劉元哲

摘要：針對“規(guī)范化精準靶向性臍帶血 NK 細胞制備關(guān)鍵技術(shù)產(chǎn)業(yè)化”的省級重點合作研發(fā)項目中經(jīng)濟效益的多少存在不確定性，以及合作單位財務(wù)數(shù)據(jù)存在失真或造假的可能性，因此，應(yīng)在項目開始及開展過程中制定各項嚴格的管控要求，規(guī)范管理、支出、核算，共同按照預(yù)算目標完成項目計劃書內(nèi)容，進一步完善合作雙方企業(yè)的各項管控。財務(wù)管控作為各項管控的主要措施之一，在提高會計信息質(zhì)量，保護資產(chǎn)的安全與完整，確保有關(guān)法律法規(guī)和規(guī)章制度的貫徹執(zhí)行，確保項目未來經(jīng)濟價值實現(xiàn)等方面起到了重要而不可或缺的作用。

關(guān)鍵詞：管控;規(guī)范化;精準靶向;NK細胞;合作研發(fā)項目;臨床應(yīng)用;主辦公司;聯(lián)合申報公司

隨著免疫學理論和相關(guān)生物技術(shù)的發(fā)展，過繼回輸免疫細胞已經(jīng)成功應(yīng)用于治療腫瘤和自身免疫病等多種嚴重危害人類健康的相關(guān)疾病。NK細胞是一類固有免疫細胞，其既能殺傷靶細胞又可以發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。NK細胞具有無MHC限制性、無需預(yù)先致敏、免疫排斥反應(yīng)低、可以異體回輸?shù)葍?yōu)點，使其在臨床應(yīng)用中具有獨到的優(yōu)勢。本項目擬針對目前NK細胞臨床應(yīng)用中面臨的兩個主要難題，利用項目組已有的基礎(chǔ)開展相關(guān)研究，建立規(guī)范化的臨床應(yīng)用NK細胞產(chǎn)業(yè)化制備體系，同時利用化學生物學相關(guān)技術(shù)方法，建立高效的精準靶向性NK細胞制備體系，從而整體推動NK細胞臨床應(yīng)用的產(chǎn)業(yè)化。

一、本項目研究內(nèi)容

1. 規(guī)范化的臨床應(yīng)用NK細胞的產(chǎn)業(yè)化制備

目前臨床治療所用NK細胞來源主要為通過對外周血或者臍帶血單個核細胞進行體外誘導，或直接分離NK細胞進行體外培養(yǎng)。盡管目前NK細胞體外擴增取得了較大進展，但滿足臨床治療要求的擴增方案仍需要進一步優(yōu)化。本項目將基于現(xiàn)有的工作基礎(chǔ)，建立以基因修飾的滋養(yǎng)細胞為基礎(chǔ)的臍帶血NK細胞（cord blood NK cells： CB-NK）體外誘導擴增方法，并利用體內(nèi)外實驗對新的擴增方法進行全面評估，以期在大規(guī)模提高NK細胞體外擴增效率和降低生產(chǎn)成本的基礎(chǔ)上，建立規(guī)范化的臨床應(yīng)用NK細胞產(chǎn)業(yè)化制備體系。

2. 精準靶向性NK細胞制備技術(shù)體系的建立

盡管目前過繼回輸NK細胞在諸多嚴重疾病的臨床治療中展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景，但因其不能識別特定靶細胞和抗原，因此難以實現(xiàn)對疾病的精準治療。將嵌合抗原受體展示至免疫細胞表面，可以實現(xiàn)免疫細胞結(jié)合腫瘤細胞特異抗原進而對其特異性殺傷。但目前制備嵌合抗原受體展示的免疫細胞需要收集患者自體細胞、體外擴增和基因?qū)?，直接導致生產(chǎn)周期長、費用昂貴， 以及質(zhì)量穩(wěn)定性和一致性較差。本項目擬結(jié)合SortaseA蛋白酶修飾和點擊化學方法，構(gòu)建通用型NK種子細胞，在此基礎(chǔ)上建立特異性抗體修飾的精準靶向性NK細胞制備體系，利用體內(nèi)外實驗進行全面評估和質(zhì)控，以期在降低精準靶向性免疫細胞制備周期及費用的基礎(chǔ)上，建立質(zhì)量穩(wěn)定可控的精準靶向性NK細胞制備體系。

