馬 琳,陳昌婕,苗玉煥,郭蘭萍,劉大會(huì)*
(1 湖北中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源中心,湖北武漢 430065;2 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥資源中心道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地,北京 100700)
艾葉為菊科植物艾 (Artemisia argyi Lévl.et Van)的干燥葉,其主要成分為揮發(fā)油、酚酸和黃酮等,具有溫經(jīng)止血、散寒止痛、祛濕止癢的功效[1]。干燥艾葉經(jīng)過(guò)反復(fù)曬杵、捶打、粉碎,篩除雜質(zhì)、粉塵,可得到軟細(xì)如棉的“艾絨”,其成分主要為非腺毛。艾絨是艾灸的主要材料,艾絨質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響了艾灸療效。艾葉主產(chǎn)于湖北、河南、河北等省,其中以湖北蘄艾為著名道地藥材。隨著艾葉在臨床和大健康產(chǎn)業(yè)應(yīng)用越來(lái)越廣泛,現(xiàn)已在全國(guó)10余省份進(jìn)行大面積人工栽培,總面積超過(guò)5萬(wàn)hm2,僅湖北蘄春縣蘄艾的人工種植面積就有1.2萬(wàn)hm2,成為促進(jìn)當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整和老百姓脫貧致富的有效特色產(chǎn)業(yè)。但由于全國(guó)各地艾葉人工栽培歷史較短,田間優(yōu)質(zhì)高效種植管理技術(shù)非常缺乏,導(dǎo)致栽培艾葉產(chǎn)量和質(zhì)量低下,極大影響了農(nóng)戶生產(chǎn)積極性和臨床用藥安全。
氮是植物生長(zhǎng)發(fā)育的必需元素,顯著影響中藥材的產(chǎn)量和品質(zhì)。肖云華等[2]研究表明,施用氮肥可以明顯提高菘藍(lán)葉片的凈光合速率,增加地上部和地下部干物質(zhì)積累量,但持續(xù)增加氮肥施用量后,菘藍(lán)地上部和地下部干物質(zhì)積累量有所下降。盧麗蘭等[3]發(fā)現(xiàn)廣藿香揮發(fā)油含量隨著供氮水平的提高而增加。隨著施氮量的增加,廣金錢草總黃酮含量和丹參主要酚酸類成分含量先增加后降低[4-5]。王曉軍等[6]在寧夏艾草上開(kāi)展了“3414”肥料效應(yīng)試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)低氮水平下,隨著施氮量增加寧夏艾草產(chǎn)量逐漸提高,并推薦了最佳效益產(chǎn)量的氮肥用量75.66 kg/hm2。植物非腺毛是植物外表皮細(xì)胞發(fā)育形成的無(wú)腺體的毛狀附屬結(jié)構(gòu),它存在于許多陸生植物器官表面,是植物長(zhǎng)期進(jìn)化形成的應(yīng)對(duì)惡劣環(huán)境的特殊結(jié)構(gòu)。研究表明栽培金銀花花蕾非腺毛的性狀特征受環(huán)境和遺傳兩因素共同影響[7],而施肥對(duì)植物非腺毛生長(zhǎng)發(fā)育的影響尚不清楚。目前,關(guān)于施用氮肥對(duì)艾葉葉絨、揮發(fā)油等品質(zhì)指標(biāo)的影響也未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。因此本研究以湖北蘄春縣蘄艾為研究對(duì)象,通過(guò)2年的田間試驗(yàn)研究不同氮肥施用量對(duì)蘄艾產(chǎn)量和品質(zhì)的影響,旨在為蘄艾的規(guī)范化施肥提供科學(xué)指導(dǎo)。
