王有為，胡積東，鄧小玲，魏 青，阮祥春,3*

青海省海南州藏羊腸道寄生蟲感染情況調(diào)查

王有為1，胡積東1，鄧小玲1，魏 青2*，阮祥春1,3*

(1. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，合肥 230036；2. 青海大學(xué)生態(tài)環(huán)境工程學(xué)院，西寧 810016；3. 獸醫(yī)病理生物學(xué)與疫病防控安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，合肥 230036)

為了解青海省海南州夏季藏羊腸道寄生蟲的感染情況，于2019年7—8月對(duì)牧區(qū)藏羊進(jìn)行腸道寄生蟲感染情況的調(diào)查。共采集共和縣、貴德縣、貴南縣、興?？h和同德縣藏羊糞便樣品990份。糞便經(jīng)飽和食鹽水處理、麥?zhǔn)嫌?jì)數(shù)、鏡檢，初步判定藏羊腸道寄生蟲的感染情況。結(jié)果表明，糞便中檢出蟲卵863份，總感染率為87%。共和縣、貴德縣、貴南縣、興?？h和同德縣的藏羊腸道寄生蟲感染率分別為84%、89%、91%、88%和86%。糞便中蟲卵初步鑒定為細(xì)頸線蟲卵、毛圓線蟲卵、仰口線蟲卵、奧斯特線蟲卵、捻轉(zhuǎn)血矛線蟲卵、球蟲卵囊和絳蟲卵。共和縣、貴德縣、貴南縣、興?？h和同德縣藏羊消化道線蟲的感染率分別為63%、86%、66%、72%和62%；球蟲的感染率分別為66.5%、53.5%、76%、65%和47%。夏季海南州藏羊腸道寄生蟲的感染率較高，且具有一定的區(qū)域差異性。

藏羊；腸道寄生蟲；感染率；海南州

青海省海南州平均海拔在3 000 m以上，草地資源豐富。海南州全州從事牧業(yè)的人數(shù)約為一半，是典型的半農(nóng)半牧區(qū)[1]。截止到2018年，海南州草食牲畜存欄456.02萬頭（只），各類牲畜出欄219.27萬頭（只），商品率43.21%，全州全年肉產(chǎn)量5.85萬噸，其中羊肉3.34萬噸，據(jù)2017年的統(tǒng)計(jì)，海南州的藏羊已經(jīng)達(dá)到374.35萬只[2-3]。

寄生蟲疾病是影響羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的一個(gè)重要因素[4]。羊體內(nèi)外感染寄生蟲主要分為3類：第一類是蠕蟲，如線蟲、絳蟲和肝片吸蟲；第二類是原蟲，如球蟲、泰勒蟲和弓形蟲；第三類是體表寄生蟲，如蜱蟲、螨蟲和羊蜱蠅等[5]。發(fā)生寄生蟲病后，母羊發(fā)情異常、受胎率低、流產(chǎn)或早產(chǎn)；種公羊的繁殖性能下降；羔羊成活率降低，感染嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致動(dòng)物死亡[6-7]。寄生蟲疾病嚴(yán)重影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能，使得養(yǎng)殖成本增加，經(jīng)濟(jì)效益低下[6,8]。近些年，青海地區(qū)牛羊的體內(nèi)寄生蟲主要以牛羊胃腸道線蟲為主，腸道球蟲感染率較低，報(bào)道也較少。體外寄生蟲報(bào)道較多主要有螨蟲、蜱蟲、草原草蜱、羊蜱蠅和足顎蠅等[9-10]。雖然青海省通過寄生蟲病的治理防控，取得了一定的效果，但是在牧區(qū)，因其特殊的放牧養(yǎng)殖模式，牛羊體內(nèi)外寄生蟲仍然流行廣泛[11]。

2019年7—8月通過對(duì)青海省海南藏族自治州牧區(qū)的藏羊腸道寄生蟲感染情況的調(diào)查，了解海南藏族自治州藏羊腸道寄生蟲的感染情況，為該地區(qū)藏羊腸道寄生蟲病的防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

