張巍巍,王 新
(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,山東 青島 266109)
非洲豬瘟(African swine fever,ASF),由名字可知,此病發(fā)源于北鄰撒哈拉的非洲。然而,受到非洲養(yǎng)殖業(yè)不斷發(fā)展與人口廣泛流動的影響,出現(xiàn)了ASF向其他國家流行的趨勢[1]。2017年,F(xiàn)AO(聯(lián)合國糧農(nóng)業(yè)組織)以獸醫(yī)手冊的方式編寫出《非洲豬瘟:發(fā)現(xiàn)與診斷》,該手冊對世界范圍內(nèi)ASF的流行路徑進(jìn)行了總結(jié)。1909年,ASF在肯尼亞首次出現(xiàn),并證實(shí)其源自歐洲。當(dāng)時,大多數(shù)的ASF傳播于一類非洲野豬與一種蜱間[2]。已定居肯尼亞的歐洲人觀察到,僅需借助柵欄隔離野豬與家豬,即可正常養(yǎng)殖。然而之后,養(yǎng)殖業(yè)在非洲的發(fā)展速度開始提高,家豬飼養(yǎng)量持續(xù)增多,同時豬只放養(yǎng)已呈大規(guī)模,如此使得ASF再次短時間內(nèi)廣泛流行。之后的100多年,因ASF,非洲遭受了巨大損失[3]。同時,由官方報告可知,21世紀(jì)到來后,非洲的ASF疫情暴發(fā)的頻率更高[4]。諸如,2007年、2010年與2015年的毛里求斯、乍得與贊比亞。誠然,首次暴發(fā)并非首次發(fā)現(xiàn),同時相關(guān)判斷顯示,一些區(qū)域ASF首次發(fā)生的確切時間早于正式通報時間。1957年,ASF出現(xiàn)于歐洲的所有城市,歐洲成為首個被此病毒侵入的地域,產(chǎn)生了無法估量的損失,可以說ASF起源非洲,扎根歐洲,最后傳遍全球[5]。2018年8月,我國首次發(fā)現(xiàn)ASF,懷疑沈陽市沈北新區(qū)一養(yǎng)殖場的生豬出現(xiàn)ASF疫情,此場383頭豬中,發(fā)病、死亡的只數(shù)達(dá)47頭,該月3日,證實(shí)此養(yǎng)殖場發(fā)生了ASF疫情[6]。之后我國其他地區(qū)先后報道病例的存在,包括河南、江蘇等,當(dāng)前,對于我國生豬養(yǎng)殖領(lǐng)域而言,ASF已成為最大的危害,談非洲豬瘟色變,給養(yǎng)殖業(yè)帶來重大生物安全隱患,同時威脅著國家和企業(yè)乃至個人的利益,現(xiàn)階段,疫苗的研發(fā)以及防非洲豬瘟工作的穩(wěn)固性及意識的提高成為生豬養(yǎng)殖的頭等大事[7]。
非洲豬瘟病毒(ASFV)在分類學(xué)上,被歸入Asfarviridae(非洲豬瘟科)、Asfi virus(非洲豬瘟病毒屬),病毒粒子在 175~215 nm 之間,呈雙層膜結(jié)構(gòu),分別為內(nèi)膜、囊膜,其具備在豬的諸多不同細(xì)胞質(zhì)內(nèi)復(fù)制能力,尤其在單核m?(巨噬細(xì)胞)與網(wǎng)狀EC(內(nèi)皮細(xì)胞)內(nèi)復(fù)制活性更強(qiáng),為現(xiàn)今已發(fā)現(xiàn)的唯一蟲媒DNA病毒,其特異性傳播媒介為鈍緣蜱,病毒能夠于鈍緣蜱內(nèi)增殖,對豬叮咬后,可經(jīng)血液途徑造成豬感染此病毒[8]。ASFV的血清型僅有1個,然而在病毒株方面存在明顯區(qū)別,存在強(qiáng)、中、弱這3類毒株,其中強(qiáng)毒株同高致死性急性ASF的發(fā)生相關(guān),病豬通常無明顯感染癥狀呈現(xiàn)時就突發(fā)死亡,但不論是何種類型的ASF,皆為100%的致死率[9]。該病毒耐低溫,在低溫暗室血液中存活時間能達(dá)到 6年之久,溫室條件下能存活6周[10]。酸堿度存在很寬的耐受區(qū)間,當(dāng)酸堿度處于4至13范圍時其也能夠存活,同時在腌制品、血液、組織、糞便內(nèi)的活性同樣可保持較長時間。通過加熱的方法能有效殺死該病毒 ,如在60℃下加熱 10~20 min,也可為55℃時實(shí)施30 min的加熱處理,在實(shí)踐工作中60℃加熱30 min可達(dá)最佳消毒效果??蓪?dǎo)致其活性喪失的物質(zhì)有常見的消毒劑,同時它對氯仿、乙醚敏感[11]。
