周 雄 ，楊 明，李 翔*，張 婧*，劉 駿

1.江西中醫(yī)藥大學 現(xiàn)代中藥制劑教育部重點實驗室，江西 南昌 330004

2.江西中醫(yī)藥大學 中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心，江西 南昌 330004

腫瘤微環(huán)境與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展密切相關，其相關的發(fā)病率和死亡率構成了世界范圍內非常重要的健康問題。腫瘤微環(huán)境是腫瘤發(fā)展中的積極參與者，表現(xiàn)出癌癥的多種標志性特性，促進血管生成和增殖、抑制腫瘤細胞凋亡、紊亂生長抑制因子以及其他功能失調[1-4]。

腫瘤微環(huán)境中涉及多種細胞類型，如腫瘤相關成纖維細胞（tumor-associated fibroblast，TAFs）、血管內皮細胞（vascular endothelial cell，VEC）、腫瘤相關巨噬細胞（tumor-associated macrophages，TAMs）、樹突狀細胞（dendritic cells，DCs）、髓源性抑制細胞（myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）以及免疫和炎癥細胞，均對腫瘤的發(fā)生、浸潤和轉移有著重要影響[5]。天然來源的中藥單體成分通過調節(jié)腫瘤微環(huán)境中不同的細胞及因子轉化來抑制腫瘤細胞的活性[6]。引入天然來源中藥活性成分，是一種新的可靠的治療方法，可利用它們的選擇性分子靶標來治療不同類型的腫瘤。

1 對TAFs的調節(jié)

在腫瘤微環(huán)境中，成纖維細胞含量最多[7]。正常情況下，成纖維細胞處于未激活狀態(tài)，受損時可被激活并分化為肌成纖維細胞[8]。與響應傷口而激活的肌成纖維細胞不同，TAFs是不可逆且組成性激活，其位于生長中的腫瘤擴張邊界附近，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關，且不受程序性細胞死亡的影響而持續(xù)保持活性，與多種癌癥類型的不良預后有關[9-10]。

1.1 上調脂肪組織中的mRNA和蛋白質水平

脂肪組織和脂肪細胞在腫瘤微環(huán)境中具有重要作用，人脂肪組織的干細胞是TAFs的來源。鹽酸小檗堿的降血糖和調血脂作用能表明脂肪組織或脂肪細胞與腫瘤發(fā)生之間的關系，即鹽酸小檗堿可以上調脂肪組織中的mRNA和蛋白質水平，包括過氧化物酶體增殖物激活受體（peroxisome proliferatorsactivated receptors，PPARs）、細胞周期蛋白依賴性激酶9（cyclin-dependent kinase，CDK9）和細胞周期蛋白T1（Cyclin T1）[6]。還可防止附睪脂肪組織的消耗，并改善結腸癌colon 26/20細胞移植小鼠和colon 26/20細胞的癌性惡病質，并體現(xiàn)了對腫瘤微環(huán)境中脂肪組織的有益作用[11-14]。

1.2 降低TAFs的生物標志物

TAFs的亞型-肌成纖維細胞在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中尤為重要，它釋放的基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）促進纖維間質形成，這是晚期腫瘤的特征之一。轉化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）能促進肌成纖維細胞表型變化、細胞外基質翻轉以及生長因子的產生，含TGF-β的癌細胞衍生的細胞外小泡通過上調成纖維細胞中α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表達將成纖維細胞轉化為肌成纖維細胞[15-16]。攜帶TGF-β的人卵巢癌EVs細胞能增加成纖維細胞α-SMA的表達，同時減少基質金屬蛋白酶抑制物-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）的產生，進而激活成纖維細胞轉化為TAFs，并增強其增殖、遷移、合成和分泌功能[17]。

水飛薊賓能降低單核細胞趨化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）和TAFs的生物標志物（成纖維細胞活化蛋白、α-SMA、TGF-β2、波形蛋白等），并顯著調節(jié)腫瘤微環(huán)境中免疫細胞的募集從而達到改善腫瘤微環(huán)境的目的[10]。白藜蘆醇能抑制Cyclin D1、原癌基因、MMP-2、MMP-9和胚胎干細胞關鍵蛋白的上調。白藜蘆醇抑制TAFs促進的蛋白激酶B（protein kinase B，PKB/Akt）信號通路和信號轉導及轉錄激活因子（signal transducer andactivatorof transcription，STAT3）的激活，從而抑制與人乳腺癌T74D細胞增殖相關的下游分子（CD44和Sox2）的表達[18]。

