李善魁, 孟煥文， 李宇晨， 張海青， 白 雪， 張宇寬， 周洪友， 王千軍， 張笑宇*

(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學園藝與植物保護學院， 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010019； 2.烏蘭察布市農(nóng)牧業(yè)科學研究院， 內(nèi)蒙古 集寧 012000)

草害對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)影響較大，需要進行合理防控，相較于傳統(tǒng)人工和機械除草，化學除草更簡單高效[1]，但化學除草劑使用不當易使雜草產(chǎn)生抗性，并在環(huán)境中殘留，威脅食品安全[2-3]。有的植物存在化感作用，向環(huán)境中釋放化感物質(zhì)影響附近其他植物的生理生化代謝和生長[4]?；形镔|(zhì)是植物次生代謝產(chǎn)物或殘體降解過程中產(chǎn)生的物質(zhì)，沒有類似農(nóng)藥的殘留毒性[3]，主要是酚類化合物及其衍生物、萜類化合物及生物堿類等[5-6]。植物化感作用在生態(tài)學[7]、園林[8]、農(nóng)業(yè)[9]領域均有報道。目前，有利用植物化感作用進行雜草防除的相關報道[10-12]，也有利用植物殘體進行抑草的相關研究[13]。利用植物間的化感作用，進行合理輪作和間套作可抑制雜草的發(fā)生和危害，安全不污染環(huán)境，有助于減少化學除草劑的使用[14]。另外，化感作用物質(zhì)可以被用作研制和開發(fā)新除草劑類型，在農(nóng)田除草領域具有廣闊的研究和應用潛力。

圓柏(Sabinachinensis)又稱檜柏，為柏科圓柏屬常綠喬木或灌木，多分布于北半球，在我國分布較廣，多以景觀美化及庭園觀賞為主[15]。據(jù)觀察，圓柏樹下雜草生長較少，尤其是禾本科雜草。有報道表明柏樹在演替過程中將逐漸成為單一種群[16]，柏樹下草坪草生長不良，有逐年退化的現(xiàn)象[17]；也有報道表明圓柏葉片水提液對草坪草萌發(fā)及生長有一定抑制作用[18]，圓柏果實、果皮水浸提液對蘿卜(Raphanussativus)、白菜(Brassicacampestris)種子的萌發(fā)、株高和根長生長均有顯著的抑制作用[19]，但未見有圓柏對農(nóng)田雜草及作物化感作用的報道。因此，本試驗首先利用圓柏葉片水浸提液，采取培養(yǎng)皿濾紙法對5種對農(nóng)田危害較重的雜草進行化感作用研究，同時利用圓柏葉片、樹枝、樹皮粉末和浸提液噴施葉片的處理方式，利用室外盆栽法研究其中的化感物質(zhì)對農(nóng)田表層土中含有的雜草種子萌發(fā)和幼苗生長的影響效果，還利用培養(yǎng)皿濾紙法試驗了圓柏葉片水浸提液對4種作物的安全性，旨在探討圓柏化感作用對農(nóng)田雜草的影響及對作物的安全性，試圖利用圓柏浸提物進行農(nóng)田除草，為農(nóng)田除草提供理論基礎和新型應用技術。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料：圓柏葉片、樹枝和樹皮，采集于內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學東區(qū)，所選圓柏樹干直徑均>20 cm，葉片及樹枝均取自兩年生以上枝葉，樹皮均為最外層周皮。取樣時，需避開刷有涂白劑的植株，并在校園內(nèi)多點采集混勻。

供試雜草種子：地膚(Kochiascoparia)、稗草(Echinochloacrusgalli)、藜(Chenopodiumalbum)、反枝莧(Amaranthusretroflexus)、馬齒莧(Portulacaoleracea)種子，于2018年10月在內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學農(nóng)場采集，采集后及時在通風處晾曬至干燥，放入種子瓶內(nèi)密封，室溫保存。

供試作物種子：向日葵(Helianthusannuus)、燕麥(Avenasativa)、油菜(Brassicacampestris)、蕎麥(Fagopyrumesculentum)種子，2019年收獲的成熟種子，室溫保存，試驗前兩周預先檢測種子的萌發(fā)活力。

