尿酸和血清蛋白電泳比例成分在濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)診斷中的應(yīng)用

王 健，吳嘉怡，趙 威

（廣州醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科1，腎病科2，廣東 廣州 510130）

痛風(fēng)（gout）是嘌呤代謝紊亂和（或）尿酸（uric acid，UA）排泄障礙致使血尿酸增高而引發(fā)的一組異質(zhì)性晶體相關(guān)性關(guān)節(jié)病。血液中尿酸長(zhǎng)期維持在超飽和濃度以上時(shí)，尿酸鹽與Alb 及α1球蛋白、α2球蛋白的結(jié)合減少，過(guò)飽和的尿酸鹽析出形成痛風(fēng)石，沉積到身體各個(gè)部位尤其是四肢關(guān)節(jié)中，引發(fā)急性炎性反應(yīng)，嚴(yán)重者影響肢體外形，甚至關(guān)節(jié)畸形、功能障礙。痛風(fēng)在梁代陶弘景《名醫(yī)別錄》中描述為“歷節(jié)”“白虎”，在中醫(yī)學(xué)屬“痹證”范疇，主要證型為濕熱蘊(yùn)結(jié)型[1]。目前，超聲、CT、X 線(xiàn)、顯微鏡等檢查已應(yīng)用于痛風(fēng)患者的檢查診斷，但由于技術(shù)限制，臨床仍然以檢測(cè)血尿酸，結(jié)合患者臨床表現(xiàn)來(lái)診斷痛風(fēng)。然而，高尿酸血癥（hyperuricemia，HUA）患者因無(wú)癥狀表現(xiàn)，況且僅一小部分發(fā)展為臨床痛風(fēng)，容易被忽視。盡管痛風(fēng)有治愈的可能，但其治療仍不理想[2]。尋找簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法，實(shí)現(xiàn)痛風(fēng)的早診斷早干預(yù)是目前的一個(gè)研究熱點(diǎn)。通過(guò)血清蛋白電泳（serum protein electrophoresis，SPE）可以把血清蛋白（serum protein，SP）分為Alb、α1球蛋白、α2球蛋白、β 球蛋白及γ 球蛋白，從而測(cè)定各種血清蛋白成分占總蛋白的百分比。這些血清蛋白成分在炎癥、腫瘤、肝硬化等疾病的中呈現(xiàn)出不同的變化。本研究旨在探討上述血清蛋白成分在濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)的變化，以期為濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)的輔助診斷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年1 月～2020 年5 月在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院就診的濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)患者60 例作為觀察組，另外選取同期來(lái)院辨證為濕熱體質(zhì)型高尿酸血癥無(wú)痛風(fēng)癥狀患者40 例作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①《中國(guó)高尿酸血癥與痛風(fēng)診療指南(2019)》[3]的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡≥18 歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠或哺乳期婦女；②合并心、腦血管、肝、腎、血液病、腫瘤及精神?。虎廴朐呵? 個(gè)月未使用某些藥物如噻嗪類(lèi)利尿藥、呋塞米、水楊酸鹽、吡嗪酰胺等影響血尿酸代謝藥物。觀察組中男49 例，女11 例，年齡20～77 歲，平均年齡（46.02±16.01）歲，病程0.3～10年，平均病程（8.03±2.12）年。對(duì)照組中男32 例，女8例，年齡22～87 歲，平均年齡（41.45±15.01）歲，病程0.5～9 年，平均病程（7.89±1.97）年。兩組性別、年齡及病程比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 痛風(fēng)中醫(yī)分型依據(jù)《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[4]癥候分類(lèi)的濕熱蘊(yùn)結(jié)：下肢小關(guān)節(jié)卒然紅腫熱痛、拒按，觸之局部灼熱，得涼則舒。伴發(fā)熱口渴，心煩不安，溲黃。舌紅，苔黃膩，脈滑數(shù)。高尿酸血癥中醫(yī)分型依據(jù)《中醫(yī)學(xué)》[5]制定的中醫(yī)證型診斷標(biāo)準(zhǔn)，濕熱體質(zhì)：食少、嘔惡，身重困倦，口干粘膩，心胸?zé)?、脘腹痞滿(mǎn)，小便短赤，大便黏膩不爽，外陰濕癢，舌紅，苔黃膩。

