段 平

（貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 貴州 貴陽(yáng) 550004）

感染性角膜炎是臨床最常見(jiàn)的致盲性角膜疾病，主要發(fā)生于戶外工作者，并以細(xì)菌，真菌和病毒為主要致病菌，該類疾病引起角膜感染的病原體種類較多，臨床表現(xiàn)較為復(fù)雜。因此需要采用早期快速的診斷才能提供有效數(shù)據(jù)，有利于后期治療，降低致盲率。若患者已出現(xiàn)眼內(nèi)炎癥或角膜穿孔現(xiàn)象預(yù)后情況較差，最嚴(yán)重的會(huì)導(dǎo)致患者摘除眼球[1]。目前臨床診斷主要有接觸史、臨床表現(xiàn)、角膜刮片鏡檢以及培養(yǎng)等，但是患者臨床培養(yǎng)的假陰性較高，同時(shí)診斷時(shí)間較長(zhǎng)，檢出率不高，因此需要改用另外有效合理的方式進(jìn)行檢驗(yàn)。角膜激光共聚焦顯微鏡這種新型的活體生物檢查技術(shù)，能夠?qū)铙w角膜進(jìn)行非侵入性的快速檢查，并對(duì)不同情況病原體感染的角膜影像呈現(xiàn)不同特征[2]。因此，本文以患有感染性角膜炎的患者作為對(duì)象。探討感染性角膜炎診斷中角膜激光共聚焦角膜顯微鏡的應(yīng)用效果?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年10 月—2020 年8 月我院接收的患有感染性角膜炎的患者68 例，男38 例，女30 例，年齡24 ～89 歲，平均年齡（59.24±2.54）歲；住院時(shí)間4 ～28 d，平均住院時(shí)間（18.24±2.35）d；角膜炎類型：細(xì)菌性角膜炎26 例，真菌性角膜炎22 例，單皰病毒性角膜炎20 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均臨床確診為單一類型的感染角膜炎患者，患者自主簽署知情同意書，以角膜潰瘍標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，確診為感染性角膜炎，均存在不同程度的眼部疼痛，視力下降等癥狀并伴隨有角膜水腫，潰瘍以及纖維素滲出等體征[3]。排除標(biāo)準(zhǔn)：患者臨床診斷感染病原體不確定；檢查后出現(xiàn)兩種及以上病原體混合感染的癥狀；角膜感染后在其他醫(yī)院或者自行用過(guò)抗生素滴眼液；臨床出現(xiàn)角膜開(kāi)放性傷口[4]；免疫功能疾??；具有凝血功能障礙；不配合用藥治療。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集以及檢驗(yàn) 醫(yī)護(hù)人員需要對(duì)患者嚴(yán)格按照無(wú)菌操作流程，在手術(shù)或治療中需要對(duì)患者機(jī)體表面麻醉角膜潰瘍物進(jìn)行刮?。航悄そM織刮片：選取鹽酸丙美卡因眼藥水[愛(ài)爾康（中國(guó)）眼科產(chǎn)品有限公司，進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)：H201601333]進(jìn)行麻醉處理后選擇開(kāi)瞼器，打開(kāi)眼瞼部位并利用一次性手術(shù)圓刀器械刮取潰瘍以及角膜分泌物涂在載玻片上，將氫氧化鉀滴1 ～2 滴于載波片上，染色后完成制片，在顯微鏡下觀察標(biāo)本的孢子及菌絲情況[5]。

