張佩，秦梁智，鄒雪，柴方秀

（1.安順職業(yè)技術(shù)學(xué)院，貴州安順 561000；2.中國貴航集團(tuán)三〇二醫(yī)院，貴州安順561000）

臨床對感染性疾病進(jìn)行治療期間，確診致病菌尤為重要。其中，病原微生物檢驗(yàn)是十分科學(xué)且高效的方式，可以根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果選取具有敏感性的抗生素對患者實(shí)施治療，這對促進(jìn)患者盡早恢復(fù)至關(guān)重要[1]。但是，在進(jìn)行具體檢驗(yàn)期間，檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度、精密度影響因素較多。因此，對不同的標(biāo)本進(jìn)行病原微生物檢驗(yàn)，對其結(jié)果進(jìn)行對比分析，對臨床中感染性疾病的治療可以給予更多的參照[2]。本研究特選取貴航集團(tuán)三〇二醫(yī)院2018—2019 年的14 442 份標(biāo)本，探究不同臨床標(biāo)本微生物檢驗(yàn)的總陽性率結(jié)果。

1 一般資料及方法

1.1 一般資料

選擇貴航集團(tuán)三〇二醫(yī)院于2018—2019 年微生物室的14 442 份標(biāo)本，應(yīng)用回顧性的方式，對2018年（n=6 571）、2019 年（n=7 871）的全部標(biāo)本均實(shí)施微生物檢驗(yàn)。

1.2 方式

1.2.1 痰液標(biāo)本

以早晨第一口痰為宜；做細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)以上午9:00—10:00 時(shí)留痰液為好；濃縮法找結(jié)核桿菌時(shí)，則應(yīng)留取24 h 痰液。留取痰液標(biāo)本時(shí)，先用清水嗽口，用力咳出氣管深處的痰液，注意切勿混入鼻咽分泌物。細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)時(shí)應(yīng)無菌采集痰標(biāo)本后用無菌容器收集立即送檢。

1.2.2 靜脈全血標(biāo)本

在采集血液時(shí)，成人采血量為5 ～10 mL，嬰幼兒采血量為1 ～5 mL。采血后立即在床旁接種培養(yǎng)瓶，并迅速輕搖，充分混勻防止凝固，避免過度振蕩發(fā)生溶血。對已經(jīng)使用抗菌藥物且又不能停藥的患者，應(yīng)在下次用藥前采血；切忌在輸注抗菌藥物的靜脈處采取血液標(biāo)本；不能從靜脈導(dǎo)管及動脈插管中取血。每例患者至少采集兩次血標(biāo)本進(jìn)行檢測，間隔0.5 ～1.0 h，有利于提高檢測的準(zhǔn)確度以及區(qū)分致病菌與污染菌。檢驗(yàn)過程簡單概括為：明確采血部位，無菌采血后，標(biāo)注采血時(shí)間，立即送檢。

1.2.3 分泌物標(biāo)本

由于感染部位不同，細(xì)菌種類也不盡相同，要應(yīng)用滅菌棉拭子采集多個(gè)部位送檢。懷疑是厭氧菌感染時(shí)，應(yīng)用專用棉棒或是玻璃棒觸及深部分泌液；可以用注射器抽吸，排去針管內(nèi)的空氣，并將針頭插入滅菌橡膠塞內(nèi)送檢。

1.2.4 中段尿標(biāo)本

先用肥皂水清洗尿道口，或是0.1%的碘伏溶液消毒尿道口，棄去前段尿，不終止排尿，留取中段尿10 mL 于滅菌容器內(nèi)。尿液標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳，尿液中不得加入防腐劑、消毒劑，否則會導(dǎo)致假陰性結(jié)果出現(xiàn)。采集標(biāo)本后，應(yīng)立即送檢，以提高檢出率。

1.2.5 糞便標(biāo)本

選取膿血、黏液糞便2 ～3 g，液體糞便取絮狀物1 ～2 mL。盛于滅菌瓶中或蠟紙盒中及時(shí)送檢。

1.3 觀察指標(biāo)

記錄下各項(xiàng)微生物檢驗(yàn)的總陽性率，主要包括了痰液標(biāo)本、靜脈全血標(biāo)本、分泌物標(biāo)本、中段尿標(biāo)本、糞便標(biāo)本。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

通過SPSS 20.0 對數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料以%表示，用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果與分析

2018 年與2019 年微生物檢驗(yàn)的總陽性率見表1。如表1 所示，對于痰液標(biāo)本、靜脈全血標(biāo)本、分泌物標(biāo)本、中段尿標(biāo)本、糞便標(biāo)本的總陽性率，2018 年依次 是29.46%、14.39%、22.93%、30.33%、22.84%，2019 年依次是35.49%、12.63%、30.50%、31.61%、34.00%，2019 年較2018 年顯著增加（P＜0.05）。

表1 2018 年與2019 年微生物檢驗(yàn)的總陽性率

在臨床感染性疾病診斷和治療中，微生物檢驗(yàn)是十分關(guān)鍵的檢驗(yàn)手段之一，它能給疾病的各項(xiàng)治療給予更多的參照[3]。而臨床中對不同時(shí)間段、不同標(biāo)本微生物檢驗(yàn)的總陽性率實(shí)施研究與分析，并確定有關(guān)的影響因素，能夠促進(jìn)各檢驗(yàn)工作更為順利的實(shí)施，以提升最終結(jié)果的準(zhǔn)確率。