于2018和2019年在國(guó)家中藥材產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系黃岡綜合試驗(yàn)站蘄春試驗(yàn)示范基地開(kāi)展試驗(yàn),試驗(yàn)地分別位于湖北省蘄春縣八里湖農(nóng)場(chǎng)和赤東鎮(zhèn)蘄艾種植基地。蘄春屬亞熱帶季風(fēng)氣候,江淮小氣候區(qū),年平均氣溫為16.8℃,年降雨量為1341.7 mm。兩試驗(yàn)地均為黃棕壤,八里湖試驗(yàn)地土壤肥力狀況為:有機(jī)質(zhì)19.64 g/kg,全氮1. 01 g/kg,堿解氮96.44 mg/kg,全磷1. 30 g/kg,速效磷57.68 mg/kg,全鉀29.63 g/kg,速效鉀120.76 mg/kg,pH 4.55。赤東鎮(zhèn)試驗(yàn)地土壤肥力狀況為:有機(jī)質(zhì)21.8 g/kg,全氮1.12 g/kg,堿解氮123.94 mg/kg,全磷0.56 g/kg,速效磷31.57 mg/kg,全鉀23.04 g/kg,速效鉀197.59 mg/kg,pH 5.12。供試蘄艾種苗為當(dāng)?shù)爻S闷贩N,由種植基地提供,經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)劉大會(huì)教授鑒定為艾 (Artemisia argyi Lévl. et Vant.);供試肥料為尿素(N 46%)、過(guò)磷酸鈣 (P2O515%)、氯化鉀 (K2O 60%)。
采用兩年的田間定位試驗(yàn),共設(shè)置5個(gè)施氮 (N)處理:0 (N0)、60 (N60)、120 (N120)、180 (N180)、240(N240) kg/hm2,每個(gè)處理施磷 (P2O5) 120 kg/hm2、鉀(K2O) 120 kg/hm2。每處理設(shè)置4次重復(fù),共20個(gè)小區(qū),小區(qū)面積為10 m2(1.5 m × 6.5 m,包含溝距30 cm),隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。
2018年蘄春縣八里湖農(nóng)場(chǎng)田間試驗(yàn)為新種蘄艾地,選取蘄艾優(yōu)良母株上未發(fā)芽根狀莖作種苗,于2018年1月16日按照株行距20 cm × 30 cm定植于種植基地,3月15日后新栽蘄艾根莖陸續(xù)出苗,試驗(yàn)于3月1日將60%的氮肥、全部的磷肥和鉀肥作為基肥撒施于小區(qū)畦面,并用畦溝土將撒施的肥料淺覆蓋,4月5日和5月5日分兩次平均追施剩余的40%氮肥。2019年蘄春縣赤東鎮(zhèn)田間試驗(yàn)是在二年生蘄艾種植基地進(jìn)行 (蘄艾為多年生宿根植物),頭年采用當(dāng)?shù)爻R?guī)方式進(jìn)行施肥,待冬季蘄艾地上部分枯萎清理干凈后,于2019年1月15日將60%的氮肥、全部的磷肥和鉀肥作為基肥撒施于小區(qū)畦面,并用畦溝土將撒施的肥料淺覆蓋,2月10日田間老株陸續(xù)發(fā)新芽,2月25日和3月25日分兩次平均追施剩余的40%氮肥。各試驗(yàn)其余農(nóng)事操作同常規(guī)蘄艾種植。
1.3.1 農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量測(cè)定與采收 調(diào)研與采收分別于2018年6月10日和2019年6月15日進(jìn)行。在各試驗(yàn)小區(qū)選取具有代表性的30株蘄艾測(cè)定相關(guān)農(nóng)藝性狀,其中株高為近地面基部至蘄艾莖頂端的高度;莖粗為蘄艾莖稈高度二分之一處的直徑;枯葉高為植株莖稈中下部枯葉處的高度;統(tǒng)計(jì)單株蘄艾的主干葉片數(shù),并測(cè)定每株蘄艾中部3片葉片的寬和長(zhǎng);每小區(qū)選取2個(gè)長(zhǎng)為1.5 m、寬為1 m的采樣點(diǎn),對(duì)采樣點(diǎn)內(nèi)的蘄艾進(jìn)行采收,之后進(jìn)行陰干處理并稱量蘄艾葉片干重,計(jì)算單位面積葉片產(chǎn)量;統(tǒng)計(jì)采樣點(diǎn)內(nèi)單位面積蘄艾有效采收株數(shù),即為蘄艾單位面積出苗數(shù)。
