山藥多糖對LPS誘導(dǎo)的心肌H9C2細(xì)胞炎癥因子表達(dá)和細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制

邢 若 王 鵬 李興杰

（首都醫(yī)科大學(xué)附屬世紀(jì)壇醫(yī)院藥劑科，臨床合理用藥生物特征譜學(xué)評價北京市重點實驗室，北京100038）

脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）是革蘭氏陰性菌的致病部分，其侵入機(jī)體后，可以誘導(dǎo)組織炎癥、氧化應(yīng)激，造成組織損傷，最終誘導(dǎo)疾病發(fā)生［1］。LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷是常見的心血管系統(tǒng)疾病如膿毒癥心肌損傷發(fā)生機(jī)制之一［2］。LPS刺激后的心肌細(xì)胞凋亡水平增加、炎癥因子釋放水平增加、氧化應(yīng)激水平升高［3］。山藥多糖提取自山藥，具有抗衰老、增加免疫力、抗氧化、降血糖等功效［4］。研究顯示，山藥多糖有改善心血管系統(tǒng)疾病的功效［5］。NF-κB是在人體內(nèi)發(fā)揮多種生物學(xué)作用的調(diào)控因子，其激活后能夠誘導(dǎo)炎癥、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡發(fā)生［6］。LPS刺激后的心肌細(xì)胞中NF-κB激活水平升高，并且下調(diào)NF-κB激活水平可以抑制心肌細(xì)胞損傷［7］?，F(xiàn)階段山藥多糖在LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷中的作用還不明確。本實驗以心肌H9C2細(xì)胞作為體外實驗對象，探討山藥多糖對LPS誘導(dǎo)心肌細(xì)胞炎癥因子表達(dá)、細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激的影響和機(jī)制，為山藥多糖治療心肌損傷的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料 心肌H9C2細(xì)胞購自通派（上海）生物科技有限公司；ROS檢測試劑盒、LDH檢測試劑盒、SOD檢測試劑盒、MDA檢測試劑盒購自北京普利萊基因技術(shù)有限公司；TNF-α含量檢測試劑盒、IL-6含量檢測試劑盒購自艾美捷科技有限公司；C-Caspase-3抗體、IκBα抗體購自美國Proteintech公司；p65抗體購自美國Cell Signaling Technology公司；山藥多糖（純度：UV≥90%，SC9990-20 mg）購自北京索萊寶科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 CCK-8法測定山藥多糖對心肌細(xì)胞增殖活性影響 將心肌細(xì)胞接種至96孔板中，每孔3 000個細(xì)胞。細(xì)胞貼壁以后，更換為含有山藥多糖終濃度為0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80 g/L的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)，置于CO2培養(yǎng)箱內(nèi)37℃孵育培養(yǎng)24 h后，將培養(yǎng)板取出，添加10μl的CCK-8，繼續(xù)培養(yǎng)2 h，檢測570 nm的OD值，以O(shè)D值表示細(xì)胞增殖活性。

1.2.2 細(xì)胞分組 心肌細(xì)胞分成Control、LPS、CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組，LPS、CYPS-L、CYPSM、CYPS-H組細(xì)胞分別以含有25 mg/L的LPS細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)，CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組細(xì)胞分別在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加終濃度為0.05、0.10、0.20 g/L的山藥多糖。Control組為空白對照細(xì)胞。以CCK-8法測定Control、LPS、CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組細(xì)胞培養(yǎng)24 h后細(xì)胞增殖活性變化。

1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡 收集培養(yǎng)24 h后的Control、LPS、CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組細(xì)胞，用冰預(yù)冷以后的PBS溶液洗滌2次，然后在細(xì)胞內(nèi)添加300μl的結(jié)合緩沖溶液，添加Annexin VFITC和PI染色液各5μl，避光反應(yīng)15 min，上流式細(xì)胞儀檢測凋亡變化。

1.2.4 ROS、SOD、MDA、LDH水平檢測 收集培養(yǎng)24 h后的Control、LPS、CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組細(xì)胞和培養(yǎng)液上清，分別使用ROS檢測試劑盒（熒光法）、SOD檢測試劑盒（黃嘌呤氧化法）、MDA檢測試劑盒（硫代巴比妥酸法）測定細(xì)胞中ROS、SOD、MDA水平，ROS結(jié)果以相對熒光表示，用LDH檢測試劑盒（二硝基苯肼法）測定培養(yǎng)液上清中LDH水平，步驟均同試劑盒說明書。

