陳小雪 李冉冉
近些年,人們對食品安全加強(qiáng)了關(guān)注,也使得罌粟殼被摻入食品制作過程這一問題及現(xiàn)象得以暴露,所以非常有必要加大對食品安全的檢查力度。目前檢測食品中是否含有罌粟殼成分的檢測方法較多,有比色法、極譜法、氣相色譜法等等,但是這些方法操作較為繁瑣,需要做較多準(zhǔn)備工作,同時(shí)這些方法有干擾因素較多、靈敏度低、儀器昂貴等不足及缺陷。筆者通過實(shí)驗(yàn),建立了能夠快速檢驗(yàn)食品中含有罌粟殼成分的方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,采用競爭抑制免疫層析法檢測食品中的罌粟殼成分,具有快捷、準(zhǔn)確、高效的特點(diǎn),值得進(jìn)一步推廣。
一、材料與方法
1.材料來源。此次研究所用樣本,皆來自于餐飲食品安全監(jiān)督和食品刑事案件偵辦過程中的抽樣樣品,共計(jì)30份。抽樣品種包括鹵湯、火鍋底料、燒烤調(diào)味料等。
2.儀器與試劑。此次檢測,主要使用高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測、罌粟殼快速檢測卡,由無錫中德伯爾生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),研究前已對生產(chǎn)日期及質(zhì)量進(jìn)行檢測,明確其不會(huì)影響研究最終結(jié)果。
3.檢測原理。高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測:樣品被水或鹽酸溶液分散,乙腈提取后,經(jīng)鹽析分層,采用MCX柱進(jìn)行凈化,離心,之后使用液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測,使用外標(biāo)法對那可汀、蒂巴因、罌粟堿定量,內(nèi)標(biāo)法對可待因、嗎啡定量。
罌粟殼快速檢測卡:基于競爭抑制免疫層析原理,罌粟殼成分流動(dòng)中會(huì)與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合,從而抑制抗體和NC膜檢測線上的抗原偶聯(lián)物結(jié)合,檢測線如若與樣本接觸后不變色,則為陽性;相反的,檢測線處顯現(xiàn)紅色,則為陰性。
4.檢測項(xiàng)目。在檢測過程中,主要對罌粟堿、那可汀、嗎啡、可待因、嗎啡等5種成分進(jìn)行檢測,這些為罌粟殼主要成分,如果在樣品中發(fā)現(xiàn)這些成分,便可以肯定食品中曾加入罌粟殼。
5.統(tǒng)計(jì)方法。數(shù)據(jù)錄入采用Epi Data 3.1軟件,數(shù)據(jù)分析采用SPSS19.0軟件,確保數(shù)據(jù)分析中有人為因素干擾,并進(jìn)一步提升數(shù)據(jù)分析的有效性,此外,使用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行比較。
二、結(jié)果
1.競爭抑制免疫層析法檢測結(jié)果。在抽檢的30份樣品中,陽性樣本4份、陰性樣本26份,食品合格率為86.67%,詳見表1。值得一提的是,所有檢測出陽性的樣本,皆有不同含量的嗎啡、可待因、那可汀、罌粟堿,但是并未檢測出蒂巴因成分。
2.高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法檢測結(jié)果。在采用競爭抑制免疫層析法檢驗(yàn)出的4份含有罌粟殼成分的樣品中,采用高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行再次驗(yàn)證,目的是認(rèn)清競爭抑制免疫層析法的檢驗(yàn)質(zhì)量和檢驗(yàn)有效性。其中,嗎啡檢測值在236μg/kg-298μg/kg,可待因檢測值在50μg/kg-57μg/kg,那可汀檢測值在11μg/kg-16μg/kg,罌粟堿檢測值在17μg/kg-19μg/kg。
3.競爭抑制免疫層析法與第二次檢測的符合率。對采用競爭抑制免疫層析法檢測的樣本進(jìn)行二次抽查與檢驗(yàn),發(fā)現(xiàn)高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法檢測結(jié)果與競爭抑制免疫層析法檢測結(jié)果一致,可以確定競爭抑制免疫層析法可用于檢測粟殼成分,因此,可以肯定的是,競爭抑制免疫層析法與第二次檢測的符合率為100%。
三、討論
隨著人們生活水平的提高,外出就餐的機(jī)會(huì)越來越多,對于食品安全的關(guān)注度自然會(huì)大幅度提升。在近些年的食品監(jiān)督工作中,發(fā)現(xiàn)很多不法商販為了吸引顧客、提升收益,會(huì)有意地在鹵制品、火鍋底料、燒烤調(diào)味料中加入罌粟殼,吃后讓人上癮。但罌粟殼含有有害成分,吃后會(huì)嚴(yán)重危害大眾的身體健康。比如,罌粟殼除了會(huì)讓消費(fèi)者對食物產(chǎn)生成癮性,還會(huì)對人體的肝臟、心臟有一定的毒害作用,長期食用,甚至還會(huì)出現(xiàn)發(fā)冷、出虛汗、面黃肌瘦、犯困等癥狀,嚴(yán)重的會(huì)造成急性中毒,癥狀包括低血壓、呼吸抑制、昏迷、瞳孔變小等,也有因過度食用而造成死亡的案例。
為了打擊市面上銷售罌粟殼或用于加工其他調(diào)味品的行為,早在2005年國家就已出臺相關(guān)政策與法規(guī),明令禁止將罌粟殼放入食品中,同時(shí)也加大了食品中罌粟殼的檢測。雖然,當(dāng)前可以檢測食品中是否含有罌粟殼成分的方法有很多,但出于低成本、高效率的考量,我們此次主要圍繞競爭抑制免疫層析法展開探究,對30份抽查樣本進(jìn)行測驗(yàn),并采用高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行第二輪測驗(yàn),進(jìn)一步明確競爭抑制免疫層析法在其中起到的作用,為今后應(yīng)用該方法檢驗(yàn)食品中的罌粟殼成分奠定基礎(chǔ)。經(jīng)檢驗(yàn),30份樣品中,有4份為陽性樣本,合格率為86.67%,之后采用高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行新一輪檢測,發(fā)現(xiàn)檢測結(jié)果與競爭抑制免疫層析法檢測結(jié)果相同,兩種檢測結(jié)果符合率為100%。由此可見,競爭抑制免疫層析法在檢測食物罌粟殼成分中具有突出成效,值得在食品監(jiān)督中進(jìn)一步推廣使用。
(基金項(xiàng)目:新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2020D01A11)。)