野豬與家豬皆易感染ASF,且在性別、年齡與品種上無差異性,在感染途徑上,以呼吸道、消化道占絕對優(yōu)勢,成年豬最易感[12]。在傳染源上,以病豬與攜毒豬為主,病毒在病豬體內(nèi)的分布以各組織器官、排泄物、分泌物與體液為主,其中分布最多的是腎臟、脾臟與淋巴結(jié),潛伏期最長可達(dá)21 d,病豬排毒始于潛伏階段,同時在病程整個期間皆存在此行為,因而在豬場內(nèi)雖未見病豬的明顯患病癥狀,即已存在傳染源,若出現(xiàn)生物安全漏洞,如跑豬等現(xiàn)象,甚至造成感染豬群整體后果,帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失[13]。ASF是高接觸性傳染病,主要傳播方式為水平傳播,垂直傳播無研究意義,感染病豬往往產(chǎn)死胎,無活胎可能性,因此其主要通過水平(間接、直接、媒介)傳播[14]。對于ASF的傳播途徑而言,絕大多數(shù)為健康豬直接觸及污染物、病豬,攜毒的媒介昆蟲(諸如蜱等)叮咬豬,同樣存在感染ASF風(fēng)險。間接傳播范圍廣、較復(fù)雜,也是生物安全把控的要點(diǎn),可通過人流(訪客+內(nèi)部員工)、物品(飼料+動保用品+食物+私人物品+其他:如工具等)、車輛(場內(nèi)運(yùn)輸車+運(yùn)豬車/飼料車+員工車輛)、豬群(進(jìn)苗、出豬+調(diào)欄+死豬處理)、生物流動(鼠類、貓、狗、雞、蚊蠅等)進(jìn)行傳播。病毒氣溶膠形成所導(dǎo)致的空氣傳播也是ASF傳播的一種途徑,但豬場場址的選擇、建設(shè),場內(nèi)的密閉性和環(huán)控方面的預(yù)防,可有效阻斷該傳播路徑[15]。
對于ASF,特急性(即“非常急”)至無癥狀(即“不明顯”)這些臨床表現(xiàn)形式皆較為廣泛。在臨床表現(xiàn),不管感染1周內(nèi)的突發(fā)死亡,還是連續(xù)若干周(或若干月)的慢性感染,皆未固定。主要癥狀有;高燒不退,皮膚泛紅,便秘,腹瀉等,對豬體進(jìn)行解剖,會發(fā)現(xiàn)其內(nèi)部器官均出現(xiàn)出血情況。根據(jù)不同程度可分為5種類型。第一種為超急性型。雖然感染后未見明顯表現(xiàn),病程極短。第二種為急性型,會有4~6 d的潛伏期。然后體溫升高(40.5~42℃)、厭食、精神萎頓、脈搏呼吸加快、白細(xì)胞減少和血小板在2~3 d內(nèi)迅速減少,皮膚部位泛紅的癥狀,同時出現(xiàn)嘔吐、腹瀉和流產(chǎn)狀況,病死亡率達(dá)100%。第三種為亞急性型。此類型主要表現(xiàn)接近于急性型,但是它的潛伏期更長,通常為6~12 d左右。呼吸道系統(tǒng)感染和身體部位泛紅,同時伴有高燒、食欲銳減、精神不振等癥狀。第四種為慢性型。此類感染后發(fā)病會比較緩慢,體溫發(fā)熱也只是短暫的,但出現(xiàn)發(fā)育緩慢、體溫升高,慢性皮膚潰瘍和關(guān)節(jié)腫脹,體型不斷變小,同時懷孕母豬存在流產(chǎn)風(fēng)險。第五種為亞臨床型。這種并沒有很明顯的病變出現(xiàn),但是會出現(xiàn)食欲不振和低燒的狀況,是可以治療的,但治療后體內(nèi)仍有具傳染性的病毒,所以實(shí)際生產(chǎn)中,最優(yōu)的處理方式為一旦發(fā)現(xiàn)病豬,馬上實(shí)施無害化操作[16-19]。
當(dāng)前在測定ASF方面,常用到以下2類技術(shù):PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))試驗(yàn)、ELISA(酶聯(lián)反應(yīng)吸附試驗(yàn)),其主要原理為在構(gòu)成ASF病毒的蛋白體中可水解具有高免疫原性的小分子蛋白,其與ASFV 結(jié)構(gòu)蛋白重組融合能夠誘導(dǎo)中和抗體的產(chǎn)生,從而判定是否陽性,最早可在8 d即可檢測出陽性豬。樣品的采集主要包括口鼻拭子、全血、血清、器官組織樣品、環(huán)境樣品等,ASF在國家明確的烈性A類傳染病目錄內(nèi),嚴(yán)禁解剖,故器官組織樣品采集不可取[20]。樣品采集過程中注意人員接觸和送檢過程中的安全把控,避免二次污染。