NIKON數(shù)碼顯微鏡（RCH1-NKSOi）、McMaster’s計(jì)數(shù)板、載玻片、蓋玻片、80目銅篩和小安瓿瓶等。

1.2 方法

1.2.1 待采集樣本數(shù)量的確定 本試驗(yàn)按照90%的置信度，通過以下公式計(jì)算采集糞便樣品的數(shù)量。

N=(2×2)/2（1）

N=(N×)/(N+) （2）

：樣本總量；N：初始樣本量；N：待采集樣本數(shù)量；：置信度的統(tǒng)計(jì)量，當(dāng)置信度為95%時(shí)，=1.96，當(dāng)置信度為90%時(shí)，=1.64，：總體標(biāo)準(zhǔn)差，一般取0.05；：允許誤差值，一般取0.05。

1.2.2 采樣地點(diǎn)及數(shù)量 根據(jù)青海省海南州轄區(qū)地域分布、養(yǎng)殖情況和規(guī)模，選擇共和縣、貴德縣、貴南縣、興海縣和同德縣的7個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶），按照90%的置信度，經(jīng)公式計(jì)算最低糞便樣品采集數(shù)量。實(shí)際采集的樣品數(shù)大于或等于計(jì)算的最小樣品采樣數(shù)量。采樣地點(diǎn)及采樣數(shù)量的具體情況見表1。

表1 樣品采集地點(diǎn)及采集數(shù)量

1.2.3 樣品的采集與保存 經(jīng)藏羊直腸采取糞便樣品，將采集的糞樣裝進(jìn)封口袋，并標(biāo)記采樣時(shí)間、地點(diǎn)和編號(hào)等，實(shí)驗(yàn)室室溫保存。

1.2.4 糞便蟲卵的檢查 取新鮮糞便2 g于小燒杯中，加入適量飽和食鹽水，用玻璃棒攪拌拌勻，將混合液通過80目銅篩轉(zhuǎn)移到小安瓿瓶中，用膠頭滴管滴加飽和食鹽水至瓶口稍隆起，取載玻片蓋于瓶口上，靜置30 min后取下并加蓋玻片，置于顯微鏡下鏡檢。

1.2.5 蟲卵的計(jì)數(shù) 取新鮮糞便2 g于小燒杯中，用玻璃棒壓碎，加入飽和食鹽水58 mL，并用玻璃棒攪拌混勻，通過80目銅篩過濾，將濾液攪拌混勻，用吸管吸取少許，滴入蟲卵計(jì)數(shù)板的2個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)，放置在顯微鏡的載物臺(tái)上，靜置3 min后，用低倍鏡觀察2個(gè)計(jì)數(shù)室的蟲卵并計(jì)數(shù)，計(jì)算2計(jì)數(shù)室蟲卵的平均值，再乘以200，即為每克糞便中的蟲卵數(shù)（EPG）[12]。

1.2.6 蟲卵的鑒定 在顯微鏡下觀察蟲卵形狀，測(cè)量蟲卵的大小，對(duì)蟲卵進(jìn)行鑒定。

2 結(jié)果與分析

2.1 藏羊腸道寄生蟲感染情況

共檢測(cè)990份藏羊糞便樣品，檢出含有寄生蟲蟲卵樣品863份，總感染率為87%。5個(gè)縣的藏羊腸道寄生蟲感染率均較高，其中貴南縣塔秀鄉(xiāng)藏羊腸道寄生蟲感染率最高，達(dá)到了91%。共和縣鐵蓋鄉(xiāng)藏羊腸道寄生蟲蟲卵的感染強(qiáng)度最高，平均每克羊糞便中含有490.28個(gè)蟲卵；貴德縣巴卡臺(tái)北藏羊腸道寄生蟲蟲卵的感染強(qiáng)度最低（77.04），約為共和縣鐵蓋鄉(xiāng)藏羊腸道寄生蟲蟲卵的感染強(qiáng)度的1/7。各個(gè)縣藏羊腸道寄生蟲蟲卵的感染強(qiáng)度的范圍變化也存在一定差異。海南州藏羊腸道寄生蟲感染率、感染強(qiáng)度均值和感染強(qiáng)度范圍見表2。