二、項目主要創(chuàng)新點

第一，本項目擬建立規(guī)范化的臨床應(yīng)用NK細胞的產(chǎn)業(yè)化制備體系，具有來源可靠、擴增技術(shù)簡捷高效、全部環(huán)節(jié)質(zhì)控規(guī)范等特點。該體系的建立能夠使臨床用NK細胞的制備體系更為規(guī)范，能顯著加速其應(yīng)用的產(chǎn)業(yè)化進程，對其他臨床用細胞治療也具有很強的示范作用。

第二，本項目擬建立SortaseA 蛋白酶-點擊化學介導的精準靶向性NK細胞制備體系，一方面，能夠解決常規(guī)NK細胞回輸靶向性差的缺陷，另一方面，由于細胞來源穩(wěn)定且不需基因?qū)氲入y度較大操作，因此可以在很大程度上克服目前細胞治療中免疫細胞的多種缺陷，具有效應(yīng)細胞制備時間縮短、成本大幅降低和質(zhì)量穩(wěn)定性和一致性強等諸多優(yōu)勢。

三、項目實施所處階段

在“規(guī)范化的臨床應(yīng)用NK細胞的產(chǎn)業(yè)化制備”研究中，本項目組已經(jīng)通過因子活化和工程化改造飼養(yǎng)細胞技術(shù)，初步完成了臍帶血NK細胞的體外活化、擴增、鑒定和臨床前研究。在“精準靶向性NK細胞制備技術(shù)體系的建立”研究中，項目合作單位已經(jīng)完成了重組金葡菌SortaseA蛋白酶以及其多種活性優(yōu)化突變體蛋白的表達和純化，成功利用SortaseA蛋白酶介導多肽展示至細胞表面，實現(xiàn)了NK細胞系NK-92細胞的表面修飾。

四、主要研發(fā)內(nèi)容與目標

在“規(guī)范化的臨床應(yīng)用NK細胞的產(chǎn)業(yè)化制備”研究內(nèi)容中，將從臍帶血復蘇、體外誘導擴增、細胞純度和表征分析、體外安全性和活性評價以及臨床應(yīng)用等多個環(huán)節(jié)建立標準的操作流程和質(zhì)控體系，最終建立規(guī)范化的臨床應(yīng)用NK細胞制備體系，開展相應(yīng)的臨床應(yīng)用。

在“精準靶向性NK細胞制備技術(shù)體系的建立”研究內(nèi)容中，將利用SortaseA蛋白酶和點擊化學相結(jié)合的技術(shù)方法，完成相應(yīng)的NK種子細胞構(gòu)建，進一步將靶向不同腫瘤抗原的2～3種特異性抗體偶聯(lián)至NK細胞表面， 利用體內(nèi)外實驗完成相應(yīng)的安全性和活性評價，最終建立精準靶向性NK細胞制備的技術(shù)體系。

五、項目意義

對標國際先進水平，分析該領(lǐng)域發(fā)展現(xiàn)狀，闡述制約發(fā)展的關(guān)鍵技術(shù)問題。分析項目目前所屬水平，預(yù)計通過項目實施可解決的關(guān)鍵科學問題、關(guān)鍵技術(shù)，能力水平提升情況。

六、項目投資估算

本項目投資估算為6000萬元，其中擬申請省專項經(jīng)費2000萬元，企業(yè)匹配經(jīng)費4000萬元。本項目經(jīng)費?？顚Ｓ?，主要用于研發(fā)人員的工資、研發(fā)設(shè)備購置、研發(fā)知識產(chǎn)權(quán)及文庫、差旅費和產(chǎn)品試驗試劑耗材等。

針對本項目特點，特擬定聯(lián)合申請省撥資金管理辦法，以對聯(lián)合申報單位作出規(guī)范管理，以便順利完成項目申報及后續(xù)實施工作。

2019年7月份項目主辦公司與合作公司組成聯(lián)合體，申報“規(guī)范化精準靶向性臍帶血NK細胞制備關(guān)鍵技術(shù)產(chǎn)業(yè)化”項目，根據(jù)雙方簽訂的《聯(lián)合申請協(xié)議》，對任務(wù)分工及省撥專項經(jīng)費分配如下：主辦公司任務(wù)為規(guī)范化臍血NK的制備關(guān)鍵技術(shù)產(chǎn)業(yè)化，省撥資金1400萬元，占70%，聯(lián)合申報公司任務(wù)為精準靶向性NK細胞制備及質(zhì)量標準研究，省撥資金600萬元，占30%。