1.3.2 礦質(zhì)元素含量測(cè)定 準(zhǔn)確稱取過(guò)2 mm篩的艾粉0.1000 g于干燥消解管內(nèi),依次加入3.0 g K2SO4、0.2 g CuSO4·5H2O 和 8 mL H2SO4進(jìn)行石墨爐消解,消解完全后靜置冷卻,用K9860全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定氮 (N) 元素含量[8]。精密稱取過(guò)2 mm篩的艾粉0.1000 g于聚乙烯消化管內(nèi),加入2 mL H2O2、1 mL HF和10 mL HNO3進(jìn)行微波消解,消解完全后靜置冷卻,定容,采用鉬銻抗比色法測(cè)定磷 (P) 元素含量,采用火焰原子吸收分光光度法測(cè)定鉀 (K)、鎂(Mg)、鈣 (Ca)、鋅 (Zn) 等元素含量,采用石墨爐原子吸收分光光度法測(cè)定銅 (Cu) 元素含量[8]。
1.3.3 葉片氮肥利用效率計(jì)算[9-10]葉片氮積累量(kg/hm2) = 葉片氮含量 × 葉片產(chǎn)量;
葉片氮肥偏生產(chǎn)力 (NPFP,kg/kg) = 施氮區(qū)葉片產(chǎn)量/氮肥投入量;
葉片氮肥吸收率 (ARE,%) = (施氮區(qū)艾葉氮積累量-未施氮區(qū)艾葉氮積累量)/氮肥投入量 × 100;
葉片氮肥農(nóng)學(xué)效率 (NAE,kg/kg) = (施氮區(qū)艾葉產(chǎn)量-未施氮區(qū)艾葉產(chǎn)量)/氮肥投入量
1.3.4 葉絨含量測(cè)定 用四分法從每份葉片樣品中抽取10 g干品,置于轉(zhuǎn)速為28 000 r/min的高速萬(wàn)能粉碎機(jī)中粉碎30 s,將粉碎后的混合物置于2 mm篩中,篩凈全部粉末,得到艾絨,稱定質(zhì)量,將艾絨質(zhì)量除以艾葉樣品質(zhì)量,得到出絨率,將出絨率乘以葉片產(chǎn)量,即為葉絨產(chǎn)量。
1.3.5 總揮發(fā)油及揮發(fā)性成分含量測(cè)定 參照2020年版《中國(guó)藥典 (四部)》通則 2204“揮發(fā)油測(cè)定法”測(cè)定揮發(fā)油含量,并運(yùn)用ThermoFisher Trace 1310型氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀 (美國(guó)賽默飛公司),測(cè)定艾葉揮發(fā)油中桉油精、α-側(cè)柏酮、樟腦、龍腦、α-石竹烯、β-丁香烯、石竹素的含量[11-12]。
1.3.6 黃酮和酚酸類成分含量測(cè)定 取過(guò)一號(hào)篩的艾粉用純甲醇進(jìn)行浸提,并通過(guò)Agilent1260高效液相色譜儀(美國(guó)安捷倫公司)測(cè)定艾葉粉末中新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸B、異綠原酸A、異綠原酸C、山柰酚、棕矢車菊素、異澤蘭黃素的含量[13]。
采用Excel 2010,IBM SPSS Statistics 26軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和統(tǒng)計(jì)分析,采用GraphPad Prism 8軟件作圖。
