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      不同產(chǎn)地覆盆子微量元素含量的相關(guān)性研究

      2021-02-28 04:02:10蔣永海王偉倩鄧俊杰呂林峰紹興市食品藥品檢驗(yàn)研究院國(guó)家黃酒產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心紹興312071
      西北藥學(xué)雜志 2021年6期
      關(guān)鍵詞:覆盆子產(chǎn)地微量元素

      蔣永海,王偉倩,鄧俊杰,呂林峰(紹興市食品藥品檢驗(yàn)研究院 國(guó)家黃酒產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心,紹興 312071)

      覆盆子(RubiFructus)為薔薇科懸鉤子屬植物掌葉覆盆子(RubuschingiiHu)的干燥未成熟果實(shí),具有益腎、固精、縮尿的功效,用于治療腎虛遺尿、小便頻數(shù)、陽(yáng)痿早泄、遺精滑精等[1]?,F(xiàn)代研究表明,覆盆子的主要成分有鞣質(zhì)、萜類(lèi)、黃酮等,藥理作用主要有抗誘變、改善學(xué)習(xí)記憶能力、延緩衰老、增強(qiáng)免疫、調(diào)控性腺軸等[2]。鞣花酸為覆盆子中鞣質(zhì)的主要成分,具有良好的抗炎、抗誘變和抗菌等作用[3-5]。異槲皮苷、山柰酚-3-O-β-D-蕓香糖苷、椴樹(shù)苷和山柰酚為覆盆子中黃酮類(lèi)的主要成分[6],藥理學(xué)研究表明,其均具有抗氧化、抗炎等作用[7-10]。

      研究表明,中藥微量元素的含量和分布受品種、產(chǎn)地氣候等因素的影響[11]。同種藥材,遺傳特性相似,其所含的微量元素在含量上和品種上具有一定的規(guī)律,可以作為鑒別的依據(jù)。本研究采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定了10個(gè)產(chǎn)地覆盆子所含27種微量元素[鉀(K)、鈉(Na)、鈣(Ca)、鎂(Mg)、鐵(Fe)、鍶(Sr)、銀(Ag)、鋁(Al)、砷(As)、鋇(Ba)、鈹(Be)、鎘(Cd)、鈷(Co)、鉻(Cr)、銅(Cu)、錳(Mn)、鉬(Mo)、鎳(Ni)、鉛(Pb)、銻(Sb)、硒(Se)、釷(Th)、鉈(Tl)、鈾(U)、釩(V)、鋅(Zn)和汞(Hg)][12-15]的含量,并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析,為覆盆子的質(zhì)量評(píng)價(jià)[16]及進(jìn)一步研究提供科學(xué)依據(jù)。

      1 儀器與試藥

      1.1儀器 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS) 7500a(美國(guó)安捷倫儀器有限公司);微波消解儀(美國(guó)CEM 公司);超純水儀(美國(guó)Millipore公司);百萬(wàn)分之一電子天平(梅特勒-托列多儀器上海有限公司);5和10 μL移液槍(德國(guó)BRAND公司)。

      1.2試藥 覆盆子樣品分別來(lái)源于浙江三門(mén)、浙江文成、福建柘榮、江西玉山、皖南涇縣、皖南歙縣、皖南績(jī)溪、浙江衢州航埠、浙江千島湖和浙江蘭溪,經(jīng)蔣永海主任中藥師鑒定為薔薇科懸鉤子屬植物掌葉覆盆子(RubuschingiiHu)的干燥未成熟果實(shí),標(biāo)本存放于原藥材標(biāo)本室。

