趙麗瓊，唐當(dāng)柱，陳津禾，王曉芳，楊 艾，金文艷

（昆明衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院，昆明 650101）

當(dāng)前，國內(nèi)外學(xué)者對滇重樓進(jìn)行了大量的研究[1]，但是關(guān)于重樓藥材品質(zhì)的研究依然處于有結(jié)果、無結(jié)論的局面[2]。基于此，本課題組通過對比曲靖、玉溪、大理滇重樓種植基地所種植的同一品種的滇重樓品質(zhì)，探討其主要活性成分差異與根際土壤因子的相關(guān)性，以期為進(jìn)一步研究滇重樓品質(zhì)差異、野生變家種及規(guī)范化種植提供參考，繼而實(shí)現(xiàn)滇重樓的大規(guī)模培育和大面積推廣。

1 試驗(yàn)過程

1.1 試驗(yàn)儀器

本次研究所用儀器如下：日本島津集團(tuán)生產(chǎn)的型號(hào)為UV-2450的紫外可見分光光度計(jì)；梅特勒-托利多儀器上海有限公司生產(chǎn)的型號(hào)為ML204的分析天平；上海悅豐儀器儀表有限公司生產(chǎn)的型號(hào)為FP640的火焰光度計(jì)；江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司生產(chǎn)的型號(hào)為BS-2F的振蕩培養(yǎng)箱；杭州奧利龍儀器有限公司生產(chǎn)的型號(hào)為PHB-10的pH計(jì)。

1.2 供試藥材及土壤

1.2.1 供試藥材

滇東選擇曲靖市馬龍區(qū)大莊鎮(zhèn)民村村基地種植的高稈大葉滇重樓，當(dāng)?shù)睾０螢? 980 m；滇中選擇玉溪市紅塔區(qū)春和街道馬井村基地種植的高稈大葉滇重樓，當(dāng)?shù)睾０螢? 900 m；滇西選擇大理白族自治州祥云縣云南驛鎮(zhèn)前所村基地種植的高稈大葉滇重樓，當(dāng)?shù)睾０螢? 200 m。

1.2.2 土壤

在曲靖、玉溪、大理3地滇重樓種植基地采集土樣，每個(gè)采樣區(qū)選取3個(gè)點(diǎn)，采集土層深度分別為0～5、6～10、11～15 cm。3個(gè)點(diǎn)共采集土壤1 kg左右，將其混合得到樣品。對樣品登記編號(hào)后（S1、S2和S3）進(jìn)行預(yù)處理，裝瓶送檢，得到滇重樓根際土壤樣本3份，作為本次研究對照組。

在宣威海岱滇重樓種植基地隨機(jī)抽取栽培滇重樓的種植土壤，采用對角線法在種植地的對角線交叉點(diǎn)處定點(diǎn)（離地表5 cm處），取6～15 cm深處的土壤，取其平均值，預(yù)處理后編號(hào)（S4）送檢，作為本次研究試驗(yàn)組。

1.3 方法

2019年4月21日，在對照組和試驗(yàn)組中種植同一品種滇重樓。對照組種植土壤不進(jìn)行人為改善。試驗(yàn)組種植土壤進(jìn)行人為改善：根據(jù)肥料效應(yīng)試驗(yàn)，改變土壤氮、磷、鉀含量，在2019年4月21日以撒施的方式第一次施入磷肥（第1年作為基肥），在2019年4月和2020年4月、6月和8月以撒施的方式分4次施入氮肥。每次施肥完成后徹底澆透水。下面分析具體的測定方法。

一是滇重樓根莖品質(zhì)測定。采用高效液相色譜法測定滇重樓根莖的皂苷含量，同時(shí)測試和對比兩組滇重樓根莖的總黃酮、總多糖含量。二是滇重樓根際土壤養(yǎng)分測定。測定指標(biāo)包括速效氮、磷、鉀含量以及有機(jī)質(zhì)含量、pH。三是滇重樓根際土壤酶活性測定。測定對象有蔗糖酶、磷酸酶、過氧化氫酶、多酚氧化酶、蛋白酶和脲酶。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS17．0統(tǒng)計(jì)軟件中的獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，分別比較不同土壤下滇重樓根莖的品質(zhì)，分析品質(zhì)差異的顯著性。

