VEGF 和突變型p53 在胃癌組織中的表達(dá)及臨床診斷價(jià)值

陳寧

我國(guó)是胃癌高發(fā)國(guó)家,胃癌發(fā)病率約為國(guó)外的3倍。2013 年全世界的胃癌新發(fā)數(shù)目為95.2 萬,而中國(guó)就有44.7 萬。胃癌的預(yù)后差,死亡率居全部惡性腫瘤的第2 位,而其中的原因與胃癌早期檢出率低有很大關(guān)系,很多患者確診時(shí)都已進(jìn)入中晚期。據(jù)報(bào)道,我國(guó)早期胃癌的檢出率僅徘徊在10%［1］。目前尋找有效的胃癌標(biāo)志物是幫助人們?cè)缙诎l(fā)現(xiàn)胃癌的重要策略。VEGF 是目前所發(fā)現(xiàn)的促血管生成功能最強(qiáng)的因子,對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移具有重要作用。近年研究表明,p53 缺失或突變可誘發(fā)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化,具有致癌性,mtp53在很多惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演了重要角色［2］。本研結(jié)果旨在探討VEGF 和mtp53 在胃癌組織中的表達(dá)情況及臨床診斷價(jià)值,報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017 年6 月～2018 年12 月本院37 份胃癌組織標(biāo)本與30 份正常胃組織標(biāo)本,胃癌患者均經(jīng)手術(shù)治療、病理檢查證實(shí)。胃癌患者術(shù)前均未接受過放、化療及免疫治療。所有標(biāo)本一經(jīng)離體,即經(jīng)福爾馬林固定,并包埋入石蠟,4 μm 連續(xù)切片,備用。

1.2 方法 采用免疫組化SP 法檢測(cè)標(biāo)本中VEGF 和mtp53 表達(dá)情況,檢測(cè)試劑盒及試劑包括SP 試劑盒(福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司)、兔抗人VEGF 單克隆抗體(Poteintech Group)、鼠抗人mtp53 單克隆抗體(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)。操作按試劑盒說明進(jìn)行,包括脫蠟、水化,高壓抗原修復(fù),3% H2O2孵育,山羊血清封閉,滴加一抗室溫孵育1 h,二抗室溫孵育0.5 h,二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色,蘇木素復(fù)染,鹽酸乙醇分化,脫水、二甲苯透明、封片等操作。結(jié)果判定：由兩位觀察者采用雙盲法對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定,顯微鏡400 倍視野下,20 個(gè)視野,VEGF 為細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜染色,表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)為細(xì)胞核染色,計(jì)數(shù)500～1000 個(gè)細(xì)胞中的陽性細(xì)胞,陽性細(xì)胞數(shù)所占的比例為0～5%為(-),占6%～25%為(+),占26%～50%為(++),＞50%為(+++)。

1.3 觀察指標(biāo) 記錄受試胃癌組織標(biāo)本與正常胃組織標(biāo)本的VEGF 和mtp53 表達(dá)陽性情況及VEGF、mtp53在低分化、中高分化胃癌,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,胃癌浸潤(rùn)漿膜及以外、浸潤(rùn)未及漿膜中的表達(dá)陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 VEGF和mtp53在不同胃組織中的表達(dá)比較 VEGF和mtp53 在胃癌組織的表達(dá)陽性率均高于正常組織,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 VEGF 和mtp53 在不同胃組織中的表達(dá)比較 ［n(%)］

2.2 VEGF 和mtp53 在胃癌不同臨床病理特征中的表達(dá)比較 VEGF 在浸潤(rùn)未及漿膜、浸潤(rùn)漿膜及以外中的表達(dá)陽性率分別為50.0%(8/16)、52.4%(11/21),在中高分化、低分化中的表達(dá)陽性率分別為34.5%(10/29)、75.0%(6/8),在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)陽性率分別為76.5%(13/17)、40.0%(8/20),VEGF 在低分化胃癌中的表達(dá)陽性率高于中高分化胃癌,在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.194、4.980,P=0.041、0.026＜0.05)。mtp53 在浸潤(rùn)未及漿膜、浸潤(rùn)漿膜及以外中的表達(dá)陽性率分別為37.5%(6/16)、76.2%(16/21),在中高分化、低分化中的表達(dá)陽性率分別為62.1%(18/29)、50.0%(4/8),在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)陽性率分別為82.4%(14/17)、45.0%(9/20),mtp53 在胃癌浸潤(rùn)漿膜及以外中的表達(dá)陽性率高于胃癌浸潤(rùn)未及漿膜,在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.639、5.451,P=0.018、0.020＜0.05)。