1.3 抑制Wnt16信號通路的表達

Wnt16是無翅型整合位點Wnt家族的成員，參與有絲分裂信號通路。通過基因敲除Wnt16，可抑制腫瘤細胞和TAFs之間的相互促進作用，最終抑制腫瘤細胞介導的化療抗性[19]。在成纖維NIH3T3細胞、乳腺癌4T1細胞和結腸癌SW480細胞等腫瘤細胞中，槲皮素能夠顯著抑制活化的成纖維細胞中Wnt16的表達以及降低腫瘤細胞獲得抵抗力和重建基質的活性[20]。

1.4 抑制活性氧（reactive oxygen species，ROS）的生成

ROS在促結締組織增生中起重要作用。少量的ROS具有免疫防御作用，而過量的ROS可導致氧化應激、細胞外調節(jié)蛋白激酶1/2（extracellular regulated protein kinases 1/2，ERK1/2）途徑的激活、肌成纖維細胞的分化和細胞外基質蛋白的異常合成，從而導致纖維化和腫瘤的形成[21-22]。葛根素能顯著提高超氧化物歧化酶的活性，阻斷脂質的自動氧化，并有效清除氧自由基。由于3′-羥基的存在，葛根素能清除ONOO-和總ROS，從而抑制TGF-β誘導纖維化[23]。

2 對TAMs的調節(jié)

巨噬細胞是腫瘤微環(huán)境中的重要組成部分，可分為經典活化的M1型巨噬細胞和替代性活化的M2型巨噬細胞?；罨腗1型巨噬細胞介導機體獲得性免疫和腫瘤細胞的凋亡；而M2型可通過刺激腫瘤細胞增殖，抑制腫瘤微環(huán)境，促進基質重塑以及腫瘤血管和淋巴血管形成等多個環(huán)節(jié)，促進腫瘤的侵襲和轉移[24]。

2.1 上調免疫因子

研究利用小鼠全基因組寡核苷酸微陣列分析杜仲葉中提取的綠原酸給藥后雌性BALB/c小鼠肉瘤EMT-6細胞的基因表達水平，通過時間序列（timeseries）分析、基因本體論（gene ontology，GO）功能分析和信號通路（pathway）分析篩選差異表達基因，并進行定量逆轉錄聚合酶鏈反應（quantitative reverse transcription polymerase chain reaction，RTqPCR）驗證，結果表明參與免疫通路的應答基因CaN、NFATC2、NFATC2ip和NFATC3被顯著上調，免疫因子如白細胞介素2受體（interleukin-2 receptor，IL-2R）和γ干擾素（interferon-γ，IFN-γ）的表達可以得到改善，從而促進T細胞、TAMs和自然殺傷細胞（natural killer cell，NK）細胞的活化和增殖，從而增強它們的監(jiān)視和殺傷能力，進一步抑制腫瘤細胞的生長速率[25]。

2.2 抑制CD163

通過評估M2型巨噬細胞獨特標記物CD163的表達，研究洋蔥素A對IL-10誘導的M2型TAMs活化的毒性作用，洋蔥素A 10、30 μmol/L顯著抑制CD163的表達，抑制TAMs的活性，從而抑制腫瘤的發(fā)展[26-27]。

2.3 降低STAT6磷酸化和轉錄因子C/EBPβ表達

STAT是一種能與DNA結合的蛋白質家族。含有SH2和SH3結構域，可與特定的含磷酸化酪氨酸的肽段結合。當STAT被磷酸化，發(fā)生聚合成為同源或異源二聚體形式的活化的轉錄激活因子，進入胞核內與靶基因啟動子序列的特定位點結合，促進其轉錄。從大黃中提取的大黃素可能通過降低STAT6磷酸化和C/EBPβ表達來抑制肺中TAMs募集和M2極化，從而抑制4T1細胞、乳腺癌EO771細胞的肺轉移[28]。

木犀草素能阻斷STAT6的磷酸化，并降低M2相關基因的表達，并以趨化因子配體2（chemokine ligand 2，CCL2）依賴的方式減少了肺癌Lewis細胞的遷移，通過抑制巨噬細胞分泌的CCL2，實現(xiàn)對單核細胞募集和癌癥遷移的抑制作用，該機制可成為一種治療惡性腫瘤的新思路[29]，抑制巨噬細胞中的c-Jun氨基末端激酶（c-JunN-terminal kinase，JNK）信號，同時激活癌細胞中的這種激酶，抑制TAMs的表達[30]。