1.2.5 ELISA法檢測TNF-α、IL-6水平 收集培養(yǎng)24 h后的Control、LPS、CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組細(xì)胞培養(yǎng)液上清，以TNF-α含量檢測試劑盒（ELISA法）、IL-6含量檢測試劑盒（ELISA法）測定TNF-α、IL-6水平，步驟同說明書。

1.2.6 Western blot檢測C-Caspase-3、p65、IκBα蛋白表達(dá) 收集培養(yǎng)24 h后的Control、LPS、CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組細(xì)胞，用1 ml的PBS洗滌細(xì)胞2次，然后添加RIPA裂解試劑，冰上裂解30 min，將裂解液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，12 000 g、4℃離心20 min，放在-80℃保存。以BCA法測定蛋白濃度。制備SDS-PAGE凝膠，每個孔內(nèi)添加20μg蛋白樣品，蛋白樣品在添加到上樣孔之前需要與等體積的2×Loading Buffer混合煮沸5 min。100 V電壓電泳，觀察溴酚藍(lán)進(jìn)入到上層膠和下層膠之間時，調(diào)整電壓為120 V繼續(xù)電泳。設(shè)置100 V的電壓轉(zhuǎn)膜90 min。取出電轉(zhuǎn)后的PVDF膜，放在封閉液（5%牛血清白蛋白）內(nèi)孵育1.5 h，然后將PVDF膜放在一抗（CCaspase-3抗體按照1：800稀釋，p65抗體按照1∶1 000稀釋，IκBα抗體按照1∶1 000稀釋）中，在4℃結(jié)合過夜，然后放在二抗（二抗按照1∶4 000稀釋）中，在室溫孵育1.5 h。ECL發(fā)光后，分析目的條帶和內(nèi)參GAPDH的灰度值，以GAPDH作為內(nèi)參，分析目的蛋白表達(dá)變化。

1.2.7 NF-κB信號激活劑對山藥多糖影響心肌細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激以及炎癥因子表達(dá)的作用 檢測心肌細(xì)胞以含有25 mg/L的LPS、0.10 g/L的山藥多糖、1μmol/L的NF-κB信號激活劑PMA處理，記為CYPS-M+PMA組，以CYPS-M組作為參照，利用上述1.2.1～1.2.7中方法檢測細(xì)胞增殖、凋亡和ROS、SOD、MDA、LDH、TNF-α、IL-6水平及C-Caspase-3、p65、IκBα蛋白表達(dá)水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 用SPSS21.0軟件分析數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)以±s表示，兩組數(shù)據(jù)間比較用t檢驗，多組差異比較用單因素方差，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 山藥多糖對心肌細(xì)胞增殖活性影響 與0 g/L山藥多糖處理相比，0.05、0.10、0.2 g/L的山藥多糖處理后的心肌細(xì)胞增殖活性無顯著性差異，0.40、0.80 g/L的山藥多糖處理后的心肌細(xì)胞增殖活性降低（表1）。因此，選擇0.05、0.10、0.20 g/L的山藥多糖處理心肌細(xì)胞。

2.2 山藥多糖對LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡影響與Control組比較，LPS組心肌細(xì)胞增殖活性降低，凋亡率升高，細(xì)胞中C-Caspase-3蛋白表達(dá)水平也升高。與LPS組比較，CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組心肌細(xì)胞增殖活性依次升高，凋亡率依次降低，細(xì)胞中C-Caspase-3蛋白表達(dá)水平依次降低（圖1、表2）。山藥多糖抑制LPS條件下心肌細(xì)胞凋亡。

2.3 山藥多糖對LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激影響 與Control組比較，LPS組心肌細(xì)胞中ROS和MDA水平升高，SOD水平降低，培養(yǎng)液上清中LDH水平升高。與LPS組比較，CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組心肌細(xì)胞中ROS和MDA水平依次降低，SOD水平依次升高，培養(yǎng)液上清中LDH水平依次降低（表3）。山藥多糖抑制LPS條件下心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激。

表1 山藥多糖對心肌細(xì)胞增殖活性影響（±s）Tab.1 Effects of Yam polysaccharide on proliferation activity of cardiomyocytes（±s）

表1 山藥多糖對心肌細(xì)胞增殖活性影響（±s）Tab.1 Effects of Yam polysaccharide on proliferation activity of cardiomyocytes（±s）

Note：Compared with 0 g/L，1）P＜0.05.