從表1可以看出,2年試驗(yàn)中,隨著氮肥施用量的增加,蘄艾的出苗數(shù)和葉片產(chǎn)量呈先增加后降低的趨勢(shì),在2018年是N180處理最高,2019年是N120處理最高,與N0處理相比,蘄艾出苗數(shù)分別增加了108.8% (2018年)和57.1% (2019年),葉片產(chǎn)量分別提高了159.3% (2018年)和95.5% (2019年)。隨著氮肥施用量的增加,蘄艾株高和葉片數(shù)逐漸增加,2018年莖粗和枯葉高先增加后降低,葉片大小無(wú)顯著差異,2019年莖粗、枯葉高和葉片大小均逐漸增加。為深入分析氮肥施用量與蘄艾葉片產(chǎn)量的關(guān)系,將蘄艾葉片產(chǎn)量 (Y) 與氮肥施用量 (X) 進(jìn)行曲線擬合,得出2018和2019年一元二次氮肥效應(yīng)方程:Y2018= -0.1485X2+ 49.931X + 2832.4 (R2=0.9601),Y2019= -0.1044X2+ 35.814X + 3129 (R2=0.9853)。由此可以看出,2018、2019年蘄艾葉片產(chǎn)量隨著氮肥施用量的增加呈先提高后降低的趨勢(shì),在施氮量分別為168和172 kg/hm2時(shí),蘄艾達(dá)到最高葉片產(chǎn)量7030和6200 kg/hm2。
表1 不同氮肥施用量對(duì)蘄艾農(nóng)藝性狀及葉片產(chǎn)量的影響Table 1 Effects of N application rates on the agronomic traits and leaf yield of Artemisia argyi
由表2可知,隨著氮肥施用量的增加,蘄艾葉片中N和Cu元素含量呈持續(xù)增加趨勢(shì),N含量上升幅度2018和2019年分別為18.1%~47.9%和12.6%~56.6%,Cu含量上升幅度分別為10.3%~48.0%和28.9%~94.1%;K和Mg元素含量先增加后降低,K元素含量在N60處理最大,較N0處理分別增加了3.7% (2018年)和6.8% (2019年),Mg元素含量在N120處理最大,較N0處理分別增加了75.0%(2018年)和4.3% (2019年)。P含量在N240處理最高,但2018年未達(dá)顯著水平,2019年顯著高于其它處理。
2.3.1 對(duì)蘄艾藥材艾絨產(chǎn)量的影響 由圖1可知,在N60和N120處理蘄艾出絨率最大,2018年 (新地)較N0分別增加了8.5%、5.8% (P < 0.05),2019年較N0也有增加,但未達(dá)顯著水平;然而,N180和N240處理在2018和2019年均降低了蘄艾的出絨率。
圖1 不同氮肥施用量對(duì)蘄艾葉片出絨率的影響Fig. 1 Effects of N application rates on the output rate of moxa in the leaves of Artemisia argyi
施氮顯著增加了蘄艾絨產(chǎn)量 (圖2),2018年蘄艾絨產(chǎn)量在N180處理最高,與N120處理沒(méi)有顯著差異,但顯著高于N60和N240處理;2019年在N120處理最高,且顯著高于其他處理。分別將兩年的蘄艾絨產(chǎn)量 (Y) 與氮肥施用量 (X) 進(jìn)行曲線擬合,得出氮肥效應(yīng)方程分別為:Y2018= -0.0477X2+14.001X+715.82 (R2=0.9832),Y2019= -0.0325X2+9.2293X+771.26 (R2=0.9358),依照該方程計(jì)算,2018、2019年氮肥施用量分別為147和142 kg/hm2時(shí),蘄艾達(dá)到最高絨產(chǎn)量 1743 和 1426 kg/hm2。
圖2 不同氮肥施用量對(duì)蘄艾絨產(chǎn)量的影響Fig. 2 Effects of N application rates on moxa yield of Artemisia argyi
2.3.2 對(duì)蘄艾藥材總揮發(fā)油及其揮發(fā)性成分的影響
在2018—2019年試驗(yàn)中,隨著氮肥施用量增加,蘄艾葉片總揮發(fā)油含量整體上呈增加趨勢(shì),分別在N240和N180處理下最大,較N0處理分別增加了6.2%和17.8%。揮發(fā)性成分β-丁香烯和石竹素含量均在N240處理最高,與N0相比β-丁香烯含量分別增加了300.0% (2018年)和169.0% (2019年),石竹素含量分別增加了16.2% (2018年)和60.5%(2019年)。桉油精、α-側(cè)柏酮、樟腦、龍腦和α-石竹烯的含量均在N180處理達(dá)到最高,2018、2019與N0相比,桉油精含量分別增加了57.3%和56.5%,α-側(cè)柏酮含量分別增加了23.7%和80.1%,樟腦含量分別增加了100.0%和70.0%,龍腦含量分別增加了84.2%和52.9%,α-石竹烯含量分別增加了106.7% 和 52.5% (表3)。