1.3 方法 兩組研究對(duì)象前空腹12 h 后采集靜脈采血3 ml 于清潔促凝試管中，3000 r/min 離心10 min后吸取1 ml，血清UA 采用尿酸酶法在西門(mén)子ADVIA 2400 全自動(dòng)分析儀上進(jìn)行檢測(cè)，血清蛋白檢測(cè)采用瓊脂糖凝膠電泳法在法國(guó)Sebia 全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀上進(jìn)行檢測(cè)，均采用其配套試劑。比較兩組血清UA 水平及SP 電泳成分Alb、α1球蛋白、α2球蛋白、β 球蛋白、γ 球蛋白比例，分析其對(duì)濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)的診斷價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0 軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（）表示，比較均值采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，比較用χ2檢驗(yàn)。繪制受試者工作特征（ROC）曲線(xiàn)評(píng)估診斷價(jià)值，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血UA、SP 成分比較 觀察組UA 水平、α2球蛋白、β 球蛋白比例高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組Alb、α1球蛋白、γ 球蛋白比例比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組血UA、SP 成分比較（）

表1 兩組血UA、SP 成分比較（）

2.2 α2球蛋白、β 球蛋白的診斷價(jià)值 ROC 曲線(xiàn)顯示，α2球蛋白、β 球蛋白診斷痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證的AUC 高于0.70，說(shuō)明α2球蛋白≥13.09%、β 球蛋白≥11.05%在診斷痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證有一定的價(jià)值，見(jiàn)表2。

表2 UA、α2 與β 球蛋白在痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證的診斷價(jià)值

2.3 痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證診斷指標(biāo)α2球蛋白、β 球蛋白的Logistic 回歸分析 把觀察組設(shè)置為1，把對(duì)照組設(shè)置為0 作為因變量，把α2球蛋白≥13.09%設(shè)置為1、反之設(shè)置為0，β 球蛋白≥11.05%設(shè)置為1、反之設(shè)置為0 作為協(xié)變量，進(jìn)行向前逐步法Logistic 回歸分析，結(jié)果顯示，α2球蛋白、β 球蛋白升高是濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因素，見(jiàn)表3。

表3 α2、β 球蛋白的Logistic 回歸分析

3 討論

痛風(fēng)屬代謝性或者免疫性風(fēng)濕病范疇。我國(guó)痛風(fēng)患病率為1%～3%，患者可出現(xiàn)關(guān)節(jié)破壞、腎功能損害，常伴發(fā)糖脂代謝紊亂、高血壓、動(dòng)脈硬化及冠心病等[6]。痛風(fēng)常伴有高尿酸血癥，然而多數(shù)高尿酸血癥患者卻并沒(méi)有痛風(fēng)的癥狀，單純檢驗(yàn)?zāi)蛩彷o助痛風(fēng)的診斷已不能適應(yīng)臨床。研究發(fā)現(xiàn)，高頻超聲[7]、雙能CT 成像技術(shù)[8]可以輔助診斷痛風(fēng)，部分尿酸正常的痛風(fēng)患者亦可檢出，但是有的尿酸鹽結(jié)晶細(xì)小或隱匿在關(guān)節(jié)腔內(nèi)不易發(fā)現(xiàn)。此外，痛風(fēng)石的確診需要關(guān)節(jié)抽吸滑液的偏光顯微鏡檢查，限制了鏡檢在診斷痛風(fēng)的應(yīng)用[9]。中醫(yī)認(rèn)為痛風(fēng)系飲食勞倦、外感風(fēng)寒濕熱之邪，濕濁痰瘀相阻、氣血不暢所致[10]。痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證臨床表現(xiàn)為下肢小關(guān)節(jié)卒然紅腫熱痛、拒按，觸之局部灼熱，得涼則舒。伴發(fā)熱口渴，心煩不安，溲黃。舌紅，苔黃膩，脈滑數(shù)。痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證的癥候分型與炎癥與免疫相關(guān)[11]，血清蛋白各成分比例在炎癥、免疫反應(yīng)中會(huì)發(fā)生改變[12]，因此反映炎癥免疫的血清蛋白成分指標(biāo)在痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證中的變化值得探討。

