感染的精準(zhǔn)醫(yī)療提供依據(jù)，并對(duì)減少抗生素濫用也具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

[1]于娟，李紅，饒華祥，等.流感高發(fā)季節(jié)150例流感病毒核酸陰性的流感樣病例鼻咽分泌物呼吸道病毒檢測(cè)分析[J].山東醫(yī)藥，2018，58（31）：40-43.

[2]韓歡，古今剛，吳文文，等.11744例兒童7項(xiàng)呼吸道病毒抗原檢測(cè)結(jié)果[J].武漢大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2019，40（3）：425-428.

[3]陳文華，何寶明，毋崇嶺.住院患兒呼吸道病毒感染檢測(cè)結(jié)果分析[J].山西醫(yī)藥雜志，2018，47（20）：2478-2480.

[4]楊麗華，張清慧，吳毅凌，等.上海市松江地區(qū)急性上呼吸道感染患兒呼吸道病毒感染研究[J].國(guó)際病毒學(xué)雜志，2017，24（6）：388-393.

作者簡(jiǎn)介：華純芳（1981.11-），女，本科學(xué)歷，主管技師，研究方向：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)。