2.4 降低趨化因子受體2（chemokine receptors 2，CCR2）的表達

CCR2是在穩(wěn)態(tài)和炎癥條件下參與調節(jié)單核細胞遷移的最重要的趨化因子受體。水飛薊賓可降低荷瘤動物骨髓間充質干細胞的CCR2表達，并通過對4T1荷瘤小鼠腫瘤微環(huán)境的骨髓間充質干細胞中IL-10的測定，證明水飛薊賓可導致巨噬細胞免疫極化偏離M1表型[31]。水飛薊賓能降低p65 NF-κB（ser276，38%；P＜0.01）和STAT-3（ser727，16%；P＜0.01）在腫瘤細胞中的磷酸化，并且減少肺巨噬細胞數(shù)量，同時在肺癌A549細胞中能減少巨噬細胞向荷瘤肺的浸潤，抑制其新生血管生成[32]。

2.5 抑制IL-6的產生

IL-6是多功能的細胞因子，TAMs、T細胞、TAFs及若干腫瘤細胞等都可產生IL-6，它對生物體的分化、代謝、增殖和凋亡等各項生理活動過程都具有調控作用。IL-6的高表達可能會導致正常的組織形態(tài)出現(xiàn)惡性轉化，導致腫瘤的發(fā)生。在氧化偶氮甲烷和葡聚糖硫酸鈉誘導的結腸炎相關腫瘤發(fā)生的小鼠模型中研究發(fā)現(xiàn)，從甘草中提取的異甘草素可通過抑制巨噬細胞中前列腺素E2（prostaglandin E2，PEG2）和IL-6的產生來阻斷M2巨噬細胞極化來調節(jié)腫瘤的發(fā)展[33]。

2.6 上調一氧化氮（nitric oxide，NO）和誘導型一氧化氮合酶（induced nitricoxide synthase，iNOS）表達

從地黃中提取的秦皮乙素通過上調鼠類的巨噬細胞和淋巴細胞中NO和iNOS表達，增加巨噬細胞體內遷移及吞噬功能，誘導脾LAK細胞活性，從而調節(jié)小鼠的免疫功能[34]，亦可抑制STAT3磷酸化，降低M2巨噬細胞分化中IL-10、MCP-1和TGFβ1表達以增強抗骨肉瘤LM8細胞的活性，其機制與M2巨噬細胞分化對TAMs的調節(jié)激活有關[35]。

2.7 其他作用機制

白藜蘆醇通過降低人單核巨噬細胞的M2極化來促進抗腫瘤作用。當白藜蘆醇和腫瘤條件培養(yǎng)基聯(lián)合治療高遷移率族蛋白時，與僅用中藥治療組相比，作為M2表型標記之一的IL-10的分泌、癌細胞中STAT3的活化和腫瘤生長都顯著降低[36]。地榆皂苷I/II通過脾中的淋巴細胞增殖、細胞因子分泌增加和TAMAs吞噬能力的激活來刺激免疫系統(tǒng)[37]。

研究顯示，從柴胡中提取的柴胡皂苷A和柴胡皂苷D具有獨特的免疫調節(jié)功能，通過誘發(fā)巨噬細胞聚集、游走、吞噬，刺激B淋巴細胞和T淋巴細胞發(fā)揮免疫調節(jié)作用[38-39]。柴胡皂苷D還可通過提高巨噬細胞的擴散能力和酸性磷酸酶的活性，增強體內免疫細胞的功能發(fā)揮免疫調節(jié)作用，還可促進IL-2的產生及其受體的表達[40]。然而，研究顯示柴胡皂苷A 50 μmol/L可抑制磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）/Akt，從而抑制T淋巴細胞的增殖與活化，最終抑制T細胞發(fā)揮免疫功能[41]，亦有研究表明柴胡皂苷A對動物的胸腺有一定的抑制作用，可使機體的免疫功能下降[42]。

3 對T細胞和NK細胞的調節(jié)

