肝癌衍生生長(zhǎng)因子在膀胱移行細(xì)胞癌中表達(dá)及臨床意義

劉東博，孟宇濤

葫蘆島市中心醫(yī)院 泌尿外科，遼寧 葫蘆島 125000

膀胱癌是臨床常見(jiàn)的腫瘤之一，是全球范圍內(nèi)發(fā)病率、病死率最高的泌尿系統(tǒng)腫瘤[1-2]。臨床上，90%膀胱癌的病理類(lèi)型為移行細(xì)胞癌。在首次診斷為膀胱癌的患者中，表淺性膀胱癌患者占75%，肌層浸潤(rùn)癌患者占25%，其進(jìn)展速度快、復(fù)發(fā)率較高，往往治療效果及預(yù)后欠佳[3-5]。因此，尋找有效診斷和治療膀胱移行細(xì)胞癌的分子表達(dá)特性對(duì)其診治具有重要意義。肝癌衍生生長(zhǎng)因子(hepatoma-derived growth factor，HDGF)是在肝、腎等器官發(fā)育早期出現(xiàn)的一種肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子[6]。HDGF與肺癌、胃腸癌、胰腺癌等惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[7-10]。但在膀胱移行細(xì)胞癌中，HDGF的作用尚不明確。本研究旨在探討HDGF在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取自2014年1月至2018年1月葫蘆島市中心醫(yī)院收治的120例膀胱移行細(xì)胞癌患者的癌組織及癌旁正常組織為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者術(shù)前均未接受放化療和生物治療；未合并其他腫瘤；臨床與隨訪(fǎng)資料完整。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 研究方法 采用鏈霉卵白素-生物素進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。具體操作如下：石蠟包埋組織切片，二甲苯脫蠟，梯度酒精水化，高壓鍋內(nèi)抗原修復(fù)，滴加一抗4℃過(guò)夜，次日再依次滴加二抗37℃孵育，最后用DAB顯色，蘇木素染核，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。采用半定量計(jì)數(shù)法進(jìn)行癌組織中HDGF表達(dá)結(jié)果的判定，高倍鏡下選取10個(gè)視野，計(jì)算出陽(yáng)性細(xì)胞的百分比，計(jì)算10個(gè)視野的平均值，對(duì)總細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞比例進(jìn)行評(píng)分。

1.3 結(jié)果判斷 (1)總細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞比例進(jìn)行評(píng)分：0分，陽(yáng)性細(xì)胞比例≤5%；1分，陽(yáng)性細(xì)胞比例6%～25%；2分，陽(yáng)性細(xì)胞比例25%～50%；3分，陽(yáng)性細(xì)胞比例50%～75%；4分，陽(yáng)性細(xì)胞比例>75%。(2) 染色強(qiáng)度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0分為不著色，1分為淺黃色，2分為棕黃色，3分為黃褐色。染色強(qiáng)度評(píng)分×陽(yáng)性細(xì)胞評(píng)分作為免疫組織化學(xué)法評(píng)分，將評(píng)分>4分視為陽(yáng)性表達(dá)，評(píng)分≤4分視為陰性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料以例(百分率)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。采用Cox回歸分析影響膀胱癌患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 癌組織及癌旁正常組織HDGF表達(dá)情況比較 HDGF在癌組織及癌旁正常組織中均有不同程度的表達(dá)，主要表達(dá)在細(xì)胞核中，陽(yáng)性表達(dá)呈黃色或棕黃色改變，可見(jiàn)細(xì)小顆粒。癌組織中HDGF陽(yáng)性率為73.33%(88/120)，高于癌旁正常組織的15.83%(19/120)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 癌組織中HDGF表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 HDGF的表達(dá)與臨床病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度相關(guān)(P<0.05)；與性別、年齡無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 癌組織中HDGF的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

2.3 影響膀胱癌患者預(yù)后危險(xiǎn)因素分析 Cox多因素回歸分析結(jié)果顯示，HDGF高表達(dá)是影響膀胱癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 Cox多因素回歸分析

3 討論

膀胱移行細(xì)胞癌是泌尿生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤。HDGF基因在多種組織器官如心、肺、肝、胎盤(pán)及骨骼肌中均有表達(dá)[11]。HDGF參與了多種胚胎組織的生長(zhǎng)發(fā)育，進(jìn)入細(xì)胞核后能夠促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及肝癌細(xì)胞等多種細(xì)胞的增殖及生長(zhǎng)。HDGF也能夠促進(jìn)自身和鄰近細(xì)胞的增殖，發(fā)揮旁分泌和自分泌的作用。HDGF在腫瘤的發(fā)生過(guò)程中起著廣泛的作用，如癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化、凋亡、血管生成和轉(zhuǎn)移等。Everett等[12]研究發(fā)現(xiàn)，HDGF能夠促使血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖分化，促進(jìn)細(xì)胞DNA合成增加。另有研究表明，HDGF可能直接刺激血管生成或通過(guò)誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的合成來(lái)刺激血管的生成[13]。

本研究結(jié)果顯示，與正常膀胱尿路上皮組織相比，HDGF在膀胱移行細(xì)胞癌組織中表達(dá)顯著上調(diào)；免疫組織化學(xué)染色結(jié)果表明，HDGF在膀胱癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率與正常膀胱尿路上皮組織比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示其可能作為膀胱移行細(xì)胞癌的一種標(biāo)志物。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，癌組織中HDGF的表達(dá)與患者的臨床病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度相關(guān)，但與性別、年齡無(wú)明顯相關(guān)性，提示HDGF可能參與了膀胱癌的惡性進(jìn)程。最后，多因素Cox回歸分析發(fā)現(xiàn)，HDGF的表達(dá)是影響膀胱癌患者不良預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與張輝等[11]的研究結(jié)果一致。

綜上所述，膀胱移行細(xì)胞癌組織中HDGF表達(dá)與患者不良預(yù)后密切相關(guān)，但HDGF具體參與膀胱癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制還需后續(xù)深入研究。