按項目申報書的預(yù)算方案，雙方對省撥資金使用范圍及金額約定如下：“設(shè)備費”590萬元，占30%;“材料費”905萬元，占45%;“測試化驗加工費”135萬元，占7%;“燃料動力費”30萬元，占2%;“差旅費/會議費/國際合作與交流費”52萬元，占3%;“出版/文獻/信息傳播/知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)費”13萬元，占1%;“勞務(wù)費”100萬元，占5%;“專家咨詢費”2萬元，占0.1%;“間接費費”173萬元，占9%（以實際金額按分配比例乘實際審批撥付金額確定）。

七、項目實施機制

針對上述預(yù)算方案雙方共同制定了嚴格的實施機制，內(nèi)容如下：

1. 項目的組織管理措施及制度體系建設(shè)

本項目設(shè)立牽頭單位為主辦公司，參加單位為聯(lián)合申報公司?；趦蓚€單位在NK細胞研究中的各自優(yōu)勢，開展規(guī)范化精準靶向性臍帶血NK細胞制備關(guān)鍵技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的相關(guān)研究，主要內(nèi)容包括規(guī)范化的 NK 細胞產(chǎn)業(yè)化制備體系的建立（由主辦公司完成）和精準靶向性NK細胞制備技術(shù)體系的建立（由聯(lián)合申報公司完成）。在項目實施過程中，牽頭單位將定期組織項目進展推進會，評估項目的進展情況，共同解決項目進展中可能會出現(xiàn)的相關(guān)問題。同時項目的經(jīng)費將按照國家和省專項經(jīng)費的使用規(guī)定，合規(guī)支出。

講嚴格按照項目任務(wù)書開展相關(guān)的研發(fā)工作，加強項目科學化、規(guī)范化管理，建立、健全各項管理制度體系，建立高效、科學、合理的組織管理體系，保證項目的順利完后。組織實施機制如圖1所示。

建立項目主辦公司和聯(lián)合申報公司共同參與管理決策委員會，負責協(xié)調(diào)項目總體工作，處理項目執(zhí)行過程中所出現(xiàn)的問題，構(gòu)建責任明確、運行高效的管理協(xié)調(diào)組織體系。推動各個單位在項目過程中各行其責，共同開展研究工作。并設(shè)立專家組、研發(fā)組、管理組。其具體職責如下：

（1）專家組：邀請行業(yè)領(lǐng)域著名的技術(shù)專家組成專家組，為項目的重大技術(shù)問題以及研究方案的制定提供咨詢建議，并且對項目進展、階段成果組織評審。

（2）研發(fā)組：由課題負責人牽頭各課題參與單位組成課題技術(shù)研發(fā)小組、關(guān)鍵技術(shù)攻克小組。課題技術(shù)研發(fā)小組負責組織課題參與人員開展課題相關(guān)的研發(fā)工作，關(guān)鍵技術(shù)攻克小組負責對項目（課題）中出現(xiàn)的重大的科學問題和關(guān)鍵技術(shù)難題進行攻關(guān)。

2. 產(chǎn)學研結(jié)合模式

本項目的研究內(nèi)容是基于項目組已有的軟硬件基礎(chǔ)，結(jié)合不同單位的優(yōu)勢開展。其中“規(guī)范化的NK細胞產(chǎn)業(yè)化制備體系的建立”將實現(xiàn)NK細胞體外擴增直至臨床應(yīng)用;“精準靶向性NK細胞制備技術(shù)體系的建立”將探討利用化學生物學的技術(shù)手段完成精準靶向性NK細胞制備。在項目進展的實施過程中，牽頭單位和合作單位將根據(jù)研究內(nèi)容的進展情況，合作探討精準靶向性NK細胞臨床應(yīng)用的可行性。項目組另外聘任國內(nèi)知名高校資深免疫學和細胞學專家擔任專家組成員，參加年度項目組科研進展討論會，為項目的順利實施保駕護航。

3. 知識產(chǎn)權(quán)與成果管理及權(quán)益分配

按照國家科技成果相關(guān)管理規(guī)定，嚴格執(zhí)行《科技成果登記版本》，實行國家科技計劃重大成果報告制度，對于課題實施過程中所取得的重大成果，將及時向科技部的相關(guān)機構(gòu)報告，并且根據(jù)科技特點，按照國家相關(guān)法律法規(guī)和相關(guān)保密規(guī)范的要求通過申請專利、進行著作權(quán)登記等適當方式給予知識產(chǎn)權(quán)保護。