Proliferative activity（OD570 nm）0.51±0.06 0.53±0.05 0.50±0.04 0.52±0.06 0.41±0.031）0.35±0.041）20.870＜0.001 Concentration（g/L）0 0.05 0.10 0.20 0.40 0.80 F P

2.4 山藥多糖對LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞炎癥因子表達(dá)影響 與Control組比較，LPS組心肌細(xì)胞培養(yǎng)液上清中TNF-α、IL-6水平升高。與LPS組比較，CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組心肌細(xì)胞培養(yǎng)液上清中TNF-α、IL-6水平依次降低（表4）。提示山藥多糖抑制LPS條件下心肌細(xì)胞炎癥因子表達(dá)。

圖1 山藥多糖對LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡和C-Caspase-3蛋白表達(dá)影響Fig.1 Effects of Yam polysaccharideon LPSinduced apoptosis and C-Caspase-3 protein expression in cardiomyocytes

表2 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞增殖活性、凋亡率和C-Caspase-3蛋白水平影響（±s）Tab.2 Effects of Yam polysaccharide on proliferation activity，apoptosis rate and C-Caspase-3 protein level of cardiomyocytesunder LPScondition（±s）

表2 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞增殖活性、凋亡率和C-Caspase-3蛋白水平影響（±s）Tab.2 Effects of Yam polysaccharide on proliferation activity，apoptosis rate and C-Caspase-3 protein level of cardiomyocytesunder LPScondition（±s）

Note：Compared with Control，1）P＜0.05；compared with LPS，2）P＜0.05；compared with CYPS-L，3）P＜0.05；compared with CYPSM，4）P＜0.05.

C-Caspase-3 protein（%）0.22±0.03 0.85±0.091）0.63±0.052）0.45±0.042）3）0.27±0.032）3）4）218.507＜0.001 Groups Control LPS CYPS-L CYPS-M CYPS-H F P Proliferative activity（OD570 nm）0.53±0.07 0.28±0.031）0.35±0.032）0.43±0.042）3）0.52±0.052）3）4）48.625＜0.001 Apoptosis rate（%）6.32±0.51 36.75±4.111）25.01±2.362）12.47±1.142）3）9.33±0.852）3）4）292.287＜0.001

2.5 山藥多糖對LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞中NF-κB信號通路激活水平影響 與Control組比較，LPS組心肌細(xì)胞中p65蛋白水平升高，IκBα蛋白水平降低；與LPS組比較，CYPS-L、CYPS-M、CYPS-H組心肌細(xì)胞中p65蛋白水平依次降低，IκBα蛋白水平依次升高（圖2、表5）。山藥多糖抑制LPS條件下心肌細(xì)胞中NF-κB信號通路激活。

2.6 NF-κB信號激活劑對山藥多糖影響LPS條件下心肌細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激和炎癥因子表達(dá)作用 與CYPS-M組比較，CYPS-M+PMA組心肌細(xì)胞增殖活性降低，凋亡率和C-Caspase-3蛋白表達(dá)水平升高，細(xì)胞中ROS、MDA水平升高，SOD水平降低，培養(yǎng)液上清中LDH、TNF-α、IL-6水平升高，p65蛋白表達(dá)水平升高，IκBα蛋白表達(dá)水平下降（圖3、表6）。

表3 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞ROS、SOD、MDA水平和培養(yǎng)液上清中LDH水平的影響（±s）Tab.3 Effects of Yam polysaccharide on ROS，SOD，MDA levels and LDH level in supernatant of cultured cardiomyocytes under LPScondition（±s）

表3 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞ROS、SOD、MDA水平和培養(yǎng)液上清中LDH水平的影響（±s）Tab.3 Effects of Yam polysaccharide on ROS，SOD，MDA levels and LDH level in supernatant of cultured cardiomyocytes under LPScondition（±s）

Note：Compared with Control，1）P＜0.05；compared with LPS，2）P＜0.05；compared with CYPS-L，3）P＜0.05；compared with CYPS-M，4）P＜0.05.

LDH（U/L）5.23±0.51 32.47±3.301）23.32±2.152）15.02±1.452）3）7.84±0.722）3）4）309.100＜0.001 Groups Control LPS CYPS-L CYPS-M CYPS-H F P ROS 1.00±0.09 4.69±0.511）3.26±0.122）2.04±0.202）3）1.45±0.112）3）4）300.395＜0.001 MDA（nmol/mg）9.55±0.74 31.45±2.681）21.28±2.062）16.34±1.422）3）10.20±1.012）3）4）244.621＜0.001 SOD（U/mg）86.79±8.51 39.50±4.221）48.62±3.562）62.30±4.812）3）76.08±6.572）3）4）99.466＜0.001

