張 旭，李 闖，黃 璇，蔣桂韜，李昊幫，戴求仲*

（1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所動物營養(yǎng)研究室，湖南長沙 410131；2.湖南家禽安全生產工程技術研究中心，湖南長沙 410128）

硒是人和動物必需的微量元素之一，硒與機體的生理功能關系密切，具有促進和調節(jié)人體免疫、抗腫瘤、抗氧化等許多重要的生理功能[1]。硒存在于動物體的多種功能蛋白、酶和肌肉細胞中，影響并維持著機體的正常代謝和免疫[2]。硒是谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的組成成分。硒的生理功能主要是通過GSH-Px 發(fā)揮抗氧化作用，可以將產生的氫過氧化物或過氧化氫迅速分解或還原成無害的醇類或水，防止氫過氧化物在細胞內堆積，保護細胞膜[3]。作為飼料添加劑的硒分為無機硒和有機硒2 種類型，無機硒主要有硒酸鹽和亞硒酸鹽，有機硒主要有酵母硒、硒代氨基酸、硒多糖等。

亞硒酸二葡萄糖酯俗稱有機糖硒，是一種有機硒。在催化劑作用下，將酵母多糖與亞硒酸鈉通過生物與化學的反應轉化為酵母多糖硒，再通過生物降解，即在生物酶的催化下，將酵母多糖硒水解為葡萄糖和亞硒酸二葡萄糖酯，而在此條件下Se-O 鍵不能被淀粉酶催化水解，通過膜分離，得到亞硒酸二葡萄糖酯純品。目前，未見亞硒酸二葡萄糖酯在動物生產中應用的研究報道。有研究者用蔗糖、糊精、糖醇與亞硒酸鈉等硒化試劑反應合成蔗糖亞硒酸酯、糊精亞硒酸酯和糖醇亞硒酸酯，并發(fā)現與亞硒酸鈉相比，糊精亞硒酸酯有更好的抗氧化作用和抑制腫瘤活性的作用，蔗糖亞硒酸酯更易被動物吸收，且毒性遠小于亞硒酸鈉[4-6]。

本試驗旨在探討飼糧中添加不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對產蛋后期臨武鴨產蛋性能、蛋品質和血液生化指標的影響，為亞硒酸二葡萄糖酯在蛋鴨飼料生產中科學應用提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 亞硒酸二葡萄糖酯為米黃色粉末，硒含量2 000 mg/kg，由湖南諾維信生物科技有限公司生產并提供。

1.2 試驗設計與試驗飼糧 試驗選用產蛋率接近的50 周齡健康臨武鴨240 只，將試驗鴨隨機分為5 組，每組6 個重復，每個重復8 只。對照組在基礎飼糧中添加0.2 mg/kg（以硒計）的無機硒（亞硒酸鈉）。試驗組分別在基礎飼糧中添加50、100、150、200 g/t 亞硒酸二葡萄糖酯，以硒計分別為0.1、0.2、0.3、0.4 mg/kg（各組以此硒劑量表示組別）?；A飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。預試期7 d，試驗期42 d。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗蛋鴨分上、下兩層階梯籠養(yǎng)，每籠1 只，各重復均勻分布于鴨舍。自由采食與飲水，自然光照與人工光照、自然通風和橫向負壓通風相結合。每日清理鴨糞和撿蛋各2 次，按常規(guī)進行欄舍消毒和日常管理。

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生產性能 試驗期間每天按重復記錄產蛋總數、總蛋重、采食量、軟破蛋（軟殼蛋、破殼蛋）數、次品蛋（畸形蛋、薄殼蛋、沙殼蛋）數和死淘數，試驗結束后以組為單位統(tǒng)計平均蛋重、日產蛋量、產蛋率、合格蛋率、軟破蛋率、次品蛋率、死淘率、平均日采食量和料蛋比。

1.4.2 蛋品質 在試驗期的第21 天和42 天抽取鴨蛋樣品進行蛋品質分析，分別從每重復中取2 枚蛋用于測定蛋黃比率、蛋白比率、蛋殼厚度（蛋殼厚度測定儀）、蛋殼強度（蛋殼強度測定儀）、蛋形指數（游標卡尺測量法）、蛋黃顏色（蛋品質分析儀）及哈夫單位（蛋品質分析儀）。在試驗期第42 天，從每重復中抽取1 枚蛋放置于4℃冰箱中貯藏90 d 后測定鴨蛋的哈夫單位。以組為單位進行統(tǒng)計分析。