表 2 海南州藏羊寄生蟲感染率及感染強(qiáng)度情況

表3 顯微鏡下觀察蟲卵結(jié)果

A.細(xì)頸線蟲卵（100×）；B.毛圓線蟲卵（100×）；C.仰口線蟲卵（100×）；D.奧斯特線蟲卵（100×）；E.捻轉(zhuǎn)血矛線蟲卵（100×）；F.球蟲卵囊（400×）；G.絳蟲卵（100×）；H.絳蟲蟲節(jié)。

Figure 1 Parasite eggs and Tapeworm nodes in the faeces of Tibetan sheep

2.2 藏羊腸道寄生蟲種類

通過顯微鏡下觀察蟲卵形態(tài)，結(jié)合測(cè)定的蟲卵大?。ū?），初步判定在采集的990份樣品中共檢出7種寄生蟲蟲卵，分別為細(xì)頸線蟲蟲卵、毛圓線蟲蟲卵、仰口線蟲蟲卵、奧斯特線蟲蟲卵、捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蟲卵、絳蟲蟲卵以及球蟲卵囊（圖1 A-G）。同時(shí)在檢查時(shí)還發(fā)現(xiàn)了絳蟲蟲節(jié)（圖1H）

2.3 海南州藏羊腸道寄生蟲的感染特點(diǎn)

本次調(diào)查表明，海南州5個(gè)縣的藏羊腸道寄生蟲感染主要為線蟲和球蟲，且藏羊腸道寄生蟲感染情況呈現(xiàn)出一定的區(qū)域特點(diǎn)。海南州藏羊腸道線蟲感染情況方面，貴德縣巴卡臺(tái)東藏羊腸道細(xì)頸線蟲、毛圓線蟲、奧斯特線蟲和捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染率最高，分別為21%、41%、34%和12%。但是，貴德縣巴卡臺(tái)藏羊腸道糞便中均未發(fā)現(xiàn)仰口線蟲和絳蟲的蟲卵，表明巴卡臺(tái)牧場(chǎng)內(nèi)藏羊受到仰口線蟲和絳蟲的感染的概率較低。與巴卡臺(tái)相似，共和縣藏羊腸道糞便中均未發(fā)現(xiàn)仰口線蟲。與貴德縣相反，貴南縣塔秀鄉(xiāng)藏羊腸道仰口線蟲和絳蟲感染率最高，分別為21%和48%。表明塔秀鄉(xiāng)藏羊仰口線蟲和絳蟲感染的防治效果有待提升，以減少對(duì)藏羊養(yǎng)殖的危害。與線蟲相比，海南州藏羊腸道球蟲感染情況有所不同，其中貴南縣感染率最高為76%，同德縣最低為47%。海南州各采樣地點(diǎn)的寄生蟲感染率情況及各縣藏羊寄生蟲感染率統(tǒng)計(jì)見表4和圖2。