1.2 試驗方法

1.2.1圓柏粉末和浸提液的制備 粉末的制備：采集的新鮮圓柏葉片、樹枝和樹皮及時用蒸餾水沖洗表面塵土，然后避光風干7～8 d，待完全干燥后打成粉末，裝入密封袋，于25℃室溫下保存?zhèn)溆谩?/p>

浸提液的制備：取新鮮圓柏葉片、樹枝和樹皮各300 g，剪成2～3 cm小段，分別放入1 500 mL錐形瓶中，各加入1 000 mL滅菌蒸餾水，在25℃恒溫條件下靜置72 h，然后用網(wǎng)孔直徑0.3 mm的4層紗布過濾，靜置沉淀后，再用同規(guī)格的4層紗布過濾1次，所得濾液為浸提液，將浸提液用滅菌蒸餾水稀釋1.5倍、3.0倍及12倍，裝入三角瓶，置于5℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2室內(nèi)生物活性測定 培養(yǎng)皿濾紙法。2019年5月17日，采集新鮮圓柏葉片，制備浸提液，稀釋1.5倍、3.0倍及12倍。培養(yǎng)皿底部放置2層無菌濾紙，分別加入不稀釋的及不同稀釋倍數(shù)的圓柏葉片浸提液3 mL，以加入等量蒸餾水為對照，輕輕按壓濾紙去除氣泡。選取飽滿成熟度一致的地膚、稗草、藜、反枝莧和馬齒莧種子，用5‰高錳酸鉀溶液浸泡30 min進行表面消毒，再用蒸餾水沖洗3次。然后，將各種子放入培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿放30 粒，設3次重復。置于25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)黑暗培養(yǎng)，培養(yǎng)第3 d補充2 mL浸提液或蒸餾水。培養(yǎng)3 d時調(diào)查種子萌發(fā)的個數(shù)用于計算發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)，培養(yǎng)7 d時測種子萌發(fā)個數(shù)、株高和根長，計算萌發(fā)率、并分別計算相應的化感效應指數(shù)(Response index，RI)，綜合化感指數(shù)(Synthetical effect of allelopathy，SE)。

萌發(fā)率=(第7 d萌發(fā)種子數(shù)/供試種子數(shù))×100%

發(fā)芽勢=(第3 d萌發(fā)種子數(shù)/供試種子數(shù))×100%

發(fā)芽指數(shù)= ∑(Gt/Dt)
化感效應指數(shù)(RI)[20]= 1-(C/T)，(T≥C)
或RI=(T/C)-1，(T綜合化感指數(shù)(SE)=(萌發(fā)率RI+發(fā)芽勢RI+
發(fā)芽指數(shù)RI+株高RI+根長RI)/5

其中：Gt為第t日的種子萌發(fā)數(shù)目，Dt是相應的發(fā)芽天數(shù)，發(fā)芽指數(shù)統(tǒng)計是利用前3 d數(shù)據(jù)進行計算；C為空白對照下各調(diào)查指標平均值，T為圓柏不同處理下各調(diào)查指標平均值。RI>0表示促進，RI<0表示抑制，RI絕對值大小表示化感物質(zhì)對植物化感作用的強度。綜合化感指數(shù)可以反映化感作用的強弱。

1.2.3圓柏盆栽抑草效果檢測 2019年5月30日，從內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學農(nóng)場取含有大量雜草種子的0～10 cm的表層土，將土過篩。取等量表層土放入直徑均為20 cm的花盆中。每盆分別加入圓柏葉片粉末20 g，以不加入圓柏葉片粉末為對照，將加入的葉片粉末和盆內(nèi)4～5 cm表層土混合均勻(1 500 g土壤+20 g粉末)，澆水500 mL，設5個重復，圓柏樹枝及樹皮粉末處理同上。花盆放在內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學農(nóng)場室外空地自然條件下，每3 d澆水200 mL，30 d調(diào)查雜草萌發(fā)率，計算相對萌發(fā)率和化感指數(shù)(RI)，化感指數(shù)計算方法同1.2.2。