相關(guān)研究證實(shí),ASFV對低溫具耐受性,但對高溫?zé)o耐受性,在低溫情況下活力更強(qiáng),以凍結(jié)肉為例,ASFV可實(shí)現(xiàn)超過1 000 d的存活期、已污染豬圈內(nèi)的病毒存活期可達(dá)30 d。肉制食品內(nèi)ASFV同樣呈較為穩(wěn)定的活性表現(xiàn),半熟肉,還有部分其他肉制品內(nèi),存活期為若干月,更長則為若干年[21]。由于其可長期存活于外部環(huán)境中,由此更加增加了發(fā)生疫情后復(fù)養(yǎng)的難度,現(xiàn)今我國生豬存欄量有所下降,此為其病毒活力直接影響的結(jié)果[22]。雖然在低溫環(huán)境、肉制品中非洲豬瘟病毒難以把控,但其劣勢為,對高溫不耐受,同時高度敏感于強(qiáng)堿、強(qiáng)酸等物質(zhì)。試驗(yàn)表明,于56 ℃溫度下對ASF病毒實(shí)施70 min干預(yù),其馬上失活,在溫度上調(diào)到60 ℃時,其喪失活性所需的時間僅為30 min[23]。
對于脂溶劑(諸如氯仿、乙醚等),ASF病毒呈敏感表現(xiàn),對于蛋白酶刺激,完整病毒粒子具抵抗能力,然而在胰蛋白酶作用下容易喪失活性[24]。在石碳酸(0.5%)與甘油(50%)混合液內(nèi),病毒在室溫中可達(dá)536 d的保存期。通過福爾馬林(1%)作用6 d,或者通過氫氧化鈉(2%)作用1 d,血內(nèi)病毒會喪失活性(見表1)。在消毒種類上,以預(yù)防消毒、終末消毒、臨時消毒為主,預(yù)防消毒為未發(fā)生傳染病時的防御性消毒,根據(jù)實(shí)際情況一周幾次到一月幾次不等,需要注意的是在豬場進(jìn)行預(yù)防性消毒時要注意消毒劑濃度的把控,避免對豬呼吸道的刺激,以及頻繁消毒對豬應(yīng)激反應(yīng)的增加。臨時消毒是在發(fā)生疫情時的必要性消毒,防止病毒擴(kuò)散。終末消毒是指疫情后、發(fā)病豬全部處理后的消毒,消毒的徹底性直接影響復(fù)養(yǎng)成功率[25]。
表1 常用消毒劑分類及應(yīng)用
由于ASF至今無商品化疫苗及有效治療藥物可用,防控最關(guān)鍵的方面是增強(qiáng)生物安全,把ASF拒之門外[26]。具體可從以下幾方面入手:1)豬場外圍防控。 對豬場環(huán)境分級管理,建立對應(yīng)的屏障,在屏障和豬場之間可設(shè)置緩沖區(qū),對緩沖區(qū)嚴(yán)格把關(guān)做好消毒工作,防止病毒進(jìn)入豬場。2)豬場內(nèi)部防控。①封閉管理、單項(xiàng)流動防止交叉污染。②豬場內(nèi)部合理布局,單元格化,設(shè)立防疫屏障,一旦察覺問題,第一時間將潛在傳播途徑切斷。消滅場內(nèi)可能傳播媒介,定期消除場內(nèi)雜草、蚊蠅、蜱蟲、鼠等,有條件豬場設(shè)置防護(hù)網(wǎng)。③選擇強(qiáng)效消毒劑,建立科學(xué)的消毒步驟,建立洗消中心。對于生物安全而言,其最關(guān)鍵的構(gòu)成為消毒,任何進(jìn)入豬場的物品與人員,皆一定要接受規(guī)范消毒,對于各分區(qū),應(yīng)實(shí)施相應(yīng)的消毒操作,防止過度消毒。④疫苗合理使用[27]。3)應(yīng)急預(yù)案與防控理念。①建立場內(nèi)應(yīng)急預(yù)案,場內(nèi)獸醫(yī)及時監(jiān)測包括ASF在內(nèi)的各種疫病,一旦發(fā)現(xiàn)疑似ASF感染豬只可按照應(yīng)急預(yù)案隔離病豬,防止疫病擴(kuò)散,按照相關(guān)規(guī)定進(jìn)行處置[28]。②進(jìn)行防控體系與理念的重塑。豬場生物安全的實(shí)施在于員工,強(qiáng)化員工生物安全意識與執(zhí)行力對于防控ASF至關(guān)重要。讓員工樹立和豬場一起抵抗ASF的信念,建立相應(yīng)的獎懲制度、監(jiān)督制度、隔離封鎖制度、定期培訓(xùn)考核制度,確保各項(xiàng)生物安全措施的規(guī)范執(zhí)行,才能夠?qū)崿F(xiàn)對ASF的有效防控[29]。