3 討論

胃癌是一種基因病,在正常胃黏膜→腸上皮化生→胃腸黏膜不典型增生→胃癌的這個(gè)過程中,都存在著多種致癌基因與抑癌基因的特征性的表達(dá)差異。結(jié)合臨床工作發(fā)現(xiàn),胃癌患病率一直呈遞增發(fā)病趨勢(shì),疾病發(fā)生與生活環(huán)境、幽門螺桿菌感染、遺傳、基因等因素有關(guān),且患病人群集中在＞40 歲人群,患者有上腹疼痛不適、食欲下降、消瘦等常見癥狀表現(xiàn)。近些年,分子生物學(xué)研究技術(shù)的不斷發(fā)展使更多的胃癌相關(guān)基因及其蛋白質(zhì)產(chǎn)物得以被發(fā)現(xiàn),在胃癌的早期診治與評(píng)估預(yù)后方面顯示出了廣闊的前景［3］。

胃癌細(xì)胞可通過自分泌與旁分泌產(chǎn)生多種生長(zhǎng)因子,VEGF 是一種能夠引起血管生長(zhǎng)特異分裂的誘導(dǎo)因子,能夠強(qiáng)效促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂,使更多的新生血管生成,同時(shí)還能夠通過調(diào)節(jié)血管與淋巴管生成改變血管的通透性,從而為腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、侵襲及轉(zhuǎn)移提供有力條件。既往研究表明,VEGF 在胃癌組織中的陽性率顯著提高［4］,本研究亦再次顯示,VEGF 在胃癌組織的表達(dá)陽性率分別為51.4%,明顯高于正常組織的6.7%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與既往研究相符［5］。VEGF 與胃癌的惡性程度呈正相關(guān),本研究結(jié)果顯示,VEGF 在低分化胃癌與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)陽性率明顯高于中高分化胃癌和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。也證明VEGF 的表達(dá)與胃癌的生物學(xué)行為相關(guān),能夠一定程度上預(yù)測(cè)胃癌的惡性程度。

p53 基因位于 17 號(hào)染色體短臂,包括具有抑癌效應(yīng)的野生型p53 和具有致癌效應(yīng)的mtp53。野生型p53可干擾腫瘤DNA 復(fù)制,而mtp53 喪失了修復(fù)細(xì)胞的功能,可促進(jìn)細(xì)胞惡向轉(zhuǎn)變。既往研究表明,即使在腸上皮化生和胃腸黏膜不典型增生中也能檢出mtp53,提示mtp53 的表達(dá)先于胃癌的發(fā)生。mtp53 的表達(dá)上調(diào)可存在于胃癌各臨床分期中［6］。本研究結(jié)果顯示,mtp53在胃癌組織的表達(dá)陽性率明顯高于正常組織。研究表明,mtp53 與腫瘤大小、浸潤(rùn)深度及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［7］。但是也有研究表明,mtp53 與胃癌的臨床病理特征無顯著關(guān)系［8］。本研究結(jié)果顯示,mtp53 在胃癌浸潤(rùn)漿膜及以外與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)陽性率明顯高于胃癌浸潤(rùn)未及漿膜和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示mtp53 對(duì)胃癌的診斷有價(jià)值,并有助于預(yù)測(cè)胃癌的惡性程度。

綜上所述,VEGF和mtp53在胃癌組織呈過度表達(dá),且與胃癌的臨床病理特征有一定的相關(guān)性,對(duì)胃癌具有輔助診斷價(jià)值。