表3 不同氮肥施用量對(duì)蘄艾總揮發(fā)油及其組分含量的影響Table 3 Effects of different N application rates on the contents of total volatile oil and its components in Artemisia argyi
2.3.3 對(duì)蘄艾藥材酚酸和黃酮類成分的影響 隨著氮肥施用量的增加,蘄艾葉片中酚酸和黃酮類成分含量呈先增加后降低趨勢(shì),2018和2019年最適宜于蘄艾葉片中黃酮及酚酸類成分積累的氮肥處理為N120、N60(表4)。2018年,N120處理艾葉新綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸B和異澤蘭黃素含量較N0處理分別增加了42.6%、26.6%、29.2%、16.7%,N60處理的綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸C、山柰酚和棕矢車菊素含量較N0處理分別增加了33.9%、3.2%、68.8%、71.0%和5.2%。2019年試驗(yàn)中,艾葉新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸B、異綠原酸A和異綠原酸C含量在N60處理最高,較N0處理分別增加了22.7%、29.9%、24.4%、22.5%、8.5%和9.8%,山柰酚含量在N180處理最高,較N0處理增加了5.0%,棕矢車菊素和異澤蘭黃素含量在N120處理最高,較N0處理分別增加了22.8%和13.9%。
表4 不同氮肥施用量對(duì)蘄艾葉片中酚酸和黃酮成分含量 (mg/kg) 的影響Table 4 Effects of N application rates on phenolic acid and flavonoid contents in the leaves of Artemisia argyi
2018年試驗(yàn)中隨著氮肥施用量增加,蘄艾葉片氮積累量呈先增加后減少的趨勢(shì),在N180處理最高;2019年試驗(yàn)中隨著氮肥施用量的增加,蘄艾葉片氮積累量呈持續(xù)增加趨勢(shì),在N240處理最高(圖3A)。2年試驗(yàn)中,各施氮處理與N0處理相比均顯著提高了蘄艾葉片氮積累量,增幅分別為114.0%~271.5% (2018年) 和73.8%~191.4% (2019年)。說(shuō)明施氮能顯著提高蘄艾葉片氮積累量。
隨著氮肥施用量的增加,氮肥偏生產(chǎn)力呈降低的趨勢(shì) (圖3B),各處理間均存在顯著差異,2年試驗(yàn)中,下降幅度分別為40.1%~71.2% (2018年) 和36.4%~70.1% (2019年),當(dāng)?shù)适┯昧繛?20~180 kg/hm2時(shí),氮肥偏生產(chǎn)力下降幅度最小。
2018年艾葉氮肥吸收率在氮肥施用量為60~180 kg/hm2時(shí)無(wú)顯著差異,當(dāng)?shù)适┯昧吭黾又?40 kg/hm2時(shí),艾葉氮肥吸收率顯著降低;2019年艾葉氮肥吸收率在氮肥施用量為60~120 kg/hm2時(shí)無(wú)顯著差異,當(dāng)?shù)适┯昧吭黾又?80~240 kg/hm2時(shí),艾葉氮肥吸收率顯著降低 (圖3C)。2年試驗(yàn)中蘄艾葉片氮肥吸收率在氮肥施用量為60~120 kg/hm2時(shí)下降幅度最小。