相對萌發(fā)率=
(處理雜草萌發(fā)數(shù)/對照各重復萌發(fā)數(shù))×100%

按照上述操作方法將土裝入花盆，初始時不加入圓柏部位的粉末，放在相同的場地，用相同的方法管理，待盆內(nèi)雜草大部分萌發(fā)長至3葉期時，于晴天下午將稀釋1.5倍的圓柏葉片、樹枝和樹皮浸提液均勻噴施到雜草幼苗葉片正面，以所有葉面均勻附著霧滴，不聚成較大水滴為準，以噴水為對照，每個處理5次重復，30 d后調(diào)查雜草株高和根長，計算化感指數(shù)(RI)，計算方法同1.2.2。

2020年6月17日重復試驗1次。第2次盆栽土也取自于內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學農(nóng)場，與第1次取土地點間隔50 m，其他管理調(diào)查方法相同。

1.2.4圓柏對幾種作物安全性評價 2019年9月30日，取圓柏葉片制備浸提液，將浸提液用蒸餾水稀釋1.5倍、3.0倍、12倍，按照1.2.2的操作方法加入培養(yǎng)皿中，以加入等量滅菌蒸餾水為對照，分別將向日葵、燕麥、油菜、蕎麥種子放入培養(yǎng)皿中，每皿30粒，向日葵放10粒，設3次重復，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)黑暗培養(yǎng)，第3 d補充3 mL浸提液或蒸餾水，培養(yǎng)3 d時統(tǒng)計并計算發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)，7 d后計算萌發(fā)率，測量株高和根長，并分別計算化感效應指數(shù)和綜合化感指數(shù)，計算方法同1.2.2。

1.3 統(tǒng)計分析

采用Excel 2016進行數(shù)據(jù)處理及作圖，用SPSS 22.0進行單因素方差分析(One-way ANOVA)和新復極差法進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 圓柏葉片浸提液對5種雜草萌發(fā)及生長的影響

2.1.1圓柏葉片浸提液對5種雜草萌發(fā)的影響 由表1可知，圓柏葉片浸提液不同稀釋倍數(shù)下對5種雜草種子的萌發(fā)率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)均有抑制效果，浸提液稀釋倍數(shù)越小，抑制效果越好。不稀釋和稀釋1.5倍時，藜和反枝莧不萌發(fā)，其萌發(fā)率的RI均為-1.0，地膚萌發(fā)率的RI為-0.98和-0.97，馬齒莧萌發(fā)率的RI為-0.90和-0.79，圓柏葉片浸提液不稀釋和稀釋1.5倍時對稗草萌發(fā)率抑制效果較差。稀釋3.0倍時，浸提液對反枝莧、藜和地膚的萌發(fā)率的RI均小于-0.80，對馬齒莧和稗草萌發(fā)率的抑制效果較差，萌發(fā)率RI分別為-0.20，-0.23。浸提液稀釋12倍時，對反枝莧萌發(fā)率的RI為-0.79，對其他雜草萌發(fā)率的抑制效果較差。

表1 圓柏葉片水浸提液對5種雜草種子萌發(fā)的影響Table 1 Effects of leaf extracts of S. chinensis on seed germination of five weeds

2.1.2圓柏葉片浸提液對5種雜草生長的影響 由表2可知，圓柏葉片浸提液對5種雜草的株高及根長的生長均有抑制作用。不稀釋和稀釋1.5倍時，對藜和反枝莧的株高和根長RI均為-1.0。葉片浸提液不稀釋時對地膚的株高和根長RI為-0.99和-0.98，對馬齒莧和稗草的株高生長抑制較差，但對其根長生長的抑制效果較好，對稗草根長的RI小于-0.90，對馬齒莧根長的RI為-1.0。浸提液稀釋3倍時，顯著抑制地膚和反枝莧的株高和根長的生長，株高RI分別為-0.87，-0.99，對藜抑制效果較差，對稗草和馬齒莧沒有抑制作用。浸提液稀釋12倍時，對幾種雜草株高生長均沒有抑制作用，對根長生長的抑制作用也較差。