角膜激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)方式：（1）用當(dāng)天消毒后的開(kāi)瞼器暴露需要檢查的患眼。（2）于鏡頭表面涂偶合劑少許，其中不能有氣泡，將無(wú)菌的一次性鏡頭帽蓋上，使凝膠和鏡頭帽之間有適當(dāng)面積的接觸。（3）轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)焦旋鈕直至圖像全部為白色，將此平面設(shè)置為零平面。（4）將鏡頭對(duì)準(zhǔn)需要檢查組織向前推進(jìn)接觸組織后，再輕旋轉(zhuǎn)鏡頭逐步深入觀察，每次旋轉(zhuǎn)推進(jìn)的深度為2 ～20μm，根據(jù)顯示病灶的情況深入，并隨時(shí)截取需要的圖片[6]。（5）每只眼須對(duì)角膜潰瘍面、角膜潰瘍面的上、下、左、右5 個(gè)部位分別檢查。

檢查結(jié)果分析：角膜激光共聚焦顯微鏡顯示，能夠見(jiàn)到真菌菌絲為樹枝狀高反光，線形結(jié)構(gòu)長(zhǎng)短不一，雜亂無(wú)章的交錯(cuò)排列狀態(tài)，部分菌絲有分叉。角膜組織刮片顯示角膜壞死部位呈現(xiàn)溶解狀，孢子較為清晰，無(wú)分節(jié)現(xiàn)象，菌絲呈現(xiàn)折光反應(yīng)。

1.2.2 操作方法 臨床選用具有1 年以上共聚焦角膜顯微鏡檢查經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)師對(duì)患者角膜病變組織部位進(jìn)行檢查，操作步驟為：（1）在患者患眼滴用鹽酸丙美卡因眼藥水[愛(ài)爾康（中國(guó)）眼科產(chǎn)品有限公司，進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)：H201601333]分別進(jìn)行2 次表面麻醉。（2）用當(dāng)天消毒后的開(kāi)瞼器暴露需要檢查的患眼。（3）于鏡頭表面涂偶合劑少許，其中不能有氣泡，將無(wú)菌的一次性鏡頭帽蓋上，使凝膠和鏡頭帽之間有適當(dāng)面積的接觸。（4）轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)焦旋鈕直至圖像全部為白色，將此平面設(shè)置為零平面。（5）將鏡頭對(duì)準(zhǔn)需要檢查組織向前推進(jìn)接觸組織后，再輕旋轉(zhuǎn)鏡頭逐步深入觀察，每次旋轉(zhuǎn)推進(jìn)的深度為2 ～20μm，根據(jù)顯示病灶的情況深入，并隨時(shí)截取需要的圖片[6]。（6）每只眼須對(duì)角膜潰瘍面、角膜潰瘍面的上、下、左、右5 個(gè)部位分別檢查。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）比較患者臨床角膜炎病原菌分布。所有患者在入院后均進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性抗菌藥物全身以及局部治療，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，明確感染類型以及感染菌種，按照耐藥性選擇敏感度較高的藥物進(jìn)行治療[7]。（2）比較患者診斷后治療效果。痊愈：患者角膜炎癥狀完全消失，角膜熒光素染色呈現(xiàn)陰性，角膜水腫出現(xiàn)減退，視力明顯恢復(fù)。好轉(zhuǎn)：患者角膜炎臨床癥狀減輕，角膜潰瘍面明顯縮小，角膜熒光素染色呈陽(yáng)性，水腫癥狀得到改善，視力有所恢復(fù)。無(wú)效：患者角膜炎臨床癥狀、體征加重。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。正態(tài)分布的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（± s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和構(gòu)成比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 患者臨床角膜炎病原菌分布情況

經(jīng)檢測(cè)，68 例患者檢測(cè)出92 株病原菌，其中病原菌主要以真菌為主（50.00%），其次為革蘭陽(yáng)性菌（20.65%），革蘭陰性菌（7.61%），單純皰疹病毒（21.74%），見(jiàn)表1。

表1 92 株臨床角膜炎病原菌分布情況

2.2 患者治療后治療效果比較

患者治療后1 個(gè)月治療有效率高于治療后2 周，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 68 例患者治療后治療效果比較[n（%）]