隨著氮肥施用量的增加,氮肥農(nóng)學(xué)效率呈降低的趨勢(shì) (圖3D),2年試驗(yàn)中,下降幅度分別為28.0%~66.6% (2018年) 和11.1%~60.9% (2019年),在氮肥施用量分別為120~180(2018年)和60~120 kg/hm2(2019年)時(shí),下降幅度最小。
圖3 不同氮肥施用量對(duì)蘄艾葉片氮積累量 (A)、氮肥偏生產(chǎn)力 (B) 和氮肥吸收率 (C) 氮肥農(nóng)學(xué)效率 (D) 的影響Fig. 3 Effects of different N application rates on N accumulation (A), nitrogen partial factor productivity ((B), nitrogen absorption rate (C), and nitrogen agronomic efficiency (D) in leaves of Artemisia argyi
研究表明,適宜的氮肥施用量能顯著促進(jìn)植株根系的伸長(zhǎng)和分支,有利于植株獲取更多的養(yǎng)分和水分[14],從而對(duì)地上部的生長(zhǎng)產(chǎn)生積極效應(yīng)[15]。本研究發(fā)現(xiàn),適量施用氮肥顯著促進(jìn)了蘄艾地下根莖生長(zhǎng)和潛伏芽的萌發(fā),蘄艾田間單位面積出苗數(shù)顯著增加,株高、莖粗、單株葉片數(shù)和葉片大小均顯著增加,從而提高了蘄艾葉片產(chǎn)量。但隨著氮肥施用量超過(guò)180和120 kg/hm2,過(guò)量施用氮肥,導(dǎo)致蘄艾葉片中K、Ca元素含量降低和N/P、N/K、N/Ca值增加,養(yǎng)分不平衡,植株葉片變薄變嫰,且田間植株下部葉也因通風(fēng)透光不良易焦枯死亡,植株枯葉高增加,最終導(dǎo)致蘄艾葉片產(chǎn)量下降。王曉軍等[6]在寧夏艾草上也發(fā)現(xiàn)隨著氮肥施用量增加,艾葉產(chǎn)量呈先增加后降低的趨勢(shì);只是其通過(guò)回歸分析發(fā)現(xiàn)艾葉最佳效益產(chǎn)量的氮肥用量為75.66 kg/hm2,本研究2年田間試驗(yàn)回歸分析發(fā)現(xiàn)蘄艾葉片最佳效益產(chǎn)量的氮肥用量為168~172 kg/hm2,氮肥用量比寧夏植艾高可能與兩地土壤、氣候和艾葉生育周期不一樣有關(guān)。另外,在藥用菊花種植上,隨著氮肥用量的提高,菊花中N/P、N/K、N/Ca值均逐步升高[16],本試驗(yàn)結(jié)果與其一致。
非腺毛在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,作為植物抵御自然災(zāi)害的一道天然屏障,對(duì)于抵御紫外線輻射、病原菌侵襲及水分過(guò)度蒸騰等方面起著不可或缺的作用[17]。有研究表明,Ca離子有助于非腺毛的生長(zhǎng)發(fā)育[18],而植物中Ca元素隨著氮肥施用量的增加而降低[16]。在本試驗(yàn)中,隨著氮肥施用量大幅增加,艾葉Ca元素含量下降和N/Ca值呈上升趨勢(shì),且Ca元素含量和葉片出絨率呈一定程度的正相關(guān),推測(cè)大量施用氮肥導(dǎo)致艾葉出絨率下降與葉片Ca元素含量下降有關(guān)。邊麗梅等[19]研究表明,施用氮肥能有效提高香青蘭揮發(fā)油含量,但當(dāng)?shù)适┯昧吭黾拥?25 kg/hm2時(shí),再增加氮肥施用量則揮發(fā)油含量會(huì)下降。薛啟等[20]研究發(fā)現(xiàn),氮鋅配施能有效提高藿香揮發(fā)油主要化學(xué)成分含量,高氮處理下胡薄荷酮含量較高,而中氮處理下胡椒粉甲醚含量較高。Liu等[21]研究發(fā)現(xiàn),低氮營(yíng)養(yǎng)有利于藥用菊花中總黃酮和綠原酸成分的積累。魯澤剛等[22]在研究氮磷鉀施用對(duì)燈盞花藥用成分含量的影響時(shí)發(fā)現(xiàn),隨著氮肥施用量的增加,燈盞花總黃酮含量逐步降低。萜類化合物是揮發(fā)油的主要組成成分,其合成受到礦質(zhì)養(yǎng)分的直接調(diào)控。