表2 圓柏葉片水浸提液對5種雜草幼苗生長的影響Table 2 Effects of leaf extracts of S. chinensis on seeding growth of five weeds

2.1.3圓柏葉片浸提液對5種雜草綜合化感效應 圓柏葉片浸提液對5種雜草均存在較強的化感抑制作用，化感抑制效果隨著圓柏葉片浸提液濃度的增加而逐漸加強。5種雜草中反枝莧最易受圓柏葉片浸提液的影響，比較5種雜草在各濃度下綜合化感系數(shù)可見，不同雜草對圓柏葉片水浸提液化感物質(zhì)的敏感性強弱順序為：反枝莧(-0.80)>地膚(-0.79)>藜(-0.75)>稗草(-0.38)>馬齒莧(-0.36)；設置的4種不同濃度下，不稀釋的影響效果最好，影響效果隨著稀釋倍數(shù)的增加逐漸降低，比較圓柏浸提液濃度對各雜草綜合化感系數(shù)可見，不同稀釋倍數(shù)對雜草影響的強弱順序為：不稀釋(-0.89)>稀釋1.5倍(-0.79)>稀釋3倍(-0.53)>稀釋12倍(-0.24)。在圓柏葉片浸提液稀釋倍數(shù)為1.5倍時對地膚、藜和反枝莧萌發(fā)率抑制效果最佳，不稀釋的浸提液對稗草和馬齒莧抑制效果最好。

圖1 圓柏葉片浸提液對5種雜草綜合化感效應Fig.1 Synthetical allelopathy effect of leaf extract of S. chiensis on five weeds

2.2 圓柏盆栽抑草效果

2.2.1圓柏對雜草萌發(fā)的影響 2019年5月試驗結果見表3，圓柏葉片、樹枝、樹皮粉末處理下對土壤中幾種雜草種子的萌發(fā)均有顯著的抑制作用。圓柏葉片粉末對稗草、藜、反枝莧和馬齒莧萌發(fā)抑制效果較好，萌發(fā)率的RI分別為-0.90，-0.95，-0.96，-0.95；圓柏樹皮抑制效果較差，萌發(fā)率的RI分別為-0.26，-0.82，-0.85和-0.69；樹枝抑制效果最差，萌發(fā)率的RI分別為-0.10，-0.64，-0.44和-0.53(圖2-a)。比較圓柏不同部位綜合化感系數(shù)可知，圓柏不同部位化感作用的強弱順序為：葉片(-0.94)>樹皮(-0.66)>樹枝(-0.43)。

表3 不同部位圓柏處理對農(nóng)田雜草萌發(fā)的影響(2019年5月)Table 3 Effects of different parts of S. chinensis on the germination of weeds in farmland in May 2019

2020年6月試驗結果見表4，圓柏不同部位對雜草萌發(fā)的抑制效果顯著。圓柏葉片對雜草萌發(fā)抑制效果最佳，對稗草、地膚、馬齒莧萌發(fā)率的RI為-0.89，-0.93和-1.0；其次是樹皮，抑制效果較好，對稗草、地膚、馬齒莧萌發(fā)率的RI為-0.75，-0.67，-0.89；樹枝抑制效果稍差，對稗草、地膚、馬齒莧萌發(fā)率的RI分別為-0.61，-0.65和-0.78。圓柏不同部位化感作用強度不同，其中葉片的抑制效果最好，樹皮的其次，樹枝的最差。

表4 不同部位圓柏粉末對農(nóng)田雜草萌發(fā)的影響(2020年6月)Table 4 Effects of different parts of S. chinensis powder on the germination of weeds in farmland in June 2020

兩年試驗結果一致，圓柏不同部位對稗草、藜、反枝莧、馬齒莧和地膚種子萌發(fā)均具有較好的抑制效果，圓柏不同部位化感作用強弱均表現(xiàn)為：葉片>樹皮>樹枝。