1.4.3 血清生化指標和抗氧化指標 在試驗第42 天從每重復中選取試驗蛋鴨1 只，空腹12 h 后翅下靜脈采血5 mL，靜置1 h 后于4 000 r/min 離心10 min，分離血清，于-20℃冰箱中保存?zhèn)錅y。采用全自動生化儀測定血清中總膽固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、尿素（Urea）、尿酸（UA）和葡萄糖（GLU）的含量。采用試劑盒法測定血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶（CAT）的量和總抗氧化能力（T-AOC），試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數據采用Excel 2010 軟件進行初步處理，用SPSS19.0 統(tǒng)計軟件進行方差分析，顯著水平為P<0.05，差異顯著的做Duncan's 多重比較。試驗結果以平均值±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨生產性能的影響 由表2可見，添加亞硒酸二葡萄糖酯的各試驗組采食量、產蛋率和料蛋比等生產性能指標與對照組無顯著差異。

2.2 亞硒酸二葡萄糖酯對蛋品質的影響 由表3 可見，亞硒酸二葡萄糖酯試驗組蛋雞21 d 和42 d 所產蛋的蛋白、蛋黃、蛋殼比率、蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋黃顏色和哈夫單位均與對照組差異不顯著。將試驗結束當天所產蛋在4℃貯藏3 個月后測定哈夫單位，4 個亞硒酸二葡萄糖酯組蛋的哈夫單位分別較對照組高125.89%、105.02%、123.83%和146.44%（P<0.01）。

2.3 亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨血清生化指標的影響 如表4 所示，添加亞硒酸二葡萄糖酯與添加亞硒酸鈉的對照組相比，有降低蛋鴨血清TCH 含量的趨勢（P=0.067）；0.3、0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清ALT 含量分別較對照組高出82.80% 和94.62%（P<0.05）；0.1～0.3 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清ALP 含量與對照組差異不顯著，而0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清ALP 含量較對照組高45.08%（P<0.01）。添加亞硒酸二葡萄糖酯試驗組的其他血液生化指標與對照組差異不顯著。

2.4 亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨血清抗氧化指標的影響如表5 所示，4 個亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清GSHPx 活力有提高趨勢（P=0.07），其他抗氧化指標與對照組差異不顯著。

3 討 論

3.1 亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨生產性能和蛋品質的影響硒作為動物體必需的一種微量元素，參與機體的多種生物學功能。大多數研究結果表明，飼料中硒添加量為0.3 mg/kg 以下時，對蛋雞生產性能和蛋品質無顯著影響[7-11]。當硒添加量超過0.5 mg/kg 時，會對蛋雞生產性能和蛋品質產生顯著影響，但影響結果不盡相同。李靜等[8]研究認為，添加0.5 mg/kg 的酵母硒可以顯著降低45～50周齡海賽克斯蛋雞的采食量、提高產蛋率、降低料蛋比；而添加0.5 mg/kg 的亞硒酸鈉會使料蛋比顯著提高[9]。楊玉等[10]也得出類似結論，添加0.20～1.00 mg/kg 的酵母硒顯著提高了69 周齡海蘭褐蛋雞的產蛋率、降低了料蛋比，并且添加0.60 mg/kg 以上的酵母硒顯著提高了蛋殼強度和蛋殼厚度。

表2 不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨生產性能的影響

表3 不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨蛋品質的影響

表4 飼糧添加不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨血清生化指標的影響

表5 飼糧添加不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨血清抗氧化指標的影響

關于硒對蛋鴨影響的研究較少。王向榮等[12]在29周齡產蛋臨武鴨飼糧中分別添加0.3 mg/kg 酵母硒或亞硒酸鈉，對臨武鴨的生產性能和蛋品質無顯著影響。黃璇等[13]研究表明，在29 周齡產蛋高峰期臨武鴨蛋鴨的基礎飼糧中分別添加0.10～0.80 mg/kg 酵母硒對蛋鴨產蛋性能和蛋品質各指標均無顯著影響。本試驗結果表明，與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉的對照組相比，在蛋鴨飼糧中添加0.1～0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯對生產性能和蛋品質無顯著影響，飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯能夠提高鮮鴨蛋在貯藏3 個月后的哈夫單位，即添加亞硒酸二葡萄糖酯能夠延緩鮮鴨蛋在貯藏過程中哈夫單位的下降，延緩鮮鴨蛋品質下降。相關結果亦表明，飼糧中添加酵母硒等有機硒能夠減慢雞蛋哈夫單位的下降速度，可改善貯藏雞蛋的新鮮度，延長雞蛋的貨架期[14-15]；飼糧中添加納米硒和酵母硒還能夠極顯著延緩鵪鶉蛋在儲藏過程中哈夫單位下降[16]。