3.討論

感染性角膜炎是臨床病原菌侵襲角膜引發(fā)的炎癥反應(yīng)，由于現(xiàn)代社會(huì)發(fā)展以及生活習(xí)慣改變，會(huì)增加該類疾病發(fā)病率，因此需要臨床提供快速準(zhǔn)確的診斷方法才能改善患者預(yù)后，降低術(shù)后不良癥狀發(fā)生[8]。目前感染性角膜炎臨床診斷方法主要依賴于患者病史調(diào)查，裂隙燈檢查以及病灶刮片鏡檢和微生物培養(yǎng)等方法，但有一定局限性，會(huì)受到患者本身主觀影響，造成診斷效率過(guò)低。角膜激光共聚焦顯微鏡屬于一種非侵入性的檢查設(shè)備，對(duì)臨床診斷角膜炎具有輔助作用[9]。該類設(shè)施能夠在無(wú)創(chuàng)前提下獲得角膜以及周圍組織部位的清晰圖像，同時(shí)還能從細(xì)胞水平上分析患者眼表結(jié)構(gòu)，具有較強(qiáng)的直觀性。臨床采用的傳統(tǒng)診斷感染性角膜炎的金標(biāo)準(zhǔn)是患者實(shí)驗(yàn)室的病原菌培養(yǎng)，但是該類技術(shù)角膜選取量較少，陽(yáng)性率較低，同時(shí)該類標(biāo)準(zhǔn)常由臨床醫(yī)師決定，會(huì)存在誤診情況。本結(jié)果顯示68 例患者檢測(cè)出92 株病原菌，其中病原菌主要以真菌為主（50.00%），其次為革蘭陽(yáng)性菌（20.65%），革蘭陰性菌（7.61%），單純皰疹病毒（21.74%），說(shuō)明臨床對(duì)于感染性角膜炎患者采用角膜激光共聚焦角膜顯微鏡進(jìn)行診斷治療，能夠清晰顯示病原菌分布情況，主要以真菌為主。感染性角膜炎包括真菌性、阿米巴性、細(xì)菌性、病毒性以及混合性等類型，真菌性角膜炎是潛在致盲性炎癥，致病基因?yàn)殓牭毒鷮僖约扒箤僬婢?。?shí)驗(yàn)室微生物檢查主要為角膜潰瘍面分泌物涂片鏡檢以及培養(yǎng)等，但是阿米巴培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，因此當(dāng)病原體處于角膜深層時(shí)，刮片難以接觸，但是棘阿米巴包囊能夠直接使角膜激光共聚焦顯微鏡來(lái)發(fā)現(xiàn)和診斷，提高了診斷準(zhǔn)確度。細(xì)菌性角膜炎在感染性角膜炎中占據(jù)主要地位，同時(shí)該類癥狀研究較少[10]。病毒是感染性角膜炎的常見(jiàn)致病菌，該類癥狀無(wú)明顯特異性，只有賴于實(shí)驗(yàn)室檢查。角膜激光共聚焦顯微鏡用來(lái)評(píng)估角膜結(jié)構(gòu)變化并監(jiān)測(cè)患者預(yù)后情況。本文中，經(jīng)過(guò)治療后1 個(gè)月有效率高于治療后2 周（P＜0.05）。說(shuō)明臨床對(duì)于感染性角膜炎患者采用角膜激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行診斷治療，治療時(shí)間越長(zhǎng)，有效率越高。共聚焦顯微鏡被廣泛應(yīng)用于臨床，但仍存在局限性，具有高度敏感的角膜炎患者檢查會(huì)引起眼部不適，檢查時(shí)患者眼球轉(zhuǎn)動(dòng)會(huì)導(dǎo)致圖像不清晰，同時(shí)該類檢查方法視野范圍較小，會(huì)需要操作者不斷在病變組織部位進(jìn)行移動(dòng)檢查。

綜上所述，臨床對(duì)于感染性角膜炎患者采用角膜激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行診斷治療，能夠清晰顯示病原菌，并且治療時(shí)間越長(zhǎng)，有效率越高。