趙云平,徐宏忍,潘永圣,郭 杰,尹利民

(云南省昆明市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650011)

-淋巴細(xì)胞亞群是機(jī)體調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答水平、維持免疫穩(wěn)定的重要細(xì)胞。冷凝集現(xiàn)象給淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)帶來(lái)一定困難，冷凝集不僅影響RBC，對(duì)淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞及中性粒細(xì)胞等白細(xì)胞也會(huì)產(chǎn)生凝集作用[1]。

1 病例介紹

患者女，48歲，診斷為多發(fā)性骨髓瘤8月余，于2020-05月在昆明市第一人民醫(yī)院鞏固治療，其間檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群，標(biāo)本為乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝靜脈血，發(fā)生冷凝集現(xiàn)象。檢測(cè)設(shè)備：CantoII流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD公司),檢測(cè)試劑：淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒(美國(guó)BD公司)。

采取以下幾種方法處理患者標(biāo)本：①直接上機(jī)檢測(cè)：將冷凝集標(biāo)本直接按照儀器和試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)；儀器提示無(wú)法吸樣等報(bào)警信息，樣本管內(nèi)壁肉眼觀(guān)察可見(jiàn)管壁有細(xì)沙樣顆粒物質(zhì)，顯微鏡下觀(guān)察血涂片可見(jiàn)大量紅細(xì)胞成緡錢(qián)狀排列。②37℃水浴法：將冷凝集標(biāo)本水浴箱溫浴30 min后，嚴(yán)格按照儀器和試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)；儀器提示無(wú)法吸樣等報(bào)警信息，觀(guān)察試管壁出現(xiàn)細(xì)沙樣顆粒物質(zhì)。③血漿置換法：將冷凝集標(biāo)本1 600 r·min-1離心5 min分離血漿，吸棄血漿，保留全部白細(xì)胞和血小板層，加入等量生理鹽水，振蕩混勻，嚴(yán)格按照儀器和試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)；經(jīng)此方法處理后，紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象完全消失，儀器吸樣正常，無(wú)相關(guān)報(bào)警信息；檢測(cè)結(jié)果CD3+T淋巴細(xì)胞0.533×109/L，與血常規(guī)淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)(0.600×109/L)比較差異無(wú)顯著性(P<0.05)。

2 討 論

健康人血清中含少量冷凝集素，但效價(jià)很低，一般在1∶16以下，環(huán)境溫度<4℃時(shí)才有活性，產(chǎn)生凝集現(xiàn)象，當(dāng)溫度達(dá)到20℃時(shí)一般不會(huì)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。但在某些病理(如自身免疫性溶血性貧血、多發(fā)性骨髓瘤及支原體肺炎等)情況下，冷凝集素效價(jià)可異常增高[2]。血液離體后溫度降低，較高濃度的冷凝集素可誘導(dǎo)紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集現(xiàn)象[3]。冷凝集素會(huì)與紅細(xì)胞結(jié)合，凝集的紅細(xì)胞在溫度>37℃時(shí)可逆性散開(kāi)，并快速?gòu)募t細(xì)胞表面解離，此時(shí)不會(huì)造成非特異性凝集[4]。

該患者為多發(fā)性骨髓瘤患者，標(biāo)本發(fā)生冷凝集，血常規(guī)標(biāo)本37℃水浴法處理后可正常檢測(cè)，結(jié)果準(zhǔn)確，但淋巴細(xì)胞亞群標(biāo)本用37℃水浴法處理后儀器仍然無(wú)法吸樣，推測(cè)可能是兩者檢測(cè)過(guò)程不一樣導(dǎo)致。血常規(guī)是溫浴完成立即上機(jī)檢測(cè)，檢測(cè)時(shí)間短，標(biāo)本不會(huì)很快產(chǎn)生冷凝集現(xiàn)象；流式細(xì)胞儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群需30 min進(jìn)行前處理，標(biāo)本又會(huì)產(chǎn)生冷凝集現(xiàn)象，所以37℃水浴法可能不適合冷凝集淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)。冷凝集素是引起標(biāo)本冷凝集的主要原因，理論上將血漿中冷凝集素清除，標(biāo)本即不會(huì)發(fā)生冷凝集，因此血漿置換法可能更適合冷凝集淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)。