表4 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞培養(yǎng)液上清中TNFα、IL-6水平的影響（±s，ng/L）Tab.4 Effects of Yam polysaccharide on TNF-αand IL-6 levels in supernatant of cardiomyocyte culture medium under LPScondition（±s，ng/L）

表4 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞培養(yǎng)液上清中TNFα、IL-6水平的影響（±s，ng/L）Tab.4 Effects of Yam polysaccharide on TNF-αand IL-6 levels in supernatant of cardiomyocyte culture medium under LPScondition（±s，ng/L）

Note：Compared with Control，1）P＜0.05；compared with LPS，2）P＜0.05；compared with CYPS-L，3）P＜0.05；compared with CYPSM，4）P＜0.05.

IL-6 36.52±3.71 327.94±20.841）264.89±22.852）186.76±18.422）3）104.55±10.282）3）4）439.868＜0.001 Groups Control LPS CYPS-L CYPS-M CYPS-H F P TNF-α 22.81±2.01 217.89±16.351）163.74±12.582）104.95±10.222）3）43.78±3.262）3）4）548.128＜0.001

圖2 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞中p65、IκBα蛋白表達(dá)的影響Fig.2 Effect of Yam polysaccharide on p65 and IκBαprotein expression in cardiomyocytes under LPScondition

表5 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞p65、IκBα蛋白表達(dá)水平的影響（±s）Tab.5 Effects of yam polysaccharide on p65 and IκBα protein expression in cardiomyocytes under LPS condition（±s）

表5 山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞p65、IκBα蛋白表達(dá)水平的影響（±s）Tab.5 Effects of yam polysaccharide on p65 and IκBα protein expression in cardiomyocytes under LPS condition（±s）

Note：Compared with Control，1）P＜0.05；compared with LPS，2）P＜0.05；compared with CYPS-L，3）P＜0.05；compared with CYPSM，4）P＜0.05.

IκBα 1.03±0.11 0.23±0.041）0.43±0.062）0.68±0.072）3）1.06±0.102）3）4）185.772＜0.001 Groups Control LPS CYPS-L CYPS-M CYPS-H F P p65 0.20±0.03 0.96±0.111）0.65±0.062）0.41±0.042）3）0.21±0.022）3）4）251.202＜0.001

圖3 NF-κB激活劑和山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞中p65、IκBα、C-Caspase-3蛋白表達(dá)影響Fig.3 Effects of NF-κB activator and yam polysaccharide on p65，IκBαand C-Caspase-3 protein expression in cardiomyocytes under LPScondition

表6 NF-κB激活劑和山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞增殖活性、凋亡率和細(xì)胞中ROS、SOD、MDA水平和培養(yǎng)液上清中LDH、TNF-α、IL-6水平以及p65、IκBα、C-Caspase-3蛋白表達(dá)水平影響（±s）Tab.6 Effects of NF-κB activator and yam polysaccharide on proliferation activity，apoptosis rate，ROS，SOD，MDA levels in cardiomyocytes，LDH，TNF-α，IL-6 levels in culture medium supernatant and p65，IκBα，C-Caspase-3 protein expression levels in LPStreated cardiomyocytes（±s）

表6 NF-κB激活劑和山藥多糖對LPS條件下心肌細(xì)胞增殖活性、凋亡率和細(xì)胞中ROS、SOD、MDA水平和培養(yǎng)液上清中LDH、TNF-α、IL-6水平以及p65、IκBα、C-Caspase-3蛋白表達(dá)水平影響（±s）Tab.6 Effects of NF-κB activator and yam polysaccharide on proliferation activity，apoptosis rate，ROS，SOD，MDA levels in cardiomyocytes，LDH，TNF-α，IL-6 levels in culture medium supernatant and p65，IκBα，C-Caspase-3 protein expression levels in LPStreated cardiomyocytes（±s）

Note：Compared with CYPS-M，1）P＜0.05.