八、資金管控要求

針對預(yù)算撥付資金聯(lián)合申報雙方進行了項目實施約定，主辦公司作為此次項目主申請人，承擔著項目驗收時主要驗收責任，為保證項目合作順利，主辦公司與聯(lián)合申報公司特做以下約定：

省撥資金的使用需嚴格按照國家法律、法規(guī)、《山東省重點研發(fā)計劃資金管理辦法》的規(guī)定及項目申報書預(yù)算方案的約定支付，必須單獨核算、專款專用，不能挪作他用。

聯(lián)合申報公司的省撥資金本著先用后補的原則，實際支付后將合法票據(jù)及相關(guān)支撐證明資料拍照或掃描后發(fā)主辦公司，經(jīng)審核無誤后主辦公司補齊聯(lián)合申報公司所支付款項。具體資料要求如下：

設(shè)備費：采購合同、購置發(fā)票、資產(chǎn)驗收單及貨物運輸證明資料等。

材料費：采購合同、采購發(fā)票、原材料驗收單及領(lǐng)用簽批單等。

測試化驗加工費：相關(guān)合同協(xié)議、發(fā)票（需體現(xiàn)出具體檢測項目，不能籠統(tǒng)的開“技術(shù)服務(wù)費”）、樣本移送出庫及接收簽批單、測試化驗加工的結(jié)果報告書等。

差旅費/會議費/國際合作與交流費：合規(guī)票據(jù)、會議邀請、會議合同及紀要、差旅行程單等。

出版/文獻/信息傳播/知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)費：需出版費、資料費、文獻檢索費、專利申請及其他知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)的發(fā)票，受理函及協(xié)議、出版物樣本復印件。

勞務(wù)費：為參與項目的研究人員的勞務(wù)支出，需有勞務(wù)協(xié)議、勞務(wù)費開支標準、簽字審批及蓋章的各期間工時分配表、勞務(wù)支付銀行回單或勞務(wù)費簽收單等。

專家咨詢費：為臨時聘請的相關(guān)專家的費用，需有與特定專家簽署的具體服務(wù)合同或協(xié)議、咨詢服務(wù)發(fā)票、支付銀行回單或費用簽收單等。

間接費用：為項目研究提供的房屋占用，日常水、電、氣、暖消耗，有關(guān)管理費用的補助支出，以及激勵科研人員的績效支出等，需有各種折舊及水電氣暖分配表、水電暖發(fā)票，及績效發(fā)放銀行回單等

省撥資金的所有支付單據(jù)及相關(guān)支撐證明資料需逐頁拍照，且內(nèi)容清晰不能模糊。

設(shè)備及原材料支付中所采購相關(guān)設(shè)備及原材料必須為項目申報書預(yù)算方案中所列示的設(shè)備及原材料，如發(fā)生不一致情況需提供書面的變更原因詳細說明及明細資料，齊魯干細胞據(jù)此申請變更項目預(yù)算。

項目驗收時，如財務(wù)驗收中介機構(gòu)要求提供相關(guān)單據(jù)的原始資料或補充提供其他相關(guān)資料，斯普邁公司需積極配合，不得以任何理由推諉。

其他未盡事宜本著合作共盈原則協(xié)商解決。

針對“規(guī)范化精準靶向性臍帶血 NK 細胞制備關(guān)鍵技術(shù)產(chǎn)業(yè)化”項目聯(lián)合申報的特點，由主辦單位相關(guān)部門牽頭，提出上述管控要求，定會對項目設(shè)立、項目實施、項目驗收具有指導性意義，順利承接省級重大專項，實現(xiàn)項目轉(zhuǎn)化，取得科研與經(jīng)濟效益的雙豐收，為科研向產(chǎn)業(yè)化轉(zhuǎn)化提供堅實有力的管控保障。

參考文獻：

[1]山東省財政廳.山東省科學技術(shù)廳關(guān)于印發(fā)山東省重點研發(fā)計劃資金管理辦法的通知[J].山東省人民政府公報，2019（03）：83-89.

[2]山東省齊魯干細胞工程有限公司.山東省重點研發(fā)計劃（重大科技創(chuàng)新工程）項目申報書[Z].濟南：山東省齊魯干細胞工程有限公司，2019.

（作者單位：山東省齊魯干細胞工程有限公司）