鮮蛋在貯藏過程中，濃厚蛋白逐漸減少，稀薄蛋白逐漸增加，濃厚蛋白高度隨之下降，而哈夫單位是由濃厚蛋白高度計算而得，即HU=100lg（H－1.7W0.37+7.6）（H 為蛋白高度，W 為蛋重），故哈夫單位會隨濃厚蛋白高度的下降而降低。濃厚蛋白的減少和變稀可能與卵黏蛋白的解離及卵黏蛋白溶菌酶復合物的解離有關。硒在體內以硒半胱氨酸的形式存在于近30 種蛋白質中，含硒半胱氨酸的蛋白質稱為硒蛋白。硒蛋白參與機體的各項生命活動，目前已被發(fā)現的硒蛋白有數十種，生物體的大部分硒蛋白都表現出抗氧化功能，它們在生物功能的各個領域發(fā)揮著重要作用，體內大部分硒蛋白的水平與飲食攝入的硒含量呈正相關[17]。谷胱甘肽過氧化物酶是重要的含硒抗氧化蛋白，能夠降低細胞中過氧化氫的含量，保護細胞膜[2]。含硒抗氧化蛋白的增加有利于保持細胞膜完整，減少濃厚蛋白中卵黏蛋白和卵黏蛋白溶菌酶復合物的解離，從而使蛋白高度得以保持，哈夫單位下降緩慢。本研究中，飼糧添加硒能夠延緩哈夫單位的下降，可能與含硒抗氧化蛋白降低過氧化物含量、保護細胞膜的功能有關。

3.2 亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨血清生化指標和抗氧化指標的影響 本研究發(fā)現，與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉的對照組相比，在產蛋后期蛋鴨飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯后蛋鴨血清中TCH 含量有降低趨勢。有研究表明，添加硒能夠影響小鼠體內膽固醇酯的代謝[18]，納米硒能夠顯著降低小鼠血清TCH、TG 和LDL-C 含量[19]，補充硒能夠降低血清膽固醇的機理可能和膽固醇的合成代謝有關，異戊烯焦磷酸（IPP）是膽固醇合成代謝的中間產物，也是一些硒蛋白的合成前體，機體內硒增加會競爭抑制而降低IPP 含量，進而降低膽固醇合成[20-21]。本研究表明，亞硒酸二葡萄糖酯對蛋鴨血清膽固醇的降低效果好于亞硒酸鈉。

GSH-Px 是含硒抗氧化蛋白。本研究發(fā)現，與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉的對照組相比，在產蛋后期飼糧中添加0.1～0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯后蛋鴨血清中GSH-Px 活力有升高的趨勢，其抗氧化效果好于亞硒酸鈉。在蛋鴨、蛋雞、鵪鶉和蛋鴿飼糧中添加酵母硒或納米硒同樣發(fā)現血清GSH-Px 活性顯著提高[6,9,15-16]。

本研究發(fā)現，0.1～0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清的T-AOC 和T-SOD 活性與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉的對照組差異不顯著。而一些研究者認為，在鵪鶉飼糧中添加0.2、0.4 mg/kg 酵母硒或納米硒，在蛋鴿飼糧中添加0.4、0.5 mg/kg 納米硒，能夠顯著提高鵪鶉和蛋鴿血清的T-AOC 和T-SOD 活性[15-16]；在蛋鴨飼糧中添加0.4、0.8 mg/kg 酵母硒，能夠顯著提高蛋鴨血清T-SOD活性[10]。這些研究結果說明，亞硒酸二葡萄糖酯和亞硒酸鈉對機體血清T-AOC 和T-SOD 活性影響效果接近。

本試驗結果顯示，當亞硒酸二葡萄糖酯添加量為0.3、0.4 mg/kg 時，產蛋后期蛋鴨血清中ALT 活性顯著增加，添加量為0.4 mg/kg 時ALP 活性也顯著增加，而ALT 和ALP 活性的提高均與肝臟問題相關[22-23]，這也提示當亞硒酸二葡萄糖酯添加量在0.3 mg/kg（以硒計）以上時，會增加肝臟代謝的負擔。因此，亞硒酸二葡萄糖酯在蛋雞飼糧中的推薦使用量為0.2 mg/kg（以硒計）。

4 結 論

本試驗條件下，蛋鴨飼糧中添加0.1～0.4 mg/kg（以硒計）亞硒酸二葡萄糖酯與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉對產蛋后期蛋鴨生產性能和蛋品質的影響無顯著差異，能夠延緩鮮鴨蛋在貯藏過程中哈夫單位的下降，有利于蛋保持新鮮；亞硒酸二葡萄糖酯作為硒補充劑在蛋鴨飼糧中推薦添加量為0.2 mg/kg（以硒計）。