但是，對于微生物的總檢出率及準(zhǔn)確度而言，兩者會出現(xiàn)不一致的情況，這是因?yàn)樵谶M(jìn)行檢驗(yàn)期間影響因素較多，所以臨床中需要重點(diǎn)關(guān)注檢驗(yàn)前、檢驗(yàn)中、檢驗(yàn)后的質(zhì)量控制。（1）在檢驗(yàn)前，需要更為規(guī)范地對各類標(biāo)本進(jìn)行采集。絕大多數(shù)微生物檢驗(yàn)結(jié)果與臨床疾病不符，主要是檢驗(yàn)前操作不規(guī)范引發(fā)的，主要包括檢驗(yàn)申請、患者準(zhǔn)備、標(biāo)本運(yùn)送等方面。其中，對標(biāo)本進(jìn)行儲存、運(yùn)送，需要嚴(yán)格遵照維持微生物活性的原則[4]。對于各類標(biāo)本而言，需要運(yùn)用不同的收集、運(yùn)送方式。例如，對于厭氧菌感染的患者，標(biāo)本需要借助十分特殊的方式進(jìn)行儲存、運(yùn)送。在采集結(jié)束后，防止其與空氣接觸，立即送檢，否則厭氧菌會接觸氧氣死亡，進(jìn)而出現(xiàn)假陰性結(jié)果，導(dǎo)致漏診或誤診發(fā)生[5]。另外，標(biāo)本運(yùn)送人員的專業(yè)知識薄弱，對標(biāo)本儲存、標(biāo)本運(yùn)送的條件掌握不足，同樣會影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。因此要加強(qiáng)專業(yè)指導(dǎo)和培訓(xùn)，保障采集的標(biāo)本能夠達(dá)標(biāo)。此外，科室中的護(hù)理人員和患者是否按照規(guī)范的標(biāo)準(zhǔn)采集標(biāo)本，同樣影響到病原微生物檢測的準(zhǔn)確度[6]?；颊咦孕胁杉臉?biāo)本，如常見的中段尿液和大便標(biāo)本。若護(hù)理人員沒有對患者就采集有關(guān)的內(nèi)容進(jìn)行指導(dǎo)、培訓(xùn)，或是患者沒有掌握規(guī)范采集方法，就可能使得檢驗(yàn)前標(biāo)本的采集出現(xiàn)質(zhì)量不合格的情況[7]。（2）在檢驗(yàn)中，檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程進(jìn)行操作，并檢查檢驗(yàn)過程中使用的試劑批次和儀器狀態(tài)。對于痰液標(biāo)本而言，檢驗(yàn)工作者需要用棉簽及接種環(huán)接種；對于尿液標(biāo)本而言，若需要對標(biāo)本進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，在行膀胱穿刺采集的尿液標(biāo)本培養(yǎng)時(shí)，盡可能不要讓尿液標(biāo)本與空氣接觸；血液培養(yǎng)檢驗(yàn)是膿毒血癥、敗血癥診斷和治療十分關(guān)鍵的參考指標(biāo)，因此對靜脈全血實(shí)施培養(yǎng)需要采集雙瓶與雙套，以提高結(jié)果的準(zhǔn)確度。（3）在檢驗(yàn)后，應(yīng)該更多關(guān)注3 個(gè)方面：①加強(qiáng)與臨床醫(yī)生的溝通，分析檢驗(yàn)結(jié)果與臨床疾病的吻合度，考慮標(biāo)本采集方法與采集時(shí)間對結(jié)果的影響；②探討假陰性、假陽性的產(chǎn)生原因；③總結(jié)知識，強(qiáng)調(diào)溝通和經(jīng)驗(yàn)積累，通過不斷的學(xué)習(xí)和總結(jié)來提升專業(yè)技能。因?yàn)樵跈z驗(yàn)后需要對結(jié)果進(jìn)行分析、研究，而微生物檢驗(yàn)大多都是鑒于形態(tài)學(xué)、生理學(xué)等基礎(chǔ)上，故要求檢驗(yàn)人員具備更為扎實(shí)的專業(yè)技能功底[8]。在規(guī)范化檢驗(yàn)后操作規(guī)程中，主要包括了質(zhì)控菌株、生化試劑、藥敏試驗(yàn)等有關(guān)的質(zhì)控、檢測方法[10]。對檢驗(yàn)人員來說，應(yīng)具備定性試驗(yàn)操作、主觀分析與評判等有關(guān)的能力，所以要求檢驗(yàn)人員自身的專業(yè)知識和技能水平扎實(shí)，操作者的技能水平對最終的檢驗(yàn)結(jié)果會有許多影響[9]。為此，臨床中需要關(guān)注檢驗(yàn)人員自身的業(yè)務(wù)素養(yǎng)，并構(gòu)建更為健全的檢驗(yàn)質(zhì)控系統(tǒng)。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參照實(shí)際條件，制訂規(guī)范化的檢驗(yàn)前、檢驗(yàn)中和檢驗(yàn)后操作規(guī)程，制定實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員的操作標(biāo)準(zhǔn)，指導(dǎo)大家嚴(yán)格參照各項(xiàng)規(guī)程來實(shí)施檢驗(yàn)中的各項(xiàng)操作。同時(shí)，檢驗(yàn)人員需要不斷強(qiáng)化和完善專業(yè)知識，掌握人機(jī)體中各類正常菌群有關(guān)的知識、指標(biāo)和范圍等，并掌握正常菌群所引發(fā)的各類內(nèi)源性感染，以提升檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度。

3 結(jié)論

臨床中對不同臨床標(biāo)本實(shí)施微生物檢驗(yàn)時(shí)，通過直接染色或培養(yǎng)鑒定，分析致病菌的存在，給臨床中各項(xiàng)診斷、治療給予相應(yīng)的參照。為了防止對不同臨床標(biāo)本微生物實(shí)施檢驗(yàn)時(shí)所得到的結(jié)果間具有差異，檢驗(yàn)人員需要更為嚴(yán)格地遵照各項(xiàng)規(guī)范。