2 結(jié)果

2.1 兩組滇重樓根莖品質(zhì)比較

兩組滇重樓根莖品質(zhì)的比較結(jié)果如表1所示。

表1 兩組滇重樓根莖品質(zhì)比較

2.2 兩組根際土壤化學(xué)指標(biāo)比較

兩組根際土壤化學(xué)指標(biāo)的比較結(jié)果如表2所示。

表2 兩組根際土壤化學(xué)指標(biāo)比較

2.3 兩組滇重樓根際土壤酶活性和土壤養(yǎng)分的相關(guān)性分析

2.3.1 試驗(yàn)組

根際土壤酶活性與pH、有機(jī)質(zhì)含量以及速效磷含量均為顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）；根際土壤蔗糖酶活性與pH、有機(jī)質(zhì)含量為極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；根際土壤酸性磷酸酶活性與有機(jī)質(zhì)、速效氮含量為極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；根際土壤中性磷酸酶、堿性磷酸酶活性與有機(jī)質(zhì)含量為極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），與速效氮含量為顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）；根際土壤過氧化氫酶活性與有機(jī)質(zhì)含量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）；根際土壤蛋白酶活性與有機(jī)質(zhì)含量和速效氮含量為極顯著正相關(guān)關(guān)系（相關(guān)系數(shù)分別為0.806、0.718，P＜0.01）。

2.3.2 對照組

根際土壤脲酶活性與pH為顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）；根際土壤酸性磷酸酶活性與有機(jī)質(zhì)含量為極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），與速效磷含量為顯著正相關(guān)關(guān)系（相關(guān)系數(shù)為0.501，P＜0.05）；根際土壤中性磷酸酶活性與有機(jī)質(zhì)含量為極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；根際土壤蛋白酶活性與有機(jī)質(zhì)含量為極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）。

2.4 兩組滇重樓根莖品質(zhì)與根際土壤因子的相關(guān)性分析

兩組滇重樓根莖品質(zhì)的總皂苷含量與速效鉀含量表現(xiàn)出顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）；總多糖含量與種植地土壤的堿性磷酸酶活性表現(xiàn)出顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）；總黃酮含量與種植地土壤的蔗糖酶活性表現(xiàn)出顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）。

3 討論

滇重樓的干燥根莖是傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中一味功效顯著的中藥材[3]。近年來，市場對于滇重樓的需求激增，同時(shí)滇重樓的人工種植技術(shù)尚不完善且種植周期長、種植成功率低、種植條件苛刻，加之野生滇重樓資源瀕危，使得滇重樓的價(jià)格幾度飆升[4]。為了穩(wěn)定滇重樓價(jià)格、保證滇重樓的市場供給，發(fā)展和完善滇重樓人工種植技術(shù)迫在眉睫[5]。

本次研究發(fā)現(xiàn)，在通過施肥對試驗(yàn)組土壤進(jìn)行改良后，試驗(yàn)組滇重樓的根莖品質(zhì)明顯優(yōu)于未進(jìn)行土壤改良的對照組，數(shù)據(jù)顯示，試驗(yàn)組滇重樓根莖總皂苷、總黃酮含量明顯更高（P＜0.05），總多糖含量明顯更低（P＜0.05）。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)，滇重樓根莖的總皂苷與土壤的多酚氧化酶活性正相關(guān)（P＜0.05），總黃酮與pH、脲酶活性以及速效鉀負(fù)相關(guān)（P＜0.05），總多糖與堿性磷酸酶活性負(fù)相關(guān)(P＜0.05）。研究結(jié)果表明，改善土壤肥力能夠直接影響土壤活性，實(shí)現(xiàn)滇重樓品質(zhì)的提升[5]。

4 結(jié)論

滇重樓種植地土壤活性因子和養(yǎng)分與滇重樓根莖品質(zhì)密切相關(guān)。在人工種植滇重樓時(shí)，要合理調(diào)整種植地土壤的養(yǎng)分含量和比例。通常，為了提升滇重樓根莖的總皂苷、總黃酮含量，降低總多糖含量，施肥時(shí)應(yīng)當(dāng)有意識(shí)地增加氮肥和磷肥，控制鉀肥。