王冬經(jīng)，馬弘財(cái)，蘇中華，石 斌，甘富斌，普布次仁，曾江勇*

（1.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院 畜牧獸醫(yī)研究所，西藏 拉薩 850000；2.西藏自治區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，西藏 拉薩 850000；3.林芝市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 畜牧獸醫(yī)站/動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，西藏 林芝 860000；4.昌都市左貢縣畜牧站，西藏 左貢 854400）

非洲豬瘟（African swine fever，ASF）是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）必須報(bào)告的動(dòng)物疫病之一，也是我國規(guī)定的一類動(dòng)物疫病[1]，是由非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的一種烈性、出血性傳染病，給我國乃至全世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失和社會(huì)影響[2]。1900年非洲豬瘟首次在非洲東部暴發(fā)；1921年肯尼亞蒙哥馬利首次報(bào)道非洲豬瘟引起家豬發(fā)病，死亡率高達(dá)100%，隨后非洲南部和東部相繼報(bào)道了非洲豬瘟疫情；1950年非洲豬瘟傳至非洲西部，并相繼在葡萄牙、西班牙、俄羅斯等歐洲國家暴發(fā)，給各國的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大損失[3]。

2018年8月，世界衛(wèi)生組織報(bào)道了中國第一例非洲豬瘟疫情，發(fā)病地為遼寧省沈陽市，發(fā)病豬場死亡生豬47頭，病死豬解剖見脾臟梗死、極度腫大、易碎，間質(zhì)性肺炎、肺出血，淋巴結(jié)出血等病理變化[4]。此后，非洲豬瘟疫情在我國迅速傳播，截至2018年12月31日，已有23個(gè)?。▍^(qū)）超過100起家豬感染非洲豬瘟的報(bào)道[3,4]。目前，世界各國圍繞非洲豬瘟病毒滅活疫苗、弱毒疫苗、亞單位疫苗及抗病毒藥物開展了大量研究，但暫未研制出高效、安全的非洲豬瘟疫苗及藥物。非洲豬瘟各種綜合防控措施落實(shí)較困難，對(duì)我國乃至世界養(yǎng)豬業(yè)仍然具有重大威脅[5]。

藏豬是我國青藏高原地區(qū)特有的家畜和優(yōu)勢(shì)豬種，具有抗寒、耐低氧、肉質(zhì)風(fēng)味獨(dú)特等特點(diǎn)，一直深受消費(fèi)者和牧民的喜愛[6]。2019年4月7日，林芝市巴宜區(qū)、波密縣、工布江達(dá)縣發(fā)生非洲豬瘟疫情[7]，經(jīng)過防疫人員堅(jiān)持不懈的努力，疫情得到了有效控制，但發(fā)病豬和死豬的全血、組織、分泌物和排泄物等均含有病毒，極易對(duì)豬群環(huán)境造成污染，嚴(yán)重威脅著當(dāng)?shù)仞B(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展[8]。為了監(jiān)測(cè)林芝、昌都等地非洲豬瘟感染風(fēng)險(xiǎn)，本研究共采集藏豬血清588份進(jìn)行非洲豬瘟血清抗體ELISA檢測(cè)，并進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 血清來源

2020年，采集藏豬血清588份，其中昌都市左貢縣302份，林芝市286份（巴宜區(qū)64份、察隅縣40份、墨脫縣43份、米林縣30份、朗縣79份、波密縣30份）。

1.2 主要試劑

非洲豬瘟病毒（ASFV）抗體檢測(cè)ELISA試劑盒，購自無錫優(yōu)聯(lián)生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)為200704。

1.3 主要儀器

恒溫培養(yǎng)箱BOXUN，購自上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；自動(dòng)酶標(biāo)儀Thermo，購自上海創(chuàng)萌生物有限公司；超純水機(jī)UPR-11-15NZ，購自四川優(yōu)普超純科技有限公司；微量移液器Eppendorf，購自賽伯樂（上海）儀器有限公司。

1.4 檢測(cè)方法

樣品檢測(cè)嚴(yán)格按照試劑盒使用說明書進(jìn)行操作。

1.5 結(jié)果判定

試驗(yàn)成立的條件是P-S≥0.9。若S/P≥0.25，樣品判定為陽性；若S/P＜0.25，樣品判定為陰性。S為樣品OD630nm平均值，P為陽性對(duì)照OD630nm平均值，N為陰性對(duì)照OD630nm平均值。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

按照地區(qū)、養(yǎng)殖模式、性別、年齡分別統(tǒng)計(jì)陽性率，并用SPSS軟件進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，P＜0.001為差異極顯著，P＜0.05為差異顯著，P＞0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