      硝酸(優(yōu)級(jí)純,批號(hào)STBJ1332,美國(guó)Sigma-Aldrich公司);超純水(電阻率18.2 MΩ·cm,美國(guó)Millipore公司);體積分?jǐn)?shù)30%過(guò)氧化氫(優(yōu)級(jí)純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);26種元素混合對(duì)照品儲(chǔ)備液(批號(hào)54-224CRY2,美國(guó)安捷倫儀器有限公司):K、Na、Ca、Mg、Fe(質(zhì)量濃度均為1 000 μg·mL-1),Sr(質(zhì)量濃度為100 μg·mL-1),Ag、Al、As、Ba、Be、Cd、Co、Cr、Cu、Mn、Mo、Ni、Pb、Sb、Se、Th、Tl、U、V、Zn(質(zhì)量濃度為10 μg·mL-1);汞元素對(duì)照品溶液(質(zhì)量濃度為1 000 μg·mL-1,編號(hào)GBW08617-6003,國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心);質(zhì)譜調(diào)諧液[鋰(Li)、釔(Y)、鈰(Ce)、Tl、Co的質(zhì)量濃度均為10 μg·L-1,國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心];內(nèi)標(biāo)溶液[鈧(Sc)、鍺(Ge)、銦(In)、鉍(Bi)的質(zhì)量濃度均為0.01 μg·L-1,國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心],使用前用體積分?jǐn)?shù)2%的硝酸溶液稀釋至質(zhì)量濃度為1 μg·L-1的溶液。

      2 方法與結(jié)果

      2.1ICP-MS測(cè)定工作條件 檢測(cè)時(shí)的ICP-MS條件參數(shù)見(jiàn)表1。

      表1 檢測(cè)時(shí)ICP-MS的條件參數(shù)Tab.1 Condition parameters of ICP-MS in detection

      2.2微波消解儀的工作參數(shù) 消解時(shí)分三步,第一步最大功率為1 600 W,使用功率為100%,爬升時(shí)間為6 min,消解溫度為120 ℃,保持時(shí)間為3 min;第二步、第三步的最大功率和使用功率不變,爬升時(shí)間均為3 min,消解溫度分別為150、160 ℃,保持時(shí)間分別為3、15 min。

      2.3對(duì)照品溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 用移液槍精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液,加體積分?jǐn)?shù)為2%的硝酸溶液稀釋?zhuān)渲瞥扇缦沦|(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液。含Ag、Al、As、Ba、Be、Cd、Co、Cr、Cu、Mn、Mo、Ni、Pb、Sb、Se、Th、Tl、U、V、Zn的混合對(duì)照品溶液,質(zhì)量濃度分別為2、5、20、50、200 ng·mL-1;質(zhì)量濃度分別為20、50、200、500、2 000 ng·mL-1的Sr對(duì)照品溶液:含K、Na、Ca、Mg、Fe的混合對(duì)照品溶液,質(zhì)量濃度分別為200、500、2 000、5 000、20 000 ng·mL-1;質(zhì)量濃度分別為0.1、0.5、2、5、10、50 ng·mL-1的Hg對(duì)照品溶液。

      2.4樣品前處理

      2.4.1材料準(zhǔn)備 將覆盆子去除雜質(zhì),蒸氣殺青,置于60 ℃烘箱中加熱8 h烘干,冷卻后,采用四分法分取樣品,粉碎,備用。

      2.4.2樣品制備 分別精密稱(chēng)取處理好的覆盆子樣品0.5 g各3份,置于聚四氟乙烯消解罐中,加硝酸4 mL,超純水4 mL,置于微波消解儀內(nèi),按2.2項(xiàng)下條件消解。冷卻降壓后,用超純水洗滌定容至25 mL,搖勻備用,同時(shí)做試劑空白,待測(cè)。

      2.5線性關(guān)系 按2.4項(xiàng)下方法操作,繪制各元素的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,見(jiàn)表2。

      表2 各元素的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線、線性范圍及檢出限Tab.2 Linearity parameters and limits of detection

      2.6精密度測(cè)定 取覆盆子0.5 g,按2.4.2項(xiàng)下方法操作,進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)6次,計(jì)算得RSD值為1.97%,表明精密度良好。

      2.7加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱(chēng)取上述精密度測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣品0.5 g,按2.4.2項(xiàng)下步驟操作,精密加入相應(yīng)的對(duì)照品溶液,進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)6次,測(cè)定得加樣回收率為95.1%~97.9%,RSD<2.87%。

      2.8樣品測(cè)定 按照2.4.2項(xiàng)下方法制備樣品,進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)3次,按照所設(shè)定的儀器工作條件,分別對(duì)10個(gè)產(chǎn)自不同地區(qū)的覆盆子中所含微量元素的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表3。

      2.9測(cè)得結(jié)果處理 查閱文獻(xiàn),以Zn、Fe、Cu、Mn、Co、Cr、Sn、V、Sr、Ni、Pb、As、Hg和Cd 14種元素在人體內(nèi)含量和日攝入量[5]為參考,將其與各不同地區(qū)所產(chǎn)覆盆子(12 g)中的含量進(jìn)行比較,結(jié)果見(jiàn)表4。