T細胞主要分為CD8+T細胞和CD4+T細胞，CD4+T細胞又包括Th1、Th2、Th17和調節(jié)性T細胞等。惡性腫瘤細胞能分泌免疫抑制因子，促使CD4+T淋巴細胞減少，CD8+T淋巴細胞增多，CD4+/CD8+下降[43]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，多種中藥都能促進T細胞的增殖與分化，改善CD4+T細胞和CD8+T細胞的比例，提高機體抗腫瘤的能力。NK細胞是機體重要的免疫細胞，不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調節(jié)有關，而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發(fā)生，能夠識別靶細胞、殺傷介質。

3.1 抑制IL-12 p70的產生

IL-12 p70作用于NK細胞和T細胞，誘導細胞因子的產生、增殖和細胞毒活性的增加，并發(fā)揮重要的促炎功能?；ㄆ焖绍?～100 mmol/L能顯著抑制細胞因子IL-12 p70的分泌，并阻斷DCs對脂多糖和脂磷壁酸的作用，從而抑制DCs介導的免疫反應[44]。

3.2 抑制MCP-1的表達

雖然腫瘤或轉基因細胞含有高表達的趨化因子MCP-1，但在體外生長活性并無明顯差異，而動物體內的成瘤實驗卻證實成瘤能力明顯下降或消失，腫瘤生長緩慢，而浸潤細胞數(shù)量可增加2倍以上[45]。單核細胞的浸潤過程可被中和MCP-1的抗體阻斷，這就導致了腫瘤的形成和生長速度的加快。水飛薊賓治療的TRAMP小鼠藥效實驗表明其能抑制前列腺腫瘤中MCP-1的表達，從而增強NK細胞和細胞毒性T細胞的免疫監(jiān)視功能[10]，還能增加腫瘤浸潤性T細胞，延緩腫瘤生長和減少骨髓間充質干細胞的積累，增加T細胞的含量[31]。

3.3 增強IL-2和IFN-γ的分泌

IL-2是重要的免疫調節(jié)因子之一，能誘導T淋巴細胞增殖、分化；可激活NK細胞提高其活性；能增強細胞毒性T淋巴細胞的細胞毒性；能激活腫瘤浸潤性淋巴細胞，促進其分泌細胞因子、表達對應受體；此外IL-2還能誘導產生腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）、IFN、細胞集落刺激因子，通過協(xié)同作用加強NK細胞活性[46]。IFN-γ為Ⅱ型干擾素，主要由活化的T細胞和NK細胞產生。研究證明IFN-γ具有抑制多種腫瘤細胞生長的能力，尤其是對乳腺癌的治療有著良好的作用。在BALB/c小鼠中，從穿心蓮中提取的穿心蓮內酯通過促進T淋巴細胞和NK細胞的增殖來增強IL-2和IFN-γ的分泌，從而抑制腫瘤生長[47]。

3.4 H2O2和Ca2+選擇性積累

一些研究已經揭示了在惡性T細胞中用漢黃芩素治療后產生H2O2和Ca2+超載作為抗腫瘤機制，與正常細胞相比，惡性淋巴細胞產生更高水平的超氧自由基，而漢黃芩素具有將超氧自由基轉化為H2O2的能力，導致H2O2在惡性T細胞而不是正常T細胞中選擇性積累，從而在惡性細胞中選擇性誘導凋亡[48]。

3.5 其他作用機制

T細胞增殖：體外實驗證明鹽酸小檗堿10～20 μg/mL可輕微增加T細胞對抗原的增殖反應，而質量濃度超過該水平會導致劑量相關性免疫抑制[49]；抑制免疫逃逸：兒茶素阻斷IFN-γ激活的兩面神激酶-蛋白激酶C-delta-STAT1通路，抑制吲哚胺2,3-雙加氧酶（indoleamine 2,3-dioxy-genase，IDO）表達，糾正癌細胞免疫逃逸；改善免疫抑制環(huán)境：槲皮素可顯著降低免疫抑制的調節(jié)性T細胞和MDSCs，并且增加DCs上共刺激信號（MHC Ⅱ類和CD86）的水平，表明這些DCs已成熟并被激活，可促進抗腫瘤T細胞活性和誘導細胞因子分泌，如IL-12、IFN-γ[50]。