藏豬非洲豬瘟血清抗體檢測(cè)結(jié)果見表1。未檢測(cè)出非洲豬瘟陽性血清，抗體陽性率為0，不同地區(qū)、不同養(yǎng)殖模式、不同年齡的藏豬陽性率差異不顯著（P＞0.05）。

表1 藏豬非洲豬瘟血清抗體檢測(cè)結(jié)果

3 討論

非洲豬瘟病毒為呈二十面體對(duì)稱的DNA病毒，屬非洲豬瘟病毒科（Asfarviridae）、非洲豬瘟病毒屬（Asfarvirus）成員，病毒直徑175～215nm，有囊膜，基因組為一條線性的雙鏈DNA分子。主要有直接接觸傳播、間接接觸傳播和媒介蜱傳播3種傳播方式，主要有病毒分離、病毒抗原檢測(cè)、病毒抗體檢測(cè)及基因組DNA檢測(cè)等檢測(cè)方法，一般感染3～4 d后即可進(jìn)行抗體檢測(cè)，從而快速、有效地對(duì)非洲豬瘟疫情進(jìn)行診斷[8]。目前還未研發(fā)出商品化、安全、有效的非洲豬瘟疫苗，血清檢測(cè)中不存在疫苗抗體的干擾，因此通過血清學(xué)抗體試驗(yàn)檢測(cè)亞急性型和慢性型病例具有重要意義[9]。

非洲豬瘟病毒基因組較大、功能復(fù)雜、活力強(qiáng)、抵抗力強(qiáng)且易變異，其疫苗研制難度較大。滅活疫苗僅具有部分保護(hù)性或不具有保護(hù)性；基因缺失減毒活疫苗被證實(shí)具有同源保護(hù)性，但仍未解決其安全問題；DNA疫苗能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫，但不能起到保護(hù)作用；亞單位疫苗具有部分保護(hù)性；病毒活載體疫苗仍需要進(jìn)一步研究；新型的單周期病毒疫苗正被研究，為非洲豬瘟新型疫苗研制提供了新選擇[10]。

非洲豬瘟病毒耐低溫、耐鹽、存活力強(qiáng)（在死豬尸體中可存活1年），黏附能力較強(qiáng)，可隨生豬屠宰、運(yùn)輸、食用等形成流動(dòng)的污染鏈。由于沒有有效的商品化疫苗及治療藥物，切斷傳播途徑是廣大生豬養(yǎng)殖企業(yè)和養(yǎng)殖戶有效防控該病的重要措施和必然手段[11]。

首先，各級(jí)政府要加大非洲豬瘟相關(guān)知識(shí)的宣傳力度，呼吁全民防控、全民監(jiān)督，做到疫情公開透明、責(zé)任落實(shí)到人。加強(qiáng)非洲豬瘟檢驗(yàn)檢疫和防控工作，成立監(jiān)督小組，加大監(jiān)督管理力度，做到聯(lián)防聯(lián)控、周密部署、精心安排。同時(shí)，加強(qiáng)經(jīng)費(fèi)保障[12]。

其次，養(yǎng)殖場要嚴(yán)格落實(shí)封閉飼養(yǎng)。引種、生豬銷售、人員和車輛往來是感染非洲豬瘟的主要途徑，養(yǎng)殖場（戶）應(yīng)采取封閉管理模式，對(duì)各環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格把控，盡量減少生豬的交易次數(shù)，必要時(shí)暫停交易。禁止從疫區(qū)購進(jìn)生豬，做好早期檢測(cè)工作，嚴(yán)格引種，對(duì)養(yǎng)殖人員、物品、車輛等進(jìn)行全面檢查和消毒，進(jìn)入場內(nèi)的人員須穿戴防護(hù)服，嚴(yán)格做好場內(nèi)日常消毒和養(yǎng)殖區(qū)域的生物安全隔離工作[12-14]。

最后，要引導(dǎo)農(nóng)戶規(guī)范化養(yǎng)殖。非洲豬瘟疫情暴發(fā)以來，衛(wèi)生及生物安全管理松懈的小型養(yǎng)殖戶、散養(yǎng)戶遭遇了沉重打擊。為了加快對(duì)非洲豬瘟疫情的防控和凈化步伐，建議相關(guān)部門出臺(tái)相應(yīng)政策，積極引導(dǎo)養(yǎng)殖戶進(jìn)行規(guī)范化養(yǎng)殖，做好生物安全管理工作[15]。

4 結(jié)論

本次研究采集的588份藏豬血清未檢測(cè)出非洲豬瘟陽性血清，抗體陽性率為0。說明目前西藏昌都、林芝地區(qū)非洲豬瘟病毒凈化效果較好，為非洲豬瘟防控和藏豬養(yǎng)殖提供了參考依據(jù)。