表 4 海南州藏羊寄生蟲感染種類及感染率情況

(a)海南州5個(gè)縣藏羊寄生蟲感染率；(b)海南州5個(gè)縣藏羊線蟲與球蟲感染率。

Figure 2 Parasite infection rate of Tibetan sheep in Hainan state

3 討論

寄生蟲病在不同地區(qū)、不同養(yǎng)殖方式和不同品種的羊均常見[13-15]。青海地區(qū)海拔較高，以放牧為主要的養(yǎng)殖方式，天然草場(chǎng)容易受到寄生蟲感染，易引起羊寄生蟲病的發(fā)生。華吉卓瑪[16]對(duì)青海省果洛州久治縣藏羊體內(nèi)外寄生蟲進(jìn)行相關(guān)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，藏羊體內(nèi)寄生蟲感染率達(dá)到77.2%，體外寄生蟲感染率為22.8%。青海環(huán)湖地區(qū)牛羊體內(nèi)感染的寄生蟲主要有胃腸道線蟲、肝片吸蟲和絳蟲等[17]。通過對(duì)海南州5個(gè)縣采集的990份藏羊糞便樣品的檢查，檢出蟲卵的糞樣863份，平均感染率為87%。本次調(diào)查的時(shí)間在2019年的7—8月份，夏季天然草場(chǎng)牧草豐富，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）藏羊主要以放牧方式養(yǎng)殖，其感染率與舍飼方式養(yǎng)殖的羊有一定的差別。在采集樣品同時(shí)，初步檢查了藏羊體表，未發(fā)現(xiàn)蜱蟲成蟲、螨蟲與蜱蟲感染臨床癥狀。但是，部分養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）在6～12月齡的藏羊體表的頸背部發(fā)現(xiàn)較多的羊虱蠅，患羊主要表現(xiàn)為瘙癢不安，常在護(hù)欄上蹭癢，用嘴咬或蹄踢蟲體寄生部位。羊虱蠅主要造成羊毛質(zhì)量下降和羊營(yíng)養(yǎng)不良[18]，特別是對(duì)孕期的母羊。

通過本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，對(duì)于青海省不同地區(qū)的藏羊腸道寄生蟲感染情況有所不同，寄生蟲的感染也具有一定的區(qū)域特點(diǎn)。海南州各縣羊群消化道線蟲感染率較高。貴德縣巴卡臺(tái)藏羊腸道糞便中均未發(fā)現(xiàn)仰口線蟲和絳蟲的蟲卵，貴南縣塔秀鄉(xiāng)藏羊腸道仰口線蟲和絳蟲感染率最高。消化道線蟲所呈現(xiàn)的區(qū)域差異性，與轄區(qū)草場(chǎng)環(huán)境和藥物防治有一定關(guān)系。藏羊感染消化道線蟲會(huì)引起消瘦、貧血、營(yíng)養(yǎng)不良和抵抗力下降等，造成生產(chǎn)性能下降[19-20]。共和、貴德、貴南、興海和同德藏羊球蟲的感染率分別為66.5%，53.5%、76%、65%和47%。與近些年報(bào)道的青海省藏羊消化道球蟲的感染率相比，均有不同程度的提高，尤其共和縣鐵蓋鄉(xiāng)藏羊消化道球蟲的感染率均高于線蟲感染率總和。盡管羊球蟲對(duì)成年羊危害較小，但是對(duì)羔羊的危害大。成年羊體內(nèi)所攜帶的蟲卵容易引起羔羊爆發(fā)球蟲病。1—3月齡的羔羊發(fā)生球蟲病后，呈現(xiàn)下利、消瘦、貧血及發(fā)育不良等癥狀，甚至引起大批羔羊死亡。更重要的是若防治不當(dāng)，很容易對(duì)抗球蟲藥產(chǎn)生耐藥性，從而造成更大的危害。羊球蟲病感染可能與地域氣候，放牧和飲水衛(wèi)生等有一定的關(guān)系[21]。另外，與牧民重視消化道線蟲及體表寄生蟲的防治，長(zhǎng)期使用伊維菌素、吡喹酮和阿苯達(dá)唑等藥物，忽視了對(duì)腸道球蟲感染的防治有密切的關(guān)系。此次調(diào)查對(duì)海南州地區(qū)寄生蟲的防控具有一定的實(shí)踐指導(dǎo)意義。