白藜蘆醇下調癌細胞的PI3K/Akt/哺乳動物雷帕霉素靶通路（mammalian target of rapamycin，mTOR）[51-52]。抑制PI3K途徑可激活CD8+細胞毒性T細胞活性，增強抗癌免疫[53]。白藜蘆醇能夠激活免疫細胞，選擇性地誘導癌細胞死亡。調節(jié)性T細胞在實體瘤中大量存在，在調節(jié)免疫腫瘤微環(huán)境的穩(wěn)態(tài)中起著關鍵作用，腫瘤微環(huán)境中調節(jié)性T細胞數(shù)量的增加與患者的生存結果呈負相關[54]。

4 對DCs的調節(jié)

腫瘤微環(huán)境中的腫瘤浸潤性DCs為不成熟的DCs，可以誘導免疫抑制，具有抗原呈遞功能紊亂、抑制細胞的內吞噬、異常活動等特點。研究發(fā)現(xiàn)中藥單體成分可通過不同機制促進DCs成熟，調控DCs的抗原呈遞功能和抗腫瘤活性。

4.1 抑制IL-12和TNF-α

IL-12作用于NK細胞和T細胞，誘導細胞因子的產生、增殖和細胞毒活性的增加，并發(fā)揮重要的促炎功能。TNF-α在體內外均可對一些腫瘤細胞或細胞系起殺傷作用，大劑量TNF-α可引起惡病質，患者呈進行性消瘦，因而TNF-α又稱惡病質素。從水飛薊中提取的花旗素苷能顯著抑制IL-12和TNFα的產生，從而對DCs介導的免疫反應發(fā)揮抑制作用[44]。水飛薊賓通過抑制p38蛋白激酶、細胞外調節(jié)蛋白激酶和JNK，對小鼠骨髓DCs的表型和功能成熟產生抑制作用，其介導的抑制脂多糖刺激的CD11c+DCs產生IL-12也可能有助于誘導免疫抑制狀態(tài)[55]。在體外和體內條件下均證明水飛薊賓是DCs成熟的有效抑制劑。

4.2 增加共刺激信號水平

共刺激分子具有激活T細胞、賦予T細胞活化的第二信號，并且參與Th細胞極化的作用。槲皮素和丙氨酸內酯聯(lián)合使用誘導免疫原性細胞死亡釋放的高遷移率族蛋白B1（high mobility group box 1，HMGB1）和鈣網(wǎng)蛋白來激活DCs，并且極大地增加DCs上共刺激信號（MHC II類和CD86）的水平，從而促進DCs成熟并激活，增加CD4+/CD8+T細胞數(shù)量[50]。

5 對MDSCs的調節(jié)

MDSCs是骨髓來源的異質性細胞群，主要是由TAMs、中性粒細胞和DCs等不成熟的前體細胞構成，具有很強的免疫抑制作用，其在腫瘤微環(huán)境中大量存在，是引起腫瘤免疫逃逸的重要細胞群體[56]。MDSCs在血液中增加，并在腫瘤攜帶動物的腫瘤微環(huán)境中積累，導致癌癥中的免疫抑制。研究表明在小鼠乳腺癌4T1細胞模型中，水飛薊賓能顯著抑制腫瘤生長，瘤內細胞生化指標測定顯示，水飛薊賓能降低CCR2在腫瘤浸潤MDSCs中的表達，對脾MDSCs中的CCR2表達無影響，因此推測水飛薊賓通過減少MDSCs的腫瘤趨向性，從而抑制4T1細胞的生長[31]。

6 對VEC的調節(jié)

血管生成即新血管的形成，在腫瘤發(fā)展的早期是必需的，它對腫瘤的擴張、發(fā)展和轉移至關重要。血管生成是一個復雜的過程，涉及基底膜的降解、內皮細胞對基質的侵入、內皮細胞增殖、遷移并組織成毛細血管結構[57]。

6.1 減少血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的分泌

VEGF在血管的形成以及在腫瘤的生長和轉移過程中起到重要作用。VEGF是癌癥血管生成的關鍵介質，它刺激新血管的生長，并使腫瘤獲得生長所需的營養(yǎng)和氧氣，是正常和異常血管生成的關鍵調節(jié)因子[58-59]。兒茶素[60]、苦參堿[61]和氧化苦參堿[62]、白藜蘆醇[63]、水飛薊賓[64-65]、齊墩果酸[66]、熊果酸[67]、鞣花酸[68]、漢黃芩苷[69]、紫草素[70]、柴胡皂苷D[71]、秦皮乙素[35]和積雪草酸[72]等單體成分通過降低VEGFα的RNA和蛋白表達，以及抑制肝細胞生長因子受體/c-Met基因等途徑抑制VEGF的表達，從而抑制多種腫瘤細胞的血管生成。