通過(guò)研究血清蛋白質(zhì)總量以及各種蛋白質(zhì)之間的關(guān)系可對(duì)疾病的發(fā)生進(jìn)行判斷[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證患者UA、α2、β 球蛋白比例高于對(duì)照組。痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證患者中，UA 是誘導(dǎo)的炎癥發(fā)生的致病因素。α2蛋白帶主要由銅藍(lán)蛋白、α2巨球蛋白、結(jié)合珠蛋白和急性相反應(yīng)物構(gòu)成。α2球蛋白比例升高的原因?yàn)榛颊吖逃忻庖弑患せ?，釋放白?xì)胞介素（IL）-1β，IL-6 及腫瘤壞死因子（TNF）-α 等多種，炎癥介質(zhì)進(jìn)而引起關(guān)節(jié)紅腫熱痛等急性發(fā)作表現(xiàn)[14]。β 球蛋白主要由轉(zhuǎn)鐵蛋白組成，含有β-脂蛋白，與LDL-C、ApoB 等脂類(lèi)高度相關(guān),同時(shí)含有一部分凝血因子、IgA、IgM 以及補(bǔ)體蛋白，C 反應(yīng)蛋白（CRP）位于β 和γ 成分之間。β 球蛋白比例升高的原因是患者嗜食膏粱厚味，過(guò)量油脂（尤其飽和脂肪酸類(lèi)油脂）的攝入，可造成LDL-C、ApoB 等脂類(lèi)蓄積，出現(xiàn)代謝綜合征[15]。

本研究結(jié)果顯示，UA 因曲線(xiàn)下面積小于0.7，用于痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證的診斷價(jià)值不大。EULAR 痛風(fēng)診斷循證專(zhuān)家建議[16]，通過(guò)采用德?tīng)柗乒沧R(shí)的研究方法，突出了關(guān)節(jié)影像學(xué)檢查的必要性及重要性，包括X 線(xiàn)、超聲和雙源CT，強(qiáng)調(diào)了影像學(xué)的發(fā)展在診斷痛風(fēng)中的應(yīng)用，但檢查的靈敏度和特異度與檢查者技術(shù)密切相關(guān)。有研究認(rèn)為[17-19]，尿酸鈉結(jié)晶活化炎性細(xì)胞，使IL-1β、IL-6 和TNF-α 等促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生增加，脂代謝物質(zhì)增加核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NFκB）、NOD 樣受體蛋白3（NALP3）基因表達(dá)，進(jìn)一步使炎性反應(yīng)級(jí)聯(lián)放大。α2球蛋白區(qū)間內(nèi)的結(jié)合珠蛋白反應(yīng)性升高，參與抗炎癥及組織損傷修復(fù)功能。β球蛋白區(qū)間內(nèi)的補(bǔ)體、IgM、IgA 升高，作為機(jī)體抗感染免疫的重要參與因子，參與炎癥免疫反應(yīng)。本次研究結(jié)果顯示，α2球蛋白、β 球蛋白對(duì)濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)的診斷價(jià)值較高，曲線(xiàn)下面積分別為0.709、0.726，α2球蛋白≥13.09%、β 球蛋白≥11.05%是濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因素。提示當(dāng)呈現(xiàn)α2、β 球蛋白區(qū)帶波峰雙高峰時(shí)，即急性相反應(yīng)物所在的α2球蛋白與炎性因子所在的β 球蛋白升高，痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證發(fā)生的可能性增大。

本研究是對(duì)單個(gè)機(jī)構(gòu)的病例進(jìn)行分析，納入的觀察對(duì)象標(biāo)本數(shù)相對(duì)有限，以后應(yīng)該擴(kuò)大樣本量進(jìn)行分析，可排除可能混雜因素的影響。另外納入痛風(fēng)的中醫(yī)證候分型相對(duì)較少，一定程度上限制了血清蛋白成分在臨床痛風(fēng)診斷中的適用范圍，往后進(jìn)一步納入痛風(fēng)的其他癥候分型，以證實(shí)該結(jié)論。

綜上所述，α2、β 球蛋白比例對(duì)于痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證的輔助診斷有一定的價(jià)值，具有簡(jiǎn)便、廉價(jià)、廣譜等優(yōu)點(diǎn)，當(dāng)出現(xiàn)α2、β 球蛋白雙高峰時(shí)，應(yīng)留意痛風(fēng)濕熱蘊(yùn)結(jié)證的發(fā)生。