      3 討論

      隨著研究的不斷深入,微量元素[17]對(duì)人體健康的影響越來(lái)越受到重視。世界衛(wèi)生組織曾提出:Fe、F、Zn、Cu、Mo、Co、Sr、Cr、Mn、Ni、I、Se、Sn、V 14種人體所必需的微量元素,參與人體中多個(gè)生理病理過(guò)程,是維持人體健康所必需的物質(zhì)[18-19]。近年來(lái)越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)為,中草藥中的微量元素與中草藥的功效存在著必然聯(lián)系[18-19],微量元素在功效中發(fā)揮的作用不容低估。

      近年來(lái)重金屬中毒事件的報(bào)道越來(lái)越多,這些重金屬,如Pb、Hg、As、Cd對(duì)人體健康的危害極大[11]。由表4可以看出,人日食覆盆子在12 g以內(nèi)時(shí),Pb、Hg、As和Cd 4種重金屬元素均未超出日攝入量最高值,故10個(gè)地區(qū)覆盆子中此4種重金屬元素均在安全值范圍內(nèi),均未超標(biāo),食用安全。

      對(duì)于放射性元素,目前的研究中鮮見(jiàn)放射性元素對(duì)人體健康有益的報(bào)道,多數(shù)放射性元素對(duì)人體健康具有危害,如有研究表明,鉈(TI)為可疑致癌元素[11]。因此,對(duì)于這類(lèi)微量元素,人體攝入量越少越好。

      10個(gè)產(chǎn)地所產(chǎn)覆盆子中所含微量元素的種類(lèi)豐富,尤其是人體必需微量元素就有10余種。除Cr、Mn含量較高外,其他人體必需微量元素的含量既高又在人體的安全攝取閾值內(nèi),并且其所含的常量元素,如K、Ca、Mg等的含量均較豐富,所以此10個(gè)產(chǎn)地所產(chǎn)覆盆子有較高的醫(yī)療保健價(jià)值[20]。此外,10個(gè)產(chǎn)地所產(chǎn)覆盆子中,所含的Pb、Hg、As、Cd 4種重金屬元素的含量均在安全值范圍內(nèi),均未超出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),故此10個(gè)產(chǎn)地中,除浙江千島湖和衢州航埠外,其余產(chǎn)地所產(chǎn)的覆盆子均可以開(kāi)發(fā)加工成相應(yīng)的藥材或保健品。不建議使用上述2個(gè)產(chǎn)地的覆盆子,是因?yàn)檫@2個(gè)產(chǎn)地所產(chǎn)覆盆子中均含有少量的放射性元素,如TI等,這些元素對(duì)人體有一定的危害,雖然其含量較少,但這些元素半衰期較長(zhǎng),不易降解消除,所以長(zhǎng)時(shí)間過(guò)量食用此覆盆子,會(huì)造成這些元素在人體內(nèi)的蓄積,久之損害身體,不利于人體健康。比較而言,其中Mn是浙江千島湖、皖南歙縣、福建柘榮和皖南績(jī)溪產(chǎn)覆盆子富集較多的元素,也是差異性元素,提示覆盆子類(lèi)中藥的補(bǔ)陽(yáng)作用可能與其含有較高的Mn元素有一定關(guān)系;所含22種對(duì)人體有益的微量元素(K、Na、Ca、Mg、Fe、Zn、Cu、Mn、Co、Ni、Pb、As、Cr、Cd、Se、Mo、Sb、Sr、Hg、Ag、Al和V)中,9種(K、Na、Mg、Zn、Cu、Cd、Mn、Sr和Al)含量也高于其他產(chǎn)地,8種(Ca、Fe、Co、Ni、Cr、Se、Mo和V)次之,為傳統(tǒng)產(chǎn)區(qū)覆盆子的質(zhì)量評(píng)價(jià)及道地性研究提供依據(jù)。除浙江千島湖、皖南歙縣、福建柘榮和皖南績(jī)溪外,有6個(gè)產(chǎn)地的覆盆子中Cr元素的含量明顯偏高,超出人體日安全攝取量,其產(chǎn)生機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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