6.2 抑制PI3K/Akt/mTOR信號通路

PI3K/Akt/mTOR信號通路參與多種細胞生物學過程，包括細胞生長、運動、代謝和血管生成以及凋亡[73-74]。近來有研究表明綠原酸[75]、大黃素[76]、苦參堿[77]、漢黃芩素[48]和芹菜素[78]等單體成分能夠負向調節(jié)PI3K/Akt/mTOR信號通路，在多種水平上抑制VEC的增殖和遷移，并抑制血管的生成。

6.3 抑制MMP-1、MMP-2和MMP-9的表達

MMPs具有降解和重塑細胞外基質的作用，促進腫瘤細胞的侵襲和轉移[79]。研究發(fā)現(xiàn)，鹽酸小檗堿[80]、大黃素[76,81]、水飛薊賓[65]、槲皮素[82]、木犀草素[30,83]、穿心蓮內酯[47]和氧化苦參堿[62]等中藥單體成分能夠下調MMP-1、MMP-2和MMP-9的表達來抑制VEC的活性，降低微血管密度。

6.4 其他作用機制

癌細胞中IL-8的過表達會促進血管生成，小檗堿通過抑制p38蛋白激酶、ERK1/2和JNK信號通路，在體外和體內均顯著降低胃腺癌MGC 803細胞中IL-8的分泌，從而抑制新生血管的生成[84]。從桃兒七的根和根莖中提取的鬼臼毒素通過破壞細胞內微管的穩(wěn)定性而顯著抑制各種癌細胞的生長[85]。從黃連中提取的藥根堿在體內和體外抑制了黑色素瘤C8161細胞中血管內皮鈣黏蛋白基因的表達，從而抑制血管生成，血管內皮鈣黏蛋白是腫瘤血管生成擬態(tài)和血管生成的關鍵蛋白[86]。

天然來源中藥單體成分對腫瘤微環(huán)境組成細胞的作用機制見表1。

表1 天然來源中藥單體成分對腫瘤微環(huán)境組成細胞的作用機制Table 1 Mechanism of natural Chinese medicine monomer components on tumor microenvironment cells

續(xù)表1

續(xù)表1

7 結語

目前通過中藥單體成分對腫瘤微環(huán)境的調節(jié)來抑制腫瘤的發(fā)生與發(fā)展受到越來越多的關注。不同的中藥單體成分具有多種生物學功能，直接或間接地影響腫瘤微環(huán)境細胞，大量的體外實驗證明中藥單體為改善腫瘤免疫及非免疫微環(huán)境提供了多種治療選擇，隨著中藥單體成分以及腫瘤免疫學等相關的研究越來越成熟，腫瘤微環(huán)境中的各種相關組分可能會成為未來中藥治療腫瘤的新靶點。

盡管如此，中藥單體成分在改善腫瘤微環(huán)境研究中仍處于初級起步階段，存在以下問題：（1）作用機制有待深入研究。有效單體組分抗腫瘤的作用機制需要更深入、全面的研究，特別是其在中藥成分結構分類與藥理作用相關性、亞細胞水平的作用靶點、對免疫微環(huán)境的調節(jié)通路[50]等方面；（2）中藥配伍優(yōu)勢有待開發(fā)。中藥藥效的發(fā)揮，最大的優(yōu)勢在于多成分、多靶點的協(xié)同作用，然而目前中藥單體的研究大多針對一種成分或該成分與化療藥物聯(lián)用進行研究，不能充分體現(xiàn)在中醫(yī)藥理論指導下的藥物配伍優(yōu)勢，因此不能充分體現(xiàn)單體成分相較于常規(guī)化療藥物的優(yōu)勢；（3）成藥性有待解決。中藥單體成分具有成藥性差（難溶性、膜滲透性低、治療窗窄、穩(wěn)定性差）、藥動學行為不理想（生物利用度低、半衰期短、清除率高）等不足，以上問題嚴重限制了其臨床應用[88]；（4）靶向納米制劑有待開發(fā)。靶向納米制劑具有提高腫瘤部位藥物聚集、降低正常組織藥物分布，有效靶向至組織、細胞、細胞器的功能[89-90]，中藥單一或多成分協(xié)同包載的靶向納米制劑的開發(fā)有利于進一步提高減毒增效的生物學效應。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突