2.2.2圓柏對農(nóng)田主要雜草生長的影響 由表5和圖2可知，圓柏葉片粉末拌土對稗草和反枝莧的生長均具有較好的抑制作用，稗草株高的RI為-0.64，反枝莧整株的RI為-0.96，葉片浸提液噴施對兩種草生長的抑制效果較差，稗草株高的RI為-0.36，反枝莧整株的RI為-0.50；圓柏樹枝粉末拌土對稗草生長抑制效果較好，對稗草株高的RI為-0.63，反枝莧整株的RI為-0.53，樹枝浸提液噴施抑制效果較差，對反枝莧整株的RI僅為-0.07；樹皮粉末拌土和浸提液噴施處理對兩種草生長的抑制效果均較差。

表5 圓柏不同部位處理對雜草生長的影響(2019年5月)Table 5 Effects of different parts of S. chinensis on the seeding growth of weeds in May 2019

圖2 圓柏葉片粉末對農(nóng)田雜草生長的影響(2019年5月)Fig. 2 Effects of leaf powder of S. chinensis on weed growth in farmland in May 2019注：圖片均為圓柏葉片粉末每盆20 g(1 500 g土壤+20 g粉末)處理狀。a為處理第10 d(上為處理，下為對照)；b為處理第35 d(上為處理，下為對照)；c為對稗草的影響(左為對照，右為處理)；d為對反枝莧的影響(左為對照，右為處理)Note：All the pictures were treated with 20 g leaf powder of S. chinens (1 500 g soil+20 g powder) in each pot. a was taken at the 10th day(top for treatment,bottom for control);b was taken at the 35th day of the test (top for treatment,bottom for control);c is the effect on E. crusgalli ;d is the effect on A. retroflexus (left for control,right for treatment)

2.3 圓柏葉片浸提液對4種作物的化感作用

2.3.1圓柏葉片浸提液對4種作物萌發(fā)的影響 由表6可知，不同稀釋倍數(shù)的圓柏葉片浸提液對燕麥和向日葵種子的萌發(fā)率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)沒有顯著影響。圓柏葉片浸提液稀釋1.5倍時，對油菜種子的萌發(fā)率沒有影響，顯著降低油菜的發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)(P<0.05)，發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)RI分別為-0.20和-0.72，其他稀釋倍數(shù)浸提液不影響油菜種子萌發(fā)。稀釋1.5倍的浸提液均降低了蕎麥的萌發(fā)率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)，萌發(fā)率的RI為-0.46，其他稀釋倍數(shù)浸提液不影響蕎麥種子萌發(fā)。

表6 圓柏葉片浸提液對4種作物萌發(fā)的影響Table 6 Effects of leaf extracts of S. chinensis on seed germination of four crops

2.3.2圓柏葉片浸提液對4種作物生長的影響 由表7可知，圓柏葉片各濃度浸提液處理對油菜株高及根長的生長均有促進作用，1.5倍、3倍和12倍浸提液株高RI分別為0.37，0.34和0.31，根長RI分別為0.42，0.50和0.38。稀釋1.5倍的浸提液抑制燕麥株高和根長的RI分別為-0.63和-0.50，其他稀釋度浸提液不影響燕麥生長。稀釋12倍的浸提液抑制向日葵株高生長，其RI為-0.50，其他稀釋度浸提液不影響向日葵生長。圓柏葉片各濃度浸提液對蕎麥株高及根長生長均無顯著影響。

表7 圓柏葉片浸提液對4種作物生長的影響Table 7 Effects of leaf extracts of S. chinensis on seeding growth of four crops

2.3.3圓柏葉片浸提液對4種作物綜合化感效應 分析綜合化感效應結果表明(圖3)，稀釋1.5倍的浸提液對4種作物均有不同程度的抑制作用，對蕎麥的抑制作用最強，其次是燕麥。稀釋3倍的浸提液抑制蕎麥的萌發(fā)和生長，促進向日葵和油菜的生長，對燕麥影響較小。稀釋12倍圓柏葉片浸提液對向日葵和蕎麥有抑制作用，對燕麥和油菜有促進作用。比較幾種作物各濃度綜合化感系數(shù)，對圓柏葉片化感物質(zhì)的敏感性強弱順序為：蕎麥(-0.18)>向日葵(-0.08)>燕麥(-0.04)>油菜(0.05)。