Groups Proliferative activity（OD570 nm）Apoptosisrate（%）C-Caspase-3 ROS MDA（nmol/mg）SOD（U/mg）LDH（U/L）TNF-α（ng/L）IL-6（ng/L）p65 IκBα CYPS-M CYPS-M+PMA 0.44±0.05 11.58±1.23 0.49±0.05 1.00±0.08 15.95±1.36 61.84±5.30 14.78±1.27 102.98±10.41 187.93±14.45 0.38±0.05 0.63±0.06 t P 0.30±0.041）6.559＜0.001 18.65±1.751）9.916＜0.001 0.87±0.061）14.596＜0.001 1.69±0.121）14.353＜0.001 24.01±0.201）17.590＜0.001 46.21±3.371）7.466＜0.001 25.75±2.361）12.280＜0.001 185.72±16.651）12.641＜0.001 236.20±20.591）5.575＜0.001 0.75±0.071）12.903＜0.001 0.35±0.051）10.755＜0.001

3 討論

山藥又稱為薯蕷，具有補(bǔ)腎、健脾、生津等作用，其既是一味中藥，又是一種食物［8］。山藥多糖是山藥中的主要活性成分，其由葡萄糖、甘露醇、半乳糖、阿拉伯糖、木糖等組成，具有降低血糖、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、清除氧自由基等藥理學(xué)功能［9］。有研究發(fā)現(xiàn)，山藥多糖治療后的心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞凋亡水平降低，山藥多糖降低腦缺血再灌注大鼠腦組織氧化應(yīng)激和炎癥因子釋放水平［5，10］。本實驗顯示，山藥多糖處理后的LPS條件下心肌細(xì)胞增殖活性升高，細(xì)胞凋亡率降低，提示山藥多糖抑制LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡，山藥多糖具有保護(hù)心肌細(xì)胞損傷的作用。

研究顯示，LPS誘導(dǎo)心肌細(xì)胞炎癥和氧化應(yīng)激等是其造成心肌細(xì)胞損傷的重要機(jī)制［11］。LPS刺激以后的心肌細(xì)胞中產(chǎn)生大量的ROS，ROS不能被SOD等抗氧化酶及時降解，導(dǎo)致ROS聚集在心肌細(xì)胞內(nèi)，ROS不僅能夠激活Caspase凋亡反應(yīng)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)生，還可以將細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)過氧化，造成氧化損傷［12-13］。MDA是脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，也是氧化損傷的標(biāo)志［14］。脂質(zhì)是細(xì)胞膜的主要成分之一，其過氧化后造成細(xì)胞膜損傷，促使細(xì)胞內(nèi)的LDH進(jìn)入細(xì)胞外，因此，檢測培養(yǎng)液上清中LDH水平可以間接反映細(xì)胞損傷程度［15］。Caspase-3位于Caspase級聯(lián)反應(yīng)的下游，其活化后被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡的標(biāo)志［16］。LPS刺激誘導(dǎo)心肌細(xì)胞產(chǎn)生大量的TNF-α、IL-6等炎癥因子，這些炎癥因子也能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)生，加重細(xì)胞損傷［17-19］。另外，過量的炎癥反應(yīng)也可以促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)ROS積累［20］。本次實驗結(jié)果顯示，山藥多糖處理后的LSP條件下心肌細(xì)胞中ROS、MDA水平降低，SOD水平升高，培養(yǎng)液上清中LDH、TNF-α、IL-6水平降低，C-Caspase-3蛋白表達(dá)水平下降，提示山藥多糖減少心肌細(xì)胞釋放炎癥因子，減少氧化損傷。

本課題組還進(jìn)一步探討了山藥多糖的作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)山藥多糖能夠降低LPS條件下心肌細(xì)胞中p65表達(dá)水平，提高IκBα表達(dá)水平。p65是NF-κB信號的關(guān)鍵亞單位，其表達(dá)水平高低與NF-κB信號激活水平正相關(guān)，NF-κB激活水平與氧化應(yīng)激、炎癥等有關(guān)［21］。IκBα是NF-κB信號的重要組成部分，其表達(dá)升高后NF-κB激活水平下調(diào)［22］。研究顯示，LPS刺激以后的心肌細(xì)胞中NF-κB信號激活水平升高，并且抑制NF-κB信號可以降低LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷［7，23］。本實驗以NF-κB信號激活劑處理心肌細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NF-κB信號激活劑可以逆轉(zhuǎn)山藥多糖對LPS誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞增殖、凋亡、炎癥因子釋放以及氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的影響，說明山藥多糖作用機(jī)制與NF-κB信號有關(guān)。

綜上，山藥多糖有改善LPS誘導(dǎo)心肌損傷的作用，其可以抑制細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激和炎癥因子表達(dá)，機(jī)制與抑制NF-κB信號密切相關(guān)。本課題組會繼續(xù)深入探討山藥多糖通過何種靶向機(jī)制影響NFκB信號進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激和炎癥因子表達(dá)。本實驗結(jié)果為山藥多糖治療心肌損傷的應(yīng)用提供了理論資料，為研究山藥多糖在心血管系統(tǒng)疾病中的作用和機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。