由于青海特殊的地理環(huán)境，給牧區(qū)牛羊寄生蟲的防治帶來了一定困難。但是，通過提高牧民對(duì)牛羊寄生蟲病防控意識(shí)，合理用藥，也能取得很好的防治效果。調(diào)查期間發(fā)現(xiàn)由于牧民對(duì)疾病防控知識(shí)薄弱，存在羊的尸體隨意拋棄草場(chǎng)的現(xiàn)象。這不僅造成草場(chǎng)污染，而且易造成疾病的傳播。牧民須對(duì)病死動(dòng)物尸體應(yīng)進(jìn)行無公害化處理，確保草場(chǎng)清潔安全。另外，牧戶儲(chǔ)備藥物不足，且藥物種類單一。長(zhǎng)時(shí)間使用單一的藥物，容易產(chǎn)生耐藥性，影響寄生蟲病的防治效果[22]。養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）需要普及寄生蟲防治知識(shí)，定期驅(qū)蟲，做好羊群的綜合管理。如：藏羊球蟲感染率較高的區(qū)域，一方面有計(jì)劃的及時(shí)驅(qū)蟲，使用喂氨丙啉或莫能菌素等藥物治療；另一方面做好牲畜的飼養(yǎng)管理，盡量避免雨后放牧，禁止飲用死水等[23-24]。為預(yù)防藏羊感染絳蟲，在春季放牧過程中盡可能不在潮濕低洼處，在放牧后進(jìn)行預(yù)防驅(qū)蟲和消滅中間宿主地螨[25-26]，科學(xué)合理的使用抗絳蟲藥物。胃腸道的線蟲是反芻動(dòng)物的主要寄生蟲，是全世界羊養(yǎng)殖者經(jīng)濟(jì)損失的主要原因之 一[27-28]。針對(duì)不同線蟲引起的寄生蟲病，需要輪換用藥，配合用藥，適時(shí)給藥，減少線蟲病對(duì)藏羊養(yǎng)殖的危害。

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Investigation on intestinal parasitic infection in Tibetan sheep in Hainan state of Qinghai Province

WANG Youwei1，HU Jidong1，DENG Xiaoling1，WEI Qing2，RUAN Xiangchun1, 3

(1. School of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036;2. College of Ecology and Environmental Engineering, Qinghai University, Xining 810016;3. Anhui Province Key Laboratory of Veterinary Pathobiology and Disease Control, Hefei 230036)

To understand the infection of intestinal parasites in Tibetan sheep in summer in Hainan state of Qinghai Province. From July to August 2019, the infection of intestinal parasites in Tibetan sheep in pastoral areas was investigated. A total of 990 samples of Tibetan sheep feces were collected from Gonghe, Guide, Guinan, Xinghai and Tongde County. The feces were treated with saturated saline solution, Mackenzie count, and microscopic examination, and the infection of intestinal parasites in Tibetan sheep was preliminarily determined. The results showed that 863 samples in the feces found the eggs, and the total infection rate was 87%. In Gonghe, Guide, Guinan, Xinghai, and Tongde County, the infection rates of intestinal parasites in Tibetan sheep were 84%, 89%, 91%, 88% and 86%, respectively. The eggs in the feces were identified as Nematodirus eggs, Trichostrongyle eggs, Bunostomum eggs, Osteragia eggs, Haemonchus eggs, Coccidium oocysts and Tapeworm eggs. In Gonghe, Guide, Guinan, Xinghai, and Tongde County, the infection rates of intestinal nematode in Tibetan sheep were 63%, 86%, 66%, 72% and 62%, respectively. And the infection rates of intestinal Coccidium in Tibetan sheep were 66.5%, 53.5%, 76%, 65% and 47%, respectively. In summer, the infection rate of intestinal parasites in Tibetan sheep is high in Hainan state, and There are some regional differences.

Tibetan sheep; intestinal parasites; infection rate; Hainan state

S852.7; S826.83

A

1672-352X (2021)01-0079-05

10.13610/j.cnki.1672-352x.20210319.018

2021-3-23 11:59:57

[URL] https://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1162.S.20210319.1544.036.html

2020-01-19

安徽省重點(diǎn)研究和開發(fā)計(jì)劃（援青）項(xiàng)目（201904e01020002）和青海省重點(diǎn)研發(fā)與轉(zhuǎn)化計(jì)劃項(xiàng)目（2019-HZ-821）共同資助。

共同第一作者:王有為，碩士研究生。E-mail：1348539181@qq.com 胡積東，碩士研究生。E-mail：1984587013@qq.com

阮祥春，博士，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師。E-mail：rxc@ahau.edu.cn 魏 青，博士，副教授。E-mail：51746333@qq.com