在本試驗(yàn)中,高氮處理下艾葉Cu元素含量顯著增加,Ca和Zn元素含量顯著降低。葉麗云等[23]研究表明,增加Ca離子濃度能有效促進(jìn)靈芝三萜類化合物的積累。顧永華等[24]研究發(fā)現(xiàn),在茅蒼術(shù)的生長(zhǎng)過(guò)程中,降低供給營(yíng)養(yǎng)液中Zn元素的含量,有利于蒼術(shù)醇、β-桉葉醇和芹烷二烯酮的積累,降低Cu元素的含量,能顯著提高蒼術(shù)酮的含量?!吨袊?guó)藥典》(2020年版) 規(guī)定艾葉干燥品中桉油精含量不得少于0.05%,龍腦含量不得少于0.02%,在本試驗(yàn)中各處理艾葉桉油精含量均符合規(guī)定,而2018年N0處理和2019年N0、N60處理下龍腦含量未達(dá)到0.02%,表明缺氮和低氮條件下導(dǎo)致龍腦合成受阻。萜類化合物種類繁多,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,施氮對(duì)其影響的作用機(jī)制還需進(jìn)一步深入研究。根據(jù)碳素/營(yíng)養(yǎng)平衡(carbon-nutrient balance,CNB) 假說(shuō)[25],施氮能提高光合速率,促進(jìn)以C為基礎(chǔ)的次生代謝物質(zhì) (如酚酸和黃酮類化合物) 的積累,但過(guò)量的N供應(yīng),會(huì)導(dǎo)致以N為基礎(chǔ)的次生代謝產(chǎn)物增多,而以C為基礎(chǔ)的次生代謝產(chǎn)物積累會(huì)受到抑制。在本試驗(yàn)中,氮肥對(duì)蘄艾酚酸和黃酮類成分含量的影響與上述研究結(jié)果具有一致性。
氮積累量、氮肥偏生產(chǎn)力、氮肥表觀利用率和氮肥農(nóng)學(xué)效率作為衡量氮肥利用效率的指標(biāo),從不同角度描述了植物對(duì)氮肥的利用效率。在本試驗(yàn)中,隨著氮肥施用量的增加,2018年蘄艾葉片氮積累量呈先增加后降低趨勢(shì),2019年呈逐漸增加趨勢(shì),而氮肥偏生產(chǎn)力、葉片氮肥吸收率和氮肥農(nóng)學(xué)效率在2年試驗(yàn)中均呈不同程度的下降。不同氮肥處理對(duì)新艾田和老艾田蘄艾葉片氮肥利用效率影響差異不大。諸多研究表明,隨著施氮量的增加,植物氮素積累量增加,但氮素利用效率降低[26]。這可能是由于在一定范圍內(nèi)植物吸氮量隨著施氮量的增加而增加,但無(wú)法與施氮量完全同步增加,高氮肥施用量時(shí)氮肥的損失量也會(huì)增大。優(yōu)化施氮量可以大幅降低化肥氮的損失,提高氮素利用效率,結(jié)合上述衡量氮肥利用效率的4個(gè)指標(biāo),當(dāng)?shù)适┯昧繛?20 kg/hm2時(shí),蘄艾葉片氮肥的利用效率較高,在提高蘄艾葉片產(chǎn)量的同時(shí)降低了對(duì)環(huán)境的污染等問(wèn)題[27]。
不論新老艾田,蘄艾的產(chǎn)量對(duì)氮肥施用量的響應(yīng)基本一致,綜合考慮葉片產(chǎn)量和出絨率,適宜的氮肥施用量為120~180 kg/hm2。在該施氮量下,施用氮肥促進(jìn)了艾葉中總揮發(fā)油、β-丁香烯和石竹素成分的合成,促進(jìn)了蘄艾葉片中桉油精、α-側(cè)柏酮、樟腦、龍腦、α-石竹烯及酚酸和黃酮類成分的積累;而當(dāng)?shù)适┯昧吭?20 kg/hm2左右時(shí),蘄艾葉片的氮肥利用效率較高。通過(guò)擬合計(jì)算,新蘄艾以葉片產(chǎn)量為目標(biāo)氮肥用量為170 (168~172) kg/hm2。老蘄艾以艾絨產(chǎn)量為目標(biāo),生產(chǎn)上建議氮肥用量為144 (141~147) kg/hm2;以提取揮發(fā)油及其組分為目標(biāo),生產(chǎn)上建議氮肥用量在180 kg/hm2左右;以提取酚酸和黃酮類成分為目標(biāo),生產(chǎn)上建議氮肥用量為 60~120 kg/hm2。