圖3 圓柏葉片浸提液對4種作物綜合化感效應Fig.3 Synthetical allelopathy effect of leaf extract of S. chiensis on four crops

3 討論

植物器官中普遍存在化感作用物質(zhì)，其主要通過莖葉揮發(fā)、雨水淋溶、植物殘株的腐解等方式釋放[21]。本試驗發(fā)現(xiàn)，圓柏的葉片、樹枝和樹皮對幾種雜草均有不同程度的化感抑制作用，且抑制效果與稀釋倍數(shù)呈反比。董沁等人[18]也報道，高濃度圓柏葉片水浸提液抑制受體種子的萌發(fā)與幼苗生長，在低濃度下抑制效果不明顯。本研究兩次室外盆栽試驗均表明圓柏不同部位化感作用強度不同，葉片抑制作用最強，大于樹皮和樹枝。王冬梅等人[22]也發(fā)現(xiàn)側柏根和枝浸提液對油松的化感效果不同?？赡苁怯捎谕环N植物不同部位所含的化感物質(zhì)種類或含量不同，具體原因還需進一步研究。

植物間化感作用強度受很多因素的影響[23]，如土壤理化性狀[24]、土壤微生物[25]等。在盆栽抑草試驗中，圓柏葉片粉末拌土處理對雜草抑制效果好于圓柏葉片浸提液葉面噴施。這一現(xiàn)象可能與如下原因有關：首先，圓柏葉片粉末中化感物質(zhì)的含量可能本身就較多；其次，葉片粉末在土壤中釋放出的化感物質(zhì)可能會受到土壤理化性狀的影響，有相關研究發(fā)現(xiàn)，化感物質(zhì)在土壤媒介中會發(fā)生轉(zhuǎn)化[26]，同時化感物質(zhì)活性也與微生物活動有關，有報道發(fā)現(xiàn)微生物可以代謝植物化感物質(zhì)，也可以釋放出新的有毒物質(zhì)[25，27]，進而對化感物質(zhì)的活性產(chǎn)生影響。具體原因還有待進一步研究。

試驗中，相同濃度圓柏葉片浸提液對雜草和作物的化感強度差異很大，主要原因可能是圓柏葉片取樣時間的不同化感物質(zhì)的種類和含量不同。用于檢測雜草抑制作用的圓柏葉片是2019年5月17日取樣，用于作物安全性檢測的是2019年9月30日取樣。有報道，沙打旺花果期和成熟期的水提液化感作用強度不同[28]。具體原因還需進一步試驗驗證。

在圓柏葉片水浸提液稀釋1.5倍時，對蕎麥種子萌發(fā)率有抑制作用，但對其株高和根長沒有影響，可考慮在蕎麥田將圓柏葉片水浸提液用于苗期除草使用。圓柏葉片水浸液對燕麥種子萌發(fā)率沒有影響，但對其株高和生長有抑制作用，可考慮燕麥播種時使用。浸提液稀釋1.5倍時對地膚、藜和反枝莧3種雜草有良好的抑制效果，而浸提液不稀釋時對稗草和馬齒莧的抑制效果最好，因此利用圓柏除草要依據(jù)作物及主要雜草種類，需合理選擇使用時期和濃度。

4 結論

圓柏葉片浸提液對反枝莧、地膚、藜、稗草和馬齒莧5種雜草萌發(fā)和生長具有顯著的化感抑制作用，化感強度由強到弱順序為：反枝莧>地膚>藜>稗草>馬齒莧。圓柏葉片、樹枝和樹皮對5種雜草種子萌發(fā)和對稗草和反枝莧株高均有較好的抑制作用，葉片化感強度大于樹皮和樹枝，葉片粉末拌土處理抑草效果好于浸提液葉面噴施。圓柏葉片浸提液稀釋1.5倍時，抑制蕎麥種子萌發(fā)，但不影響其株高及根生長；不影響燕麥種子萌發(fā)，但抑制其株高和根長；抑制油菜的發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)，不影響其種子萌發(fā)率，促進其株高及根長生長；不影響向日葵種子萌發(fā)和生長。圓柏具有